利用CISH技术检测乳腺癌HER2基因方法的改进及体会

摘要

目的：应用CISH检测乳腺癌组织HER2基因扩增情况，并对操作方法进行改进和优化。rn 方法：应用CISH技术，组织芯片检测80例已知HER2基因扩增的乳腺癌组织标本，高温修复加酶消化与仅用酶消化预处理方法的比较，分析二者的相关性；优化操作方法，总结CISH操作经验，及个别特殊标本制定个体化操作流程.结果：80例(TMA)IHC和CISH证实为HER2基因阳性病例，同时用高温修复加酶消化和仅用酶消化检测。rn 结果：除9例外，71例二种前处理方法均获得了HER2基因扩增信号，二者的符合率为100％(71／71),其中用高温修复加酶消化的低拷贝病例为25例，高拷贝病例为46例；仅用酶消化获得的低拷贝病例为31例，高拷贝病例为删，两者明显相关(P＜0.01).酶消化时间的比较结果显示，30min最佳，核能清楚显示，扩增检测率与高温热修复加酶消化基本一致，15min阳性检测率明显低于高温热修复加酶消化前处理，经60min消化后24例样本核消失，无扩增信号。操作过程中应严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间和苏木精衬染时间等。rn 结论：GISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果—致，可作为乳腺癌HER2基因检测的—项新技术，但在具体操作时，应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间、苏木精衬染时间等因素。对极少部分病例标本应采用个体化的操作流程。