日本落叶松体胚发生相关基因分析

摘要

通过抑制性扣除杂交法(SSH)建立了日本落叶松体细胞胚胎发生特异表达的相关基因扣除文库，Drivei为在2,4-D 0.1 mg·L-1保持与增殖培养基上保持的日永69胚性愈伤组织(日永69细胞系)，Tester为在PEG4000100 g.L-1、ABA 15 mg.L。体胚成熟培养基上诱导30d的日永69胚性愈伤组织(日永69细胞系)，从文库中克隆的32个cDNA片段有28个获得了GenBank注册号，为DN927721至DN927748。试验获得的28个cDNA片段序列经过与NCBI的GenBank(nr database)已知基因同源比较，其中与已报道的体细胞胚胎发生相关基冈匹配的有：(1)热激蛋白基因，NO.010，NO.43；(2)细胞壁蛋白基因，NO.8,NO.Z47；(3)氧化酶基因，NO.013，NO.Z71；共6个cDNA片段在GenBank(nr database)找到了匹配。28个cDNA片段序列经过与NCBI的EST(EST others database)同源比较，其中有20个cDNA片段序列与已注册的火炬松体胚发生相关基因的EST具有高度同源性，占全部克隆的71.4％。可见，这28个cDNA片段具有了日本落叶松体胚发生相关基因的特性。