大鼠急慢性心肌缺血模型的建立及GPR91表达的变化

摘要

目的：探讨G蛋白偶联受体91(G Protein-coupled-receptor91,GPR91)在大鼠心脏结扎引起的急性心肌缺血,低压低氧导致慢性心肌缺血损伤中的变化. 方法：分别建立心脏左冠状动脉前降支结扎引起的大鼠急性心肌缺血模型,低压低氧所致大鼠慢性心肌缺血模型.48只SD大鼠随机分为急性心肌缺血实验组(18只,共三组,对照组、缺血12h组和缺血24h组,假手术组作为对照组,每组6只)和慢性心肌缺血实验组(30只,共5组,0天组、缺血1天、3天、5天和7天组,每组6只).通过大鼠心电图及TTC染色评价急性心肌缺血手术模型.酶动力法检测各模型组血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)以及心肌肌钙蛋白(cTn-Ⅰ)表达水平.Q-PCR法检测急、慢性心肌缺血模型大鼠心肌组织中GPR91基因表达水平的变化.Western Bolt法检测急、慢性心肌缺血模型大鼠心肌组织中GPR91蛋白表达水平的变化. 结果：急性心肌缺血模型中,血清中LDH、CK以及cTn-Ⅰ的表达水平较正常组上升,并以cTn-Ⅰ的表达上调最为显著(P＜0.05);慢性心肌缺血模型中,血清中LDH及CK的表达水平较0天组逐渐升高,3天组达到峰值(P＜0.05),5、7天组较3天组出现小幅度的下降(P＜0.01);急性心肌缺血模型中,心电图在手术及缺血相应时间后仍可见ST段持续弓背型抬高,模型12h及24h组心脏梗死面积分别23.18±3.46及34.85±2.22(P＜0.05);与对照组相比,急性心肌缺血模型12h及24h组心脏组织中GPR91mRNA及蛋白表达增加(P＜0.05).大鼠慢性心肌缺血模型中,各实验组较正常组心肌组织中GPR91mRNA及蛋白表达显著增加,其中低压低氧5天组或因已适应低压低氧环境出现小幅度下调但总体趋势较正常组明显上升(P＜0.05)。 结论：GPR91在缺血心肌中随着缺血程度加重mRNA及蛋白水平呈现上调趋势,可为GPR91作为缺血性心肌损伤药物作用靶点研究提供基础.