表面等离子共振技术运用于抗淀粉样蛋白聚集化合物的实验研究

摘要

目的：探索基于表面等离子共振技术的抗淀粉样蛋白聚集化合物的实验方法. 方法：制备AmyloidβProtein Fragment1-40与1-42单体和聚体,配制对照分析物CR/TS/TT浓度梯度(0μg/ml、7.81μg/ml、15.63μg/ml、31.25μg/ml、62.5μg/ml、125μg/ml、250μg/ml、500μg/ml),采用CM5芯片,分别将蛋白的单体和聚体通过氨基偶联固定于芯片表面.将样品依次进样,进行结合分析. 结果：Aβ1-40与Aβ1-42单体在25°C温度下静置24h可制备成实验用聚集体;SPR分析系统进样参数：流速30μl/min,结合时间300s,解离时间300s,再生1mMNaOH15s;实验优选阳性对照为CR. 结论：以上实验条件可用于SPR系统中抗β淀粉样蛋白聚集化合物的初步筛选,实验方法稳定,结果可信度高.