高效液相色谱—柱前衍生化法则测定饲料中的含硫氨基酸

摘要

发展了一种饲料中含硫氨基酸的检测方法.样品经过甲酸氧化,将其中的胱氨酸和蛋氨酸分别氧化为磺基丙氨酸和蛋氨酸砜;再经酸水解后,采用2,4-二硝基氟苯进行柱前衍生化,衍生物经高效液相色谱分析.使用Elite AAK C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)分离;以0.05 mol/L乙酸钠和乙腈-水(50∶50,v /v)为流动相,梯度洗脱,流速为1.2 mL/min；检测波长为360 nm；柱温为31°C.结果表明,胱氨酸在0.4～16.0 mg/L、蛋氨酸在0.7～29.6 mg/L范围内的线性相关系数分别为0.9999、0.9998;胱氨酸和蛋氨酸的定量限(信噪比(S/N) =10)分别为2.6U g/kg和3.1 μg/kg；3次样品平行测定的胱氨酸和蛋氨酸含量的相对标准偏差(RSD)分别为0.79％和2.56％,加标回收率分别为100.28％～102.00％和105.72％～107.89％.该方法分析成本低,测定结果准确,灵敏度高,符合饲料中含硫氨基酸的检测要求.