枇杷果实发育成熟期均一化全长cDNA文库构建及糖代谢与乙烯应答相关基因表达谱分析

摘要

通过SMARTTM与DSN处理技术相结合,构建了枇杷果实发育与成熟期基因丰富的均一化全长cDNA文库,插入片段主要分布在0.5～3.0kb,平均长度约为1.1kb.在8972个有效测序结果中拼接得到了7451个unigenes,包含2896个全长cDNA序列和5241个未知功能的unigenes.对2896个全长cDNA基因通过NCBI-nr蛋白数据库同源比对分析发现,有2210个全长序列(占76.3％)有匹配源,功能主要涉及细胞信号转导、糖代谢、蛋白转运、细胞衰老、蛋白质代谢、基因转录调节、生殖发育及胁迫反应等生物学过程.通过GO网站对主要unigenes从分子功能、细胞组分和生物学过程3个角度进行了功能归类与注释.应用Real-time PCR技术对枇杷果实糖代谢和乙烯应答相关基因进行了转录表达谱分析,结果表明:蔗糖磷酸合酶SPS-Ⅰ、-2和蔗糖合酶合成方向SS-S基因转录水平都逐渐上调,蔗糖分解方向SS-C基因在果实成熟期间转录水平不断下调,共同协调促进了枇杷果实成熟期糖积累品质的形成;3个乙烯受体EjETRs同源基因和乙烯应答转录因子EjETF基因转录水平在果实发育成熟期间皆表现出波动下降趋势,表明乙烯及非依赖于乙烯的因子共同调控着枇杷果实发育与成熟过程.本研究构建的全长cDNA文库为进一步研究枇杷果实发育与成熟分子机理提供了丰富的基因资源,也为今后利用分子手段调控枇杷果实发育成熟期和改善果实品质形成奠定了基础.