microRNA let-7b靶向IGF2BP3调控鸡成肌细胞增殖的研究

摘要

为了探讨miRNA let-7b介导IGF2BP3对鸡成肌细胞生长发育的调控作用,本研究利用let-7b过表达载体转染成肌细胞,通过双荧光素酶靶标验证、MTT、qPCR、western blotting和ELISA分析,测定了相关基因的表达情况.结果表明:(1)采用双荧光素酶报告系统和突变实验证明let-7b作用于IGF2BP3的3'UTR.(2)let-7b在成肌细胞中过表达后,细胞增殖受到一定程度的影响,与空质粒组相比,细胞数量呈现下降的趋势.(3)let-7b可使靶基因IGF2BP3的mRNA表达量下调2.33倍,差异显著(P＜0.05),对IGF2、IGF1的mRNA表达量的影响则差异不显著(P＞0.05).(4)综合分析,miRNA let-7b主要是通过靶向调控IGF2BP3的mRNA和蛋白质表达水平,并进一步影响IGF2的运输、稳定和迁移功能,从而影响鸡成肌细胞的生长发育.