条石鲷促性腺激素α亚基的克隆与表达特性分析

摘要

采用同源性克隆和cDNA末端快速扩增(RACE)方法,从条石鲷垂体中获得了全长为897bp的GtHα cDNA序列,该基因编码由132个氨基酸组成的前体蛋白,其中前38个氨基酸为信号肽.肽链中包括10个保守Cys残基和2个N-糖基化位点,在第122和124Cys中间间隔了一个组氨酸,形成CXC型趋化因子的特征结构.氨基酸同源性和进化分析表明,条石鲷GtHα与鲈形目鱼类的进化关系较近.实时荧光定量PCR检测发现，GtHa mRNA在垂体、脑、性腺中的表达量较高，在心、肝脏、胃、肠、肌肉、幽门自囊微量表达，在脾脏、头肾、鳃、肾脏中不表达，其中在垂体中的表达量最高;周期表达表明:垂体中GtHa mRNA在卵巢发育的V期达到最大值，卵巢中GtHa mRNA在卵巢发育的IV期达到最大值，而脑组织中GtHa mRNA在卵巢发育的V期达到最低值，表明GtHa对卵母细胞发育的调控可能同时通过自分泌和旁分泌两种途径进行。本论文为条石明生殖调控机制及人工繁育技术研究提供了基础资料。