利用新型细胞转移力测定装置建立人前列腺癌细胞(PC-3M)体外筛药模型

摘要

目的:利用新型细胞转移力测定装置建立前列腺癌细胞PC-3M体外筛药模型.方法:取对数生长期生长良好的PC-3M细胞,用F12培养液预处理细胞两天,采用自制细胞转移力测定装置构建体外侵袭模型.首先在无聚碳酸酯聚乙烯吡咯烷酮(PVP)多孔滤膜(8um孔径)的上表面铺以50ul的Matrigel(1g/L)于37℃下作用1小时,使胶凝固,再以无血清培养液洗涤两次后备用.将备好的滤膜粘附于细胞转移力测定装置的上室底部,下室加入10％胎牛血清的F12培养液;再将粘有滤膜的上室插入下室,并确保上、下室间无气泡;最后取生长至对数期的癌细胞,用2.5g/L胰酶消化离心后以无血清的F12培养液重悬,以l05个细胞加到细胞转移力测定装置的上室中,盖上帽子,置CO2培养箱中培养约10小时;取出滤膜,用棉签拭去滤膜上表面细胞,并用0.1％的结晶紫染色数分钟,于200倍光镜下计数膜背面侵袭的细胞数,计数中间和四周共5个视野,每组计数三份样本,求出平均数,实验重复1次.结果:利用自制细胞转移力测定装置,可以成功复制体外PC-3M细胞侵袭模型.滤膜经结晶紫染色后,可以清楚看到癌细胞穿透滤膜,计数穿透细胞数为80个.结论:利用新型细胞转移力测定装置成功建立了前列腺癌细胞(PC-3M)体外侵袭筛药模型.