海湾扇贝(Argopecten irradians)亲环素A(Cyclophilin A)基因的cDNA克隆及其表达特征研究

摘要

亲环素A(cyclophilin A，CyPA)是亲环素家族重要成员，是重要的免疫抑制药物环孢素A(CsA)的体内结合蛋白。亲环素(CyP)广泛存在于生物界且高度保守，具有肽基脯氨酰顺反异构酶活性，CyP在蛋白质的折叠、装配与运输中发挥作用，也在免疫调节中发挥重要作用。本研究通过EST技术，从海湾扇贝中克隆得到一种CyPA基因的全长cDNA。BLASTx分析的结果显示它和其他动物CyPA基因相似性较高。海湾扇贝CyPA基因由1018个核苷酸组成，开放阅读框为605个核苷酸，编码一条205个氨基酸的多肽。本研究使用实时定量RT-PCR技术，对海湾扇贝CyPA基因的不同组织分布和两种细菌刺激后mRNA表达情况进行了研究，结果表明海湾扇贝CyPA基因在被检测的组织中都有表达，其中，在血淋巴，肝胰腺和外套膜中的表达量相对较高。在受到鳗弧菌和溶壁微球菌刺激后，海湾扇贝CyPA基因表达量都呈上升趋势，在达到走高点后逐渐恢复到正常水平。实验结果表明，海湾扇贝CyPA基因是一种诱导性表达的蛋白，并且在扇贝抵御外界微生物入侵的免疫防御过程中发挥了作用。