猪Hokovirus环介导等温扩增检测方法的建立及应用

摘要

本研究采用环介导等温扩增(LAMP)技术，建立检测猪Hokovirus(pHoV)病毒的一种新型、快速、简便、实用、灵敏的检测方法。选取PHoV VP1/2基因特异性保守片段设计LAMP引物，利用具有链置换活性的Bst DNA聚合酶在恒温条件下催化新链合成，从而实验靶序列的高效、特异性扩增。对所建立的LAMP检测方法的敏感性研究显示LAMP对PHoV的最低检出量为10拷贝/反应，比普通PCR方法敏感10倍;且特异性、重复性较好。反应结束后通过加入SYBR GreenⅠ染料能够快速、简便地判定结果，并且不需要特殊的仪器设备，操作简便，非常适用于现场快速检测和疾病诊断。