猪瘟石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达

摘要

用RT-PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD,A1A2,B和C.分别将4个片段克隆于pMAL-P2X载体中,经PCR、双酶切和测序鉴定,E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确.将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21-CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中,共得到16株重组表达菌,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析.结果表明:E2基因的4个主要抗原结构城均可在这4种表达菌中表达,但以BL21-CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好,可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白.免疫印迹结果表明,表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别。