环磷酰胺与顺铂联合化疗的依时特征

摘要

目的:探索肿瘤联合化疗副作用最小的时间,以确定最佳给药模式。方法:小鼠按昼夜六个不同时间点给予环磷酰胺与顺铂联合化疗,用Western blot方法测定小鼠骨髓细胞凋亡相关蛋白p53蛋白表达的昼夜节律;单细胞凝胶电泳技术考察外周血淋巴细胞DNA损伤;流氏细胞术考察骨髓细胞周期昼夜节律;以及外周血白细胞计数。结果:正常小鼠骨髓细胞多数处于G1期,S期次之,G2/M期最少,联合化疗后骨髓细胞G1和S期比例减少、G2/M期比例增加。正常小鼠骨髓细胞G1期分布高峰在18:00-02:00h,低谷在06:00-10:00h。S期分布的高峰在06:00-10:00h其余时间DNA合成偏低。G2/M期分布高峰在06:00h,低谷在18:00h。联合化疗后,骨髓细胞G1期分布高峰在18:00h,低谷在02:00h。对G1期在02:00h的影响最大,06:00h的影响最小。联合化疗后S期高峰在02:00h,谷值在18:00h。在10:00h S期减少38﹪。02:00h出现翻转,使S期增加28﹪,联合化疗使细胞进入G2/M期增多,其昼夜节律分布的高峰在22:00h,低谷在06:00h。联合化疗在18:00h的影响最大,增加达到679.7﹪,正常小鼠骨髓细胞p53蛋白表达在18:00h最强,22:00h最弱。联合化疗后P53蛋白在22:00h表达最强,18:00h表达最弱。22:00h联合化疗使其表达增加86﹪。18:00h表达下降44﹪。正常小鼠白细胞数的峰值在06:00-14:00h,谷值在18:00-02:00h。联合化疗后,18:00h抑制率最小;10:00和14:00h抑制率最大。联合化疗使凝胶电泳中淋巴细胞在10:00h给药时损伤增大。18:00h给药损伤最小。结论:环磷酰胺不同时间用药与顺铂联合化疗在18:00h对小鼠骨髓细胞的抑制作用小。