催产素诱导去分化脂肪细胞向心肌细胞方向分化

摘要

目的:检验催产素能否将去分化脂肪(DFAT)细胞诱导分化成为心肌样细胞.方法:从脂肪中分离成熟的脂肪细胞,通过天花板培养使成熟脂肪细胞去分化为DFAT细胞.按照不同诱导的时间(1周、2周、3周)及低中高3个不同浓度的(1×10-8mol/L、1×10-7mol/L、1×10-6mol/L)分组对DFAT进行诱导培养.通过免疫荧光检测法、RT-PCR及Western blot分别在基因水平和蛋白水平上检测心肌特异性标记的表达,以人类心肌组织作为阳性对照,未加诱导的DFAT细胞作为阴性对照.结果:高浓度的催产素(1×10-6mol/L)造成实验细胞大量死亡,无法进行后续试验.以1×l0-8mol/L及1×10-7mol/L浓度的催产素诱导3周后,DFAT细胞在基因及蛋白水平上检测到心脏特异性标记GATA4、Nkx2.5及cTnT的表达,但未发现自主搏动现象.结论:生理浓度和中等浓度的催产素,可以将DFAT细胞诱导成为心肌样细胞.