高效羰基荧光衍生试剂筛选及在HPLC中的应用

摘要

羰基化合物广泛存在于生物体内,主要包括脂肪醛、糖类等.其中,脂肪醛主要由脂质过氧化作用(LPO)产生,除了LPO,内源性的醛类化合物也可以通过美拉德反应、氨氧化酶或代谢活化作用产生,其对生物系统造成的损伤会扰乱蛋白质和酶的作用,造成有害DNA加合物的产生,因此醛类被视为监测LPO过程的关键指标.此外,醛有刺激性,对生物体有致癌作用,如甲醛致癌,可造成哮喘;乙醛在酒精存在下可与核苷氨基反应生成混缩醛,从而增加女性患乳腺癌的风险;丙醛、丁醛、戊醛、己醛、壬醛被证实对老鼠和人类肝细胞有细胞毒性作用.所以发展一种灵敏、有选择性的方法用于分离检测醛类化合物是十分必要的.由于醛类化合物缺少生色团，且在质谱检测中电离效率不理想，所以在复杂基质中检测醛有一定困难。目前，醛类化合物检测的主要方法之一是对羰基化学衍生后进行高效液相色谱（HPLC）分离检测。2,4-二硝基苯肼（2,4-DNPH）与羰基的衍生活性很高，是目前最为常用的醛类衍生试剂，但该衍生试剂是紫外衍生试剂，灵敏度不高。为了改善醛类物质的检测灵敏度，开发具有高衍生活性的荧光衍生试剂，采用灵敏度更高的HPLC-荧光检测是一个理想选择。