反向斑点杂交检测仔猪常见致病菌初探

摘要

为在没有基因芯片点样仪和扫描仪的诊断实验室操作低密度DNA反向杂交检测，将已建立的玻片为基质的芯片检测方法转换成膜基质反向斑点杂交。将玻片为基质的芯片所用25-30 mer探针修改加长到30-38mer,点于0.2μm孔径尼龙膜。扩增23SrRNA基因片段的2对PCR引物序列不变，下游引物改用地高辛标记，目标细菌DNA在常规PCR后与膜上探针杂交，结果初步证明探针特异性好，23S rRNA基因反向斑点杂交方法能够用于检测多种仔猪常见致病菌。