牛胚胎在MEF细胞饲养层的生长行为

摘要

观察比较了牛胚胎与小鼠胚胎在体外培养过程中的生长行为.结果表明,牛滋养层细胞与ICM连接不紧密,其迅速增殖,形成半透明膜囊腔结构;小鼠胚胎滋养层与ICM密切相连,形成盘状结构,并推移PMEF饲养层细胞.牛ICM形态呈现多样性,表现为团状、条状、网状和混合型;小鼠ICM形态单一,多呈圆盘状.用倒置显微镜观察,牛ICM呈深黑色,小鼠ICM呈淡黄色.体外培养的牛胚胎发育速度比小鼠胚胎迟缓,牛ICM初次传代时间为胚胎体外培养开始后5-6 d,小鼠ICM初次传代时间为胚胎体外培养后3-4 d.牛ICM分化程度由小到大依次为团状ICM、条状ICM、混合型ICM和网状ICM.牛和小鼠胚胎附着率及ICM克隆率由大到小均依次为孵化胚、囊胚和桑椹胚,但桑椹胚和囊胚附着率和ICM克隆率均无显著差异(P＞0.05).与全胚相比较,牛和小鼠裸胚(无透明带或透明带不完整的胚胎)贴壁时间提前,但ICM形成率和以后ICM的生长行为均无显著差异;小鼠和牛桑椹胚卵裂球(中、晚期)体外分化抑制培养,形成亚囊胚而不能获得ES细胞;剥离牛胚胎滋胚层,ICM细胞更易分化.