农杆菌介导南瓜遗传转化体系的建立

摘要

本试验以"金辉一号"南瓜为试材，利用根癌农杆菌介导转化南瓜子叶节，研究了预培养时间、侵染时间、乙酰丁香酮(AS)浓度、共培养时间等因素，以及抗生素羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)和筛选剂卡那霉素(Kan)对离体不定芽的影响，建立最佳遗传转化体系。结果表明：外植体预培养0天，侵染时间30min，AS浓度100mg/L，共培养时间5天时获得最高遗传转化效率;最适除菌剂为Cef.最适浓度为500 mg/L，最适Kan筛选浓度为100 mg/L;在MS培养基上培养抗性芽生根，经PCR、Southern-blot检测，证明为转基因植株。