鸡传染性支气管炎病毒荧光定量PCR检测方法的建立

摘要

鸡传染性支气管炎病毒(Infectious Bronchitis Virus,IBV)属于冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒属(Coronavirus)的γ冠状病毒群成员.IBV有多种血清型,不同血清型之间的抗原性差异较大.IBV遗传变异方式特殊,变异速度快,不时出现新的基因型导致抗原性变异.目前,IBV的检测方法有病毒分离、血清学试验和分子生物学方法等.分子生物学方法中,反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)虽然具有灵敏度高、快速等优点,但不能实现病毒的定量检测.实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术，不但具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点，还能实现对病毒的定量检测，对病毒的致病机理、免疫机理、防控效果的研究都具有重要意义。本试验针对IBV基因组5'端非编码区保守区域设计引物建立荧光定量PCR检测方法，适用于各种组织、细胞、体液样品及疫苗生产中间产品中IBV基因组的定量检测。