基于TLR4/NF-κB调控炎症作用雷公藤多苷抗巨噬细胞炎症反应的研究

摘要

为研究雷公藤多苷(Tripterygium wilfordii polycoride,TWP)对LPS诱导巨噬细胞炎症反应时,对炎症因子TNF-α、IL-1β的抑制作用,对TLR4/NF-kB调控炎症作用的干预研究,同时观察其对TLR4/NF-kB调控炎症作用的影响.采用噻唑蓝(MTT)法检测受试药物TWP、地塞米松(DXM)及硫唑嘌呤(AZA)对细胞生长的影响,选择合适的药物浓度.通过LPS诱导小鼠RAW264.7细胞株产生炎症反应,Elisa法检测TNF-α及IL-1β的释放,Westen blotting法检测TLR4及NF-κB p65蛋白表达水平,荧光定量PCR(RT-PCR)测定TLR4及NF-κB的表达.实验结果显示TWP剂量依赖性抑制巨噬细胞炎性细胞因子TNF-α、IL-1β的释放,TWP各剂量组作用均逊于DXM,但TWP高剂量组与AZA组作用比较,对TNF-α作用其优于AZA组;对IL-1β作用其相当于AZA组.对TLR4/NF-kB调控炎症作用的影响,TWP剂量依赖性下调TLR4及NF-κB p65的表达,其作用相当于或优于DXM及AZA.最终得出结论：本项研究显示TWP具有抑制TNF-α及IL-1β的作用,下调TLR4、NF-κB p65受体的表达是其作用的机制之一.