ERK1/2信号通路在Jurkat T细胞增殖调控中的作用

摘要

探讨ERK1/2信号通路在Jurkat T细胞增殖调控中的作用。采用共聚焦显微镜和MTT法检测不同浓度PD98059对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响，PI染色结合流式细胞术分析不同浓度PD98059对Jurkat T细胞细胞周期的影响。rn 利用不同浓度、不同信号通路特异性阻断剂LY294002、AG490、GF109203X和Genistein以及LY294002联合AG490处理Jurkat T细胞，观察它们对Jurkat T细胞集落形成和增殖指数的影响。选用最佳浓度PD98059、LY294002、AG490、GF109203X和Genistein，通过Western Blot检测它们对Jurkat T细胞中ERK1/2、P-ERK1/2和反向CCAAT盒结合蛋白(ICBP90)不同时间表达的影响。rn 结果显示，PD98059可显著抑制Jurkat T细胞的增殖，呈剂量依赖关系。PD98059可使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期，并阻止其进入S期和G2/M期。不同浓度各阻断剂对Jurkat T细胞的集落形成和增殖指数也具有不同的抑制作用，且呈剂量依赖关系。PD98059作用3 h可部分下调ERK1/2的表达，而其它阻断剂对ERK1/2的表达均无影响。PD98059、LY294002作用3 h可明显下调P-ERK1/2的表达，LY294002+AG490、AG490、GF109203X和Genistein也可使P-ERK1/2的表达不同程度下调，各阻断剂作用3 h均能上调Jurkat T细胞中ICBP90蛋白的表达，并以PD98059最为突出；而在24 h这种上调作用更为明显。这些结果提示阻断ERK1/2信号通路可显著抑制Jurkat T细胞的增殖，这种抑制作用与其使Jurkat T细胞停滞于G1/G0期，阻止细胞进入S期和G2/M期有关；PI-3K、TPK、PKC和JAK信号通路可能与ERK1/2信号通路上游关联，ERK1/2信号通路的下游可能通过ICBP90所介导。