超声靶向微泡破坏介导PHD2-shRNA转染治疗大鼠心肌梗塞的实验研究

摘要

目的:探讨超声靶向微泡破坏(UTMD)介导PHD2-shRNA转染大鼠急性心肌梗塞(MI)的治疗效果.rn 方法:左冠状动脉结扎法建立大鼠急性MI动物模型,随机分为:假手术组(sham组,n=30);MI对照组(shScramble组,n=60):注射shScramble对照质粒;治疗组(shPHD2组,n=60):注射PHD2-shRNA干扰质粒.分别于术前、术后第1d、7d、14d、28d行超声心动图检查;处死动物,对组织样本行Masson's trichome及H&E染色后行组织学检查;RT-PCR检测PHD2、HIF1a、VEGF、TGF β、bFGF在各组标本中mRNA表达情况;采用免疫组化SABC法检测心肌梗死区域PHD2和HIFa及CD34的表达.rn 结果:①shPHD2组较shScramble组心功能明显改善;与shScramble组比较,shPHD2组第7d、14d及28d所测LVEF、LVFS值均增加,差异均有统计学意义(P＜0.05).②与shScramble组比较,shPHD2组治疗后CVF和PVCA均显著减少,差异有统计学意义(P＜0.05).③RT-PCR检测shPHD2组与对照组比较表达减低,而HIF-1α mRNA及其下游促血管生成因子VEGF、TGFβ、bFGF mRNA表达增加,于第14d时达高峰,差异均有统计学意义(P＜0.05).④免疫组织化学结果显示,shPHD2组内HIF-1α、VEGF均较shSchamble组表达增加,于第14d达峰值,差异均有统计学意义.与shSchamble组比较,shPHD2组内可见更多新生血管形成,二组间比较,差异有统计学意义.rn 结论:UTMD可促进PHD2-shRNA转染至大鼠心肌组织;靶向PHD2基因的shRNA干扰质粒可有效促血管生成因子表达;UTMD联合CLM介导PHD2-shRNA转染可促进缺血心肌内新生血管形成,有效改善大鼠心功能.