电穿孔对海藻糖载入人红细胞的作用

摘要

海藻糖是一种有效的冻干保护剂，但其为非渗透性的二糖，无法自由进入细胞内部，起到很好的保护作用。一直以来人们采用多种办法使其载入细胞内部，但是效果一直不佳。电穿孔作为一种很好的物理方法，可以将不可渗透性的外源分子载入细胞内部且不伤害细胞，它在转基因、遗传方面有着广泛的应用。我们采用此方法将海藻糖载入红细胞内部，通过正交实验，分析出细胞外海藻糖浓度、电脉冲的频率、电压、脉宽等因素对海藻糖载入效果的影响程度。并且找到了最佳的电脉冲条件：细胞外海藻糖浓度为800mM、电压为300v，脉宽1ms、频率为4次／min。此条件下，细胞内的海藻糖浓度可以达到63．68mM。