胃癌APC基因第十一外显子突变基因检测方法

摘要

目的:建立一种检测基因突变的方法，研究将有助于临床准确诊断胃癌。rn 方法:采用PCR扩增胃癌及癌旁正常组织中APC基因易发生杂合缺失的第十一外显子的部分碱基序列，扩增样品分别经96℃变性和Rsa Ⅰ酶切处理，以CE-SSCP，CE-RFLP，PAGE-SSCP对其杂合缺失情况进行检测。PAGE凝胶浓度为15％;CE筛分介质PEO浓度3.0％，pH8.2，电压15 kV，温度15℃，λex=488 nm，λem=520 nm荧光检测。rn 结果:在胃癌组织APC基因缺失检测方面，该法的检出率分别为28.6％(10/35)和22.9％(8/35)，CE-SSCP的检出率明显高于CE-RFLP。rn 结论:CE-SSCP可作为大规模胃癌早期诊断简便可靠的方法。