GLP-1对高糖诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及机制分析

摘要

目的：以高糖刺激的乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导心肌细胞损伤,给予胰高血糖样多肽-1(GLP-1)预处理,观察其对高糖引起的心肌细胞凋亡的影响,以及细胞内硫氧还蛋白(Trx)系统的变化.rn 方法：将分离培养48h的大鼠乳鼠心肌细胞分为三组，1)正常对照组:使用含葡萄糖5.5mmol/L的DMEM培养基加入甘露醇20mmol/L作为对照培养基进行培养;2)高糖组:使用含葡萄糖25mmo1/L的DMEM培养基作为高糖培养基进行培养模拟糖尿病;3)高糖+GLP-1组:以含葡萄糖25mmo1/L的DMEM培养基加入终浓度10nmol/L的GLP-I继续培养模拟糖尿病GLP-1干预，心肌细胞分别在三种培养基中培养24h后测定指标。rn 结果：1)与正常组比较，高糖组细胞乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性均显著升高，Trx活性明显降低(p＜0.05);硫氧还蛋白表达无明显变化，但细胞内蛋白硝基化的标志物3一硝基酪氨酸生成量增加，Trx的内源性抑制蛋白硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达明显上调，活性氧(ROS)生成、丙二醛(MDA)的含量均明显升高(P均＜0.05); 2)与高糖组比较，高糖+GLP-1组乳酸脱氢酶活性、细胞凋亡率、p38激酶活性明显降低，Trx活性明显恢复(p＜0.05)，3-硝基酪氨酸生成、TXNIP表达、活性氧(ROS)生成和丙二醛的产生量均明显降低(P均＜0.05)。rn 结论：高糖可引起培养的乳鼠心肌细胞发生损伤和凋亡，这种损伤与高糖引起的Trx活性和功能下降有关;蛋白的硝基化、TXh1IP的表达上调均可抑制Trx的活性，使其抗自由基和抗凋亡功能减弱，自由基生成增加，p38激酶介导的凋亡途径加强，进而引起心肌细胞损伤和凋亡;GLP-1处理可使高糖引起的TXNIP的表达明显下调，蛋白硝基化减轻，Trx活性得到改善，细胞自由基损伤和凋亡减轻，通过对Trx系统的保护而逆转高糖引起的细胞损伤和凋亡。