内皮素B型受体在不同毛色绵羊皮肤中的表达

摘要

(目的)研究绵羊皮肤中内皮素受体B(endothelin recepter B，EDNRB)的表达与定位，并在不同毛色中进行差异比较，探讨其在绵羊毛色形成中的作用。(方法)以不同毛色的成年绵羊为研究对象(设黑色毛和白色毛两组)，用RT-PCR法检测EDNRB基因在绵羊皮肤的表达，并使用实时荧光定量PCR技术分析不同毛色绵羊皮肤EDNRB基因的相对表达量;采用免疫组织化学法和West blot法对EDNRB蛋白在绵羊皮肤中的表达进行定位和半定量分析。(结果)PCR扩增显示EDNRB在绵羊皮肤中确有表达，且其序列片段同源性较高;荧光定量PCR结果显示黑色绵羊中EDNRB基因的相对表达量是白色绵羊的1.8248倍;West blot结果显示，绵羊皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约40KD与兔抗EDNRB多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带，且黑毛组平均蛋白表达量显著高于白毛组(P<0.05);免疫组化实验结果显示，EDNRB在绵羊皮肤毛乳头、毛根鞘及表皮细胞中均有表达，且除了毛根鞘细胞外，其他部位细胞中的EDNRB表达均为黑毛组显著高于白毛组(P＜0.05);(结论)实验结果提示，EDNRB在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位存在差异，表明其参与绵羊毛色的形成，为EDNRB调节绵羊毛色形成机制的研究提供理论基础。