微阵列芯片比较基因组杂交技术在植入前遗传学诊断应用的实验研究

摘要

目的：建立并优化适用于植入前遗传学诊断的微阵列芯片比较基因组杂交技术(array CGH)。方法：对以下3种来源的细胞进行array CGH分析:1.经胰酶消化核型为46,XX的C95系胚胎干细胞株,分离后获取单个细胞;2.在本中心行IVF/ICSI的正常受精来源的废弃胚胎卵裂球;3.来自5对因罗氏易位或相互易位行PGD的10枚胚胎,其中8枚胚胎经荧光原位杂交(FISH)诊断为异常,1枚无信号,1枚诊断正常但胚胎发育停滞.对全基因组扩增后的扩增产物进行24sure V3或24sure+芯片(UK)检测,采用BlueFuse Multi软件机械数据分析.结果：1.来自C95, C79系干细胞株的单个细胞，进行array CGH分析，均显示为正常染色体;2.对来自2个正常受精来源的6个卵裂球的扩增产物进行array CGH，其中1个胚胎的2个卵裂球分别为非整倍体和正常核型，另1个胚胎的4个卵裂球中2个卵裂球为正常，另外2个卵裂球均为-22,+13。重复上述实验，其结果与前一致;3.对来自染色体易位行PGD的10枚胚胎进行全基因组扩增，4枚胚胎在array CGH分析时与FISH诊断结果相符，其中2枚FISH与array CGH结果完全一致，2枚在array CGH分析发现除FISH诊断为异常的染色体之外其他多条染色体数目异常。6枚与FISH诊断结果不符的胚胎中，4枚来源于p13; qll的异常，1枚胚胎的有较多碎片，另一枚来自罗氏易位FISH诊断为13单体，array CGH诊断为14三体及其他多条染色体非整倍体改变。结论：应用array CGH可同时完成对胚胎染色体结构及核型的检测，但在断裂点距离端粒位置较近的染色体1区的易位应选择分辨率高的24sure+芯片。