Cthrc1与TGF-β1对成纤维细胞胶原蛋白生成的影响

摘要

目前认为成纤维细胞合成胶原蛋白增多是许多纤维化疾病的主要特点。在其发病机制中促纤维化和抗纤维化因子在调节胶原蛋白合成上起着关键的作用。TGF-β1途径被认为是病理性纤维化的核心途径。本实验中，通过扩增Cthrcl过表达的质粒转染正常人成纤维细胞，提高了正常细胞中Cthrcl含量，构建出pCMV6-XL4-Cthrcl组;通过化学合成小干扰RNA,瞬时转染成纤维细胞，降低正常细胞中Cthrcl含量，分别构建出Cthrcl基因升高及降低模型。相应的，通过加入细胞级TGF-β1刺激因子，提高正常细胞中TGF-β1因子含量，通过TGF-β1抑制剂抑制正常细胞中TGF-β1的表达，降低TGF-β1的含量，分别构建出TGF-β1基因升高及降低模型。在此基础上通过轻脯氨酸消化法检测胶原蛋白的合成与表达，研究发现TGF-β1因子能诱导轻脯氨酸合成和表达明显增高，而重组的过表达Cthrcl能抑制TGF-β1诱导的上述效应。初步提示Cthrcl可能作为抗纤维化潜在的治疗方法。