辅酶Ⅱ酶法再生体系与草生欧文氏菌休止细胞偶联合成2-酮基-L-古龙酸的研究

摘要

该文根据细菌合成2-酮基古龙酸（2-KLG）的2.5-二酮基葡萄糖酸（2.5-DKG）途径，探讨了辅醇Ⅱ酶法再生体系与草生欧文氏菌休止细胞偶联合成2-KLG的方法。采用溶菌醇-超声波破壁、硫酸铵沉淀、超离心、超滤、色谱等技术从棒杆菌细胞中分离纯化了2.5-DKG还原酶，醇活0.027IU/mL比活0.0195U/mg蛋白。将提纯的2.5-DKG还原酶与葡萄糖脱氢酶偶联构成了Coll酶法再生体系，并进一步与草生欧文氏曹游离细胞和固定化细胞偶联，合成丁2-KLG，最高浓度2.77mg/ml，辅酶Ⅱ再生次数达238次。