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血管平滑肌大电导钙激活钾通道(BK(ca))人工重建的研究

摘要

目的:血管平滑肌细胞上的大电导钙激活钾通道(large conductance calcium-activated potassium channels,BKCa)的活动直接参与了血管平滑肌的舒缩调节,在血压维持中起重要作用.在天然细胞上有关B&Ca通道的动力学特性、通道调控点、药物作用靶点等的研究存在一定的局限性,将BKCa通道蛋白重建到平面双分子层脂质膜(Panar lipid bilayers,PLBMs)上的研究可作为补充.本实验旨在摸索建立稳定的PLBMs制备方法,并摸索将克隆的血管平滑肌细胞BKCa通道蛋白融合其上进行单通道电流研究。rn 方法:通过不同PLBMs制备实验和重建到PLBMs上的BKCa的单通道实验进行研究。rn 结果:结果与转染有BKCaα亚基的人胚肾(HEK293)细胞上的BKce单通道膜片钳实验结果基本一致,但与文献报道一致,其Ca2+敏感范围有一定变化。rn 结论:(1)涂抹法可用于平面双分子层脂质膜的制备。(2)平面双分子层脂质膜技术可用于BKca通道的药理学和动力学特性的研究。(3)重建后的BKCa具有电导值大,电压依赖性,Ca2+敏感性和K+选择性。(4)目前制备的BKCa脂蛋白体含有其他蛋白。

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