骨髓神经组织定向干细胞诱导分化为运动神经元

摘要

目的:研究一种合理有效的运动神经元诱导方案,为组织工程化神经的构建提供易于获取、数量丰富的种子细胞,从而为周围神经损伤的治疗提供一种有效的、更有针对性的治疗方法.rn 方法:采用两步法诱导骨髓来源神经组织定向干细胞(neural tissue-committed stem cells,NTCSCs)分化为运动神经元.第一步,采用先贴壁、后悬浮的方法,分离培养大鼠骨髓神经组织定向干细胞;第二步,采用小分子化合物如TSA、RP、Br、RG等诱导骨髓神经组织定向干细胞向运动神经元分化,并对诱导分化后的运动神经元检测神经元表面标记,如MAP2、β-Tublin Ⅲ等以及运动神经元表面标记,如ChAT及HB9等的表达情况.rn 结果:经过分离、培养，可以得到大量骨髓神经组织定向干细胞。经过诱导后，首先从形态学上可以观察到明显的神经元样改变，其次免疫荧光检测发现诱导后的细胞中p-Tublin Ⅲ, ChAT及HB9均有阳性表达;Western blot、PCR的初步结果显示β-Tublin Ⅲ,ChAT均有表达。rn 结论:本研究提供了一种可以广泛应用、取材方便、可来源于自体，并且无免疫排斥及伦理学等问题的种子细胞。诱导方案方便、快捷，经诱导细胞形态变化显著，但仍需进一步研究认证。