以L-谷氨酰胺-锌(Ⅱ)配合物为供体酶法制备茶氨酸及其机理分析

摘要

L-茶氨酸是茶叶中的特征氨基酸和主要呈味物质,具有许多重要的生理功能.本文在甲醇溶液中合成了L-谷氨酰胺-锌(Ⅱ)配合物(Zn(GIn)2),并进行了FT-IR表征和元素分析.在此基础上,考察了以Zn(GIn)2为谷氨酰供体酶法制备L-茶氨酸的可行性.通过对反应液的质谱分析对上述体系的反应机理进行了初步分析,结果表明当有受体存在时以Zn(GIn)2为供体可有效抑制自转肽副反应.对Zn(GIn)2的稳定性和反应性分析结果显示,在pH 9.0条件下Zn(GIn)2不会解离,GGT对Zn(GIn)2和GIn的亲和力常数分别为Km,Zn-GIn=0.53mmol/L和Km,GIn=1.01 mmol/L.同时,本文还分别以Zn(GIn)2和GIn为供体,考察了供受体比对反应的影响.结果表明,以Zn(GIn)2替代GIn可有效提高产物的率和供体转化率,当Zn(GIn)2 6.0 mmol/L,乙胺200mmol/L条件下,茶氨酸浓度最高可达7.38 mmol/L(供体转化率为63.79％).