海洋细菌Bacillus pumilus PLM4抗肿瘤多糖的分离纯化及结构研究

摘要

海洋短小芽孢杆菌BacilluspumilusPLM4发酵液经离心去除菌体、减压浓缩、透析去盐、乙醇沉淀提取得粗多糖,粗多糖经SephadexG-50和SephadexG-100凝胶柱层析分离纯化可得纯化多糖.采用高效凝胶渗透色谱法测定多糖的分子量及纯度,硫酸-咔唑法测定己糖醛酸含量,2,4-二硝基苯肼比色法测定丙酮酸根含量,氯化钡明胶比色法测定硫酸根,茚三酮反应测定蛋白质含量,气相色谱法测定中性糖组分.结果表明,该多糖分子量为116,000,含56.96﹪的己糖醛酸和0.83﹪丙酮酸根,不含硫酸根,不含蛋白质,该多糖的中性糖组分有甘露糖和葡萄糖,它们的摩尔比为3.37:1.00.抗肿瘤活性的初步研究表明该纯化胞外多糖的体外抑制人喉癌Hep-2细胞生长的活性显著,GI50＜100μg/ml.经红外光谱分析、高碘酸氧化以及Smith降解可知该多糖的糖基为β-D-吡喃甘露糖和β-D-吡喃葡萄糖构型,基本结构是以1→3连接为主体,有较多的1→6连接分枝、少量的1→2连接和很少量的1→4连接.