VASP对内皮细胞ECV304迁移的调节作用的研究

摘要

目的：内皮细胞的迁移在血管新生、伤口愈合、内皮损伤的修复等过程中起着重要的作用。肌动蛋白的重排在细胞移动过程中起着重要作用。血管扩张刺激磷蛋（vasodilator-stimulated phosphoprotein，VASP）能调节细胞移动过程中的肌动蛋白的重排。我们通过RNA干扰抑制内皮细胞ECV304中肌动蛋白相关蛋白VASP的表达水平，研究VASP在内皮细胞ECV304迁移过程中的作用。rn 方法：化学合成针对VASP的特异性siRNA片段（VASP-942、VASP-1002、VASP-1024）和阴性对照siRNA，通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测mRNA和蛋白表达水平，细胞损伤修复实验检测转染细胞的迁移能力。rn （1) 通过半定量RT-PCR和Western blotting分别检测VASP的mRNA和蛋白表达水平，筛选出针对VASP的最有效的siRNA 片段；rn （2）以筛选出的最有效的VASP-siRNA转染ECV304细胞，设立阴性对照和空白对照，检测细胞中VASP的mRNA表达水平和蛋白表达水平以及细胞的迁移能力。rn 结果： VASP-siRNA 转染ECV304 后，与对照组相比，被转染细胞中VASP的 mRNA和蛋白表达水平明显下降（P<0.05），细胞的迁移能力明显增强（P<0.05）。rn 结论：成功设计并筛选出针对VASP的特异性siRNA片段；（2）VASP对内皮细胞 ECV304的迁移能力有着重要的调节作用，内皮细胞ECV304中VASP表达水平的下降可促进内皮细胞的迁移。