氯化铝暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼的神经发育毒性研究

摘要

目的：采用斑马鱼胚胎一般毒性试验、胚胎和幼鱼病理学试验和幼鱼行为学试验探讨氯化铝溶液对斑马鱼胚胎和早期幼鱼神经发育的影响. 方法：将受精后6h的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度梯度(50、100、200、400、800μg/L)的氯化铝溶液中,观察受精后12h(12hpf)、24h(24hpf)、48h(48hpf)、72h(72hpf)斑马鱼胚胎孵化率和死亡率的情况;选择100μg/L氯化铝浓度组,用吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)双染色法观察胚胎和幼鱼的细胞凋亡情况,研究氯化铝暴露对神经发育的器质性改变;比较暴露组和对照组幼鱼的神经行为学改变,包括3dpf幼鱼触动逃避反应、7dpf幼鱼自发运动以及惊恐逃避反射等,研究氯化铝暴露所致的神经发育功能性障碍. 结果：对36hpf整体胚胎和幼鱼进行AO-EB染色后发现,与对照组相比,暴露组可破坏胚胎膜完整性,幼鱼的凋亡细胞主要集中在中、后脑.暴露组幼鱼的触动逃避次数比对照组减少(P<0.05),对触动刺激的反应敏感性降低.7dpf幼鱼的自发运动中,暴露组幼鱼出现僵直不动、震颤、自发触壁游动方式降低.7dpf幼鱼强光刺激的惊恐逃避反射试验结果中,虽然暴露组和对照组在光照2min内运动速度较之前黑暗期均增快,但是对照组的速度增加更快;关闭光源后,暴露组和对照组的运动速度都会下降,但是暴露组下降更快,暴露组和对照组的速度差异具有统计学意义. 结论：氯化铝暴露对斑马鱼胚胎和幼鱼具有明显的神经发育毒性作用.