鸡传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

摘要

为建立快速检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的血清学方法,本试验以IBV为检测抗原,建立了一种检测IBV抗体的间接ELISA方法,并对各种检测条件进行了优化.研究结果显示,抗原的最佳包被浓度为19.2 μg/mL,最佳包被条件为37℃1h后4℃过夜;血清的最佳稀释度为1∶800,37℃孵育60 min;酶标二抗稀释度为1∶7 000,37℃孵育60 min;底物显色为37℃避光作用10 min.经特异性、重复性、敏感性试验证明,该方法与鸡常见病原的阳性血清均无交叉反应,重复性较好及血清稀释至1∶12 800时仍可检测到IBV抗体.结果表明,本试验所建立的间接ELISA方法具有良好的特异性、重复性和敏感性.