鸡Robo2基因不同组织中的mRNA表达特性分析

摘要

选取饲养条件环境条件一致的240日龄海兰褐蛋鸡10只，快速采集其心、肝、脾、肺、肾、脑、卵巢、输卵管组织，并迅速置于液氮中冷冻保存，同时提取总RNA，反转录合成cDNA。根据NCBI GenBank中已收录的鸡Robot基因序列，用Primer 5.0引物设计软编剧件设计所需的特异性引物:上游引物为5'-TAGACCTCCACCCAT-CATCC-3'，下游引物为5'-CAGTATCAGACAGCCGCAGA-3'，以GAPDH基因为内参，采用半定量RT-PCR检测Robo2基因在海兰褐各组织中mRNA表达水平。PCR结果显示，扩增获得的Robot基因片段长度为209bp, GAPDH基因扩增片段长度为141 by。半定量结果表明:在240日龄海兰褐蛋鸡的心、肝、脾、肺、肾、脑、卵巢、输卵管组织中均有表达，其中，在脑、脾组织中Robot基因的mRNA表达水平较高，其表达量依次为2.2674、1.4676;其次为肺和卵巢，表达量分别为0.9163和0.7214;而在肾、肝、输卵管、心组织的mRNA表达水平相对较低，表达水平从高到低依次为0.5132、0.4627、0.3714和0.3192。此结果表明，鸡Robot基因mRNA在体内组织分布较广、表达水平存在一定差异。Robo与其配体Slit分子作为Slit/Rob。信号通路的主要成员除了对神经细胞迁移发挥作用外，对非神经细胞的细胞迁移也具有重要的调控作用.