抗人重组γ干扰素单克隆抗体的制备、纯化及特异性鉴定

摘要

目的：获得能稳定分泌高亲和力抗体的抗人重组γ干扰素(rHuIFN-γ)的杂交瘤细胞。rn 方法：应用常规杂交瘤细胞融合技术，制备了13株能稳定分泌抗人重组γ干扰素单克隆抗体杂交瘤细胞株；用间接竞争ELISA法检测腹水的效价。rn 结果：选出3株稳定分泌的细胞株分别为：1H7，3B7，4D8.用小鼠免疫球蛋白亚类测定试剂盒经酶联免疫测定证明1H7，3B7，4D8均为IG1类。用间接ELISA法测定小鼠腹水抗体效价均大于1：512000。免疫印迹验证3种“单抗”均能特异性识别重组人γ干扰素，与重组人α、β及大肠杆菌菌体蛋白无交叉。rn 结论：用2种“单抗”1H7，3B7建立ELISA夹心法检测γ干扰素，最低可检测100pg/ml，该两株细胞株可满足建立免疫学检测方法的需要及开发应用的要求。