游离脂肪酸诱导心肌细胞损伤的新机制探索

摘要

目的：探索游离脂肪酸是否可以诱导心肌细胞发生程序性坏死(necroptosis),及其可能的作用机制.rn 方法：本研究以体外培养的H9c2心肌细胞为靶细胞,用200μmol/L棕榈酸(Palmitic acid,PA)刺激24h以诱导心肌细胞损伤,并且在内质网应激(endoplasmic reticulum-stress,ERS)的阻断剂普伐他汀和激动剂毒胡萝卜素预处理的基础上再用PA干预24h以进行机制探讨.采用实时荧光定量RT qPCR法检测necroptosi:标志基因一受体相互作用丝氨酸苏氨酸激酶1(receptor (TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase1, RIPKl)及受体相互作用丝氨酸苏氨酸激酶3 (receptor (TNFRSF)-interacting serine-threonine kinase 3, RIPK3), ERS标志基因GRP78,CHOP的表达水平。rn 结果：200Eunol/L浓度的棕搁酸作用H9c2心肌细胞24小时后，心肌细胞necroptosis标志基因RIPK 1, RIPK3表达明显增加(P＜0.05); ERS基因GRP78, CHOP表达明显增加(P＜0.05)。使用Necrostatin-1(necroptosis特异性抑制剂)预处理2小时，再用200pmoUL棕搁酸作用心肌细胞24小时，和棕桐酸单独处理的心肌细胞比，其RIPK1、RIPK3基因表达明显降低(P＜0.05)。同样，GRP78, CHOP基因表达也明显降低(P＜0.05)。ERS阻断剂普伐他丁预处理能明显降低心肌细胞RIPKI及RIPK3 mRNA表达水平，而应用ERS激动剂毒胡萝卜素预处理能显著增加RIPK1及RIPK3 mRNA表达水平。rn 结论：棕搁酸可能引起H9c2心肌细胞发生necroptosis，同时necroptosis的发生可能与ERS信号通路相关。