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'一步法'实时荧光PCR检测YMDD变异方法的建立及应用

摘要

本文在"一步法"实时荧光PCR定量检测的基础上.在550M变异区设计包含YIDD和YVDD变异的特异性下游引物,采用同一上游引物和探针,建立无变异区段引物作为参照,分3管进行检测,通过其Ct值的差异判断YIDD和YVDD变异的情况.为提高检测的准确性,本文采用自行研制的微量核酸释放剂,建立了"一步法"快速荧光PCR检测YMDD变异技术.由于血清标本直接加到PCR扩增管,因此本方法操作简单具有良好的重复性能,适合在各阶层医疗单位应用.

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