Nogo-A

摘要： 背景:NogoA和PirB是髓鞘相关抑制因子及受体,在多种中枢神经系统损伤模型中表达明显增高,且起着抑制轴突再生和阻碍神经功能恢复的作用,脑出血遗留严重持久的神经功能障碍可能与二者有关.目的:通过构建大鼠脑出血模型,探讨PirB和NogoA蛋白表达与神经功能缺损的关系.方法:健康雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组(n=25)和脑出血组(n=50),按取材时间点不同分为12 h及1,3,7,14 d组,假手术组大鼠不做任何处理,脑出血组大鼠以自体鼠尾不凝血经改良二次注入法建立脑出血模型.各时间点大鼠进行神经功能缺损评分后深度麻醉断头取脑,采用Western blot检测PirB和NogoA蛋白的定量表达,免疫荧光观察PirB定位表达.结果 与结论:①PirB可表达于成年健康大鼠的神经元及星形胶质细胞的胞体和突起;②脑出血组各时间点PirB和NogoA表达较假手术组明显增加,差异有显著性意义(P<0.05),在脑出血后第3天达到高峰,持续至14 d表达仍较高;③脑出血组PirB和NogoA的表达与神经功能评分呈负相关关系;④结果表明,PirB和NogoA均可表达于健康成年大鼠脑组织中,脑出血后PirB和NogoA表达明显上调并抑制轴突再生,从而阻碍神经功能的恢复.

摘要： 目的 分析急性脑出血患者血清轴突生长抑制因子A(neurite outgrowth inhibitor-A,Nogo-A)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)、细胞纤维连接蛋白(cellular fibronectin,cFN)表达与其血管狭窄程度、脑血肿量及预后质量的关系.方法 将江苏省海安市人民医院2018年6月—2020年1月间收治的80例急性脑出血患者作为观察组,行健康体检的80例受试者作为对照组;检测受试者血清中Nogo-A、CGRP、cFN表达水平;脑出血组患者使用CTA扫描检测,评估患者血管狭窄程度、出血量;出院后6个月使用Glasgow结局分级(glasgow outcome scale,GOS)评分量表对患者的预后质量进行评估.结果 观察组患者血中Nogo-A、cFN水平明显高于对照组,CGRP水平明显低于对照组,且差异存在统计学意义(P<0.05);血管狭窄程度不同组、血量不同组患者血中Nogo-A、CGRP、cFN表达水平存在明显差异,且差异存在统计学意义(P<0.05),重度患者Nogo-A、cFN表达水平最高,CGRP水平最低,大量出血组患者Nogo-A、cFN表达水平最高,CGRP水平最低;预后良好组患者血中Nogo-A、cFN水平明显低于预后不良,CGRP水平明显高于预后不良,且差异存在统计学意义(P<0.05);Nogo-A及cFN与患者血管狭窄程度、脑血肿量及预后质量呈明显正相关关系,CGRP与血管狭窄程度、脑血肿量及预后质量呈明显负相关关系,且差异存在统计学意义(P<0.05).结论 急性脑出血患者血管狭窄程度、脑血肿量及预后质量与Nogo-A及cFN呈明显正相关关系,与CGRP呈明显负相关关系.

摘要： 目的 旨在研究高压氧联合电针治疗对脊髓损伤大鼠髓鞘抑制相关蛋白(Nogo-A及NgR受体)的影响.方法 将84只雌性SD大鼠按照数字表法分为4组,每组21只,依次为模型组、高压氧治疗组、电针治疗组和联合治疗(电针联合高压氧)组.建模成功后,模型组不进行干预,其余各组进行相应的治疗.分别在损伤后3、7、14 d进行取材,对损伤大鼠进行BBB评分、HE染色及相关基因检测.结果 损伤后3、7、14 d,高压氧治疗组、电针治疗组和联合治疗组的BBB评分均高于模型组(P＜0.01),且联合治疗组评分均高于高压氧治疗组和电针治疗组,高压氧治疗组与电针治疗组比较差异无统计学意义.损伤后3、7、14 d高压氧治疗组、电针治疗组和联合治疗组Nogo-A mRNA表达量均低于模型组(P＜0.05);损伤后7、14 d高压氧治疗组NgR mRNA表达量(0.49 ±0.53、0.52 ±0.47)、电针治疗组NgRmRNA表达量(0.53 ±0.58、0.58±0.36)和联合治疗组NgR mRNA表达量(0.16 ±0.13、0.20 ±0.13)均低于模型组NgR mRNA表达量(1.33 ±1.26、1.03 ±0.30) (P ＜0.05),且联合治疗组Nogo-A及NgRmRNA表达量低于高压氧治疗组和电针治疗组(P＜0.05),而高压氧治疗组和电针治疗组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高压氧联合电针治疗脊髓损伤大鼠与单一疗法相比更能抑制Nogo-A及NgR mRNA的表达,减轻细胞损伤,促进脊髓纤维束的生长和运动功能的恢复.

摘要： 目的 探讨Nogo-A启动子的地塞米松结合区域以及相关的转录因子.方法 构建不同长度的Nogo-A启动子并插入pGL3基本载体中,然后将其转染到SGC-7901细胞中.采用不同剂量的地塞米松处理转染细胞.通过荧光分析探讨Nogo-A启动子的地塞米松结合区域.利用生物信息学方法对此段序列转录因子结合位点进行分析.结果 Nogo-A启动子的地塞米松结合区域在-1 218～-833碱基对(bp)区间.目标区域有90种可能的转录因子.Nogo-A启动子区域无CpG岛存在.结论 地塞米松可能通过转录因子c-Jun与Nogo-A启动子上游-1218～-833 bp区域结合来调控Nogo-A.

摘要： 目的探讨FK506对大鼠施万细胞株GFAP、NF200及Nogo-A蛋白表达的影响。方法依据实验需要大鼠RSC96施万细胞株分为:A组(空白对照组);B组(FK506诱导剂组);C组(DMSO溶剂对照组)。诱导1 d和14 d后用RT-PCR和免疫组织化学方法检测RSC96细胞株GFAP、NF200及Nogo-A的mRNA和蛋白的表达情况。结果在FK506处理14 d后,RSC96细胞GFAP、NF200的mRNA表达水平显著高于两对照组明显升高(P<0.01),而Nogo-A基因mRNA表达明显低于两对照组(P<0.01)。免疫组化检测显示,RSC96细胞株应用FK506处理14 d后,GFAP、NF200的阳性细胞数量明显多于两对照组(P<0.05),Nogo-A蛋白的阳性细胞数量,在诱导1 d时明显多于两对照组(P<0.05);而诱导14 d后,Nogo-A蛋白阳性细胞数量明显低于试剂对照组(P<0.05)。结论FK506可能具有促进GFAP和NF200表达的作用,同时可能具有抑制Nogo-A表达的作用。FK506可能具有促进大鼠施万细胞增殖分化的作用,从而加速周围神经损伤的修复与再生。

摘要： 目的:观察成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA、NgR、RhoA蛋白表达的影响.方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PAS组,每组又分为7d、14d、28d三个亚组(n=10).模型组和PAS组大鼠采用Longa线栓法制作MCAO模型,假手术组除不插入线栓外,其余操作与模型组和PAS组相同.PAS组于术后第1d开始给予0.05Hz、共90对脉冲的PAS治疗,每日1次,每次持续30min;模型组和假手术组不予任何干预措施,各时间点治疗结束后取缺血半暗带区脑组织,Western Blot和免疫荧光检测缺血半暗带NogoA、NgR、RhoA蛋白的表达和分布情况.结果:术后第7、14、28d,假手术组NogoA、NgR、RhoA蛋白的表达水平均最低,模型组在各时间点NogoA、NgR、RhoA含量均较假手术组明显升高(P＜0.05),PAS组术后各时间点NogoA、NgR、RhoA的含量高于假手术组(P＜0.05),低于同时间点模型组(P＜0.05),PAS组NogoA、NgR、RhoA蛋白在术后28d的含量低于同组第7d、14d(P＜0.05).结论:PAS可抑制NogoA/NgR/RhoA信号通路蛋白的表达,可能是PAS促进脑缺血大鼠神经再生,改善脑缺血大鼠的感觉运动功能障碍的内在分子机制之一.

摘要： 目的 观察2型糖尿病(T2DM)大血管病变(MVC)患者血清中Nogo-A蛋白和Adropin蛋白水平及其相关性.方法 T2DM患者中符合MVC40例为MVC组,无任何并发症40例为T2DM组.同期体检的健康志愿者40例作为对照组.检测三组血清Nogo-A蛋白和Adropin蛋白水平并分析.入组对象均测量身高、体重,计算体重指数(BMI),在禁食10～12 h后,于次日清晨空腹采集肘部静脉血10 ml,离心分离血清,将血清分两份,取一份血清测定空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、C反应蛋白(CRP)等指标,取另一份血清存放在-80°C冰箱内保存用于测定血清Nogo-A和Adropin水平.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清Nogo-A和Adropin水平.结果 对照组、T2DM组和MVC组血清Nogo-A水平逐渐升高〔(89.79±6.81)vs(98.49±13.08)vs(109.22±13.73)ng/ml〕,Adropin水平逐渐降低〔(3.60±0.35)vs(2.11±0.09)vs(1.86±0.15)ng/ml〕,差异显著(均P<0.05).Nogo-A与FPG、HbA1c、CRP呈正相关(P<0.05),与Adropin、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关(P<0.05);Adropin与HDL-C呈正相关,与FPG、HbA1c、CRP、Nogo-A呈负相关(P<0.05).结论 血清Nogo-A水平升高及Adropin水平降低均与T2DM合并MVC相关.

摘要： 目的 探讨FK506对大鼠施万细胞株GFAP、NF200及Nogo-A蛋白表达的影响.方法 依据实验需要大鼠RSC96施万细胞株分为:A组(空白对照组);B组(FK506诱导剂组);C组(DMSO溶剂对照组).诱导1 d和14 d后用RT-PCR和免疫组织化学方法检测RSC96细胞株GFAP、NF200及Nogo-A的mRNA和蛋白的表达情况.结果 在FK506处理14 d后,RSC96细胞GFAP、NF200的mRNA表达水平显著高于两对照组明显升高(P<0.01),而Nogo-A基因mRNA表达明显低于两对照组(P<0.01).免疫组化检测显示,RSC96细胞株应用FK506处理14 d后,GFAP、NF200的阳性细胞数量明显多于两对照组(P<0.05),Nogo-A蛋白的阳性细胞数量,在诱导1 d时明显多于两对照组(P<0.05);而诱导14 d后,Nogo-A蛋白阳性细胞数量明显低于试剂对照组(P<0.05).结论 FK506可能具有促进GFAP和NF200表达的作用,同时可能具有抑制Nogo-A表达的作用.FK506可能具有促进大鼠施万细胞增殖分化的作用,从而加速周围神经损伤的修复与再生.

摘要： 轴突损伤往往导致成年哺乳动物中枢神经系统永久性缺损.作为轴突生长抑制剂,Nogo-A及其受体在中枢神经系统成熟神经元中参与对突触可塑性的调节作用,并与脊髓损伤、多发性硬化症、阿尔茨海默病及创伤后应激障碍等的发病有关.

摘要： 目的:探讨麻黄碱联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经可塑性的影响及其分子机制。rn 方法:新生SD大鼠80只，随机分成5组：假手术组，缺氧缺血组，麻黄碱治疗组，高压氧治疗组以及麻黄碱和高压氧联合治疗组，每组16只。于7日龄行左侧颈总动脉永久结扎，吸入8％O2+92％N2混合气体行低氧处理2小时，制成缺氧缺血性脑损伤模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎，不缺氧。麻黄碱组每日腹腔注射麻黄碱1.5 mg·kg-1，高压氧组每日以2.5个大气压行2小时干预，联合治疗组给予麻黄碱和高压氧治疗，假手术组和缺氧缺血组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，上述各组干预均为每日一次，共7日。各组大鼠均于术后1周麻醉下处死8只取脑。HE染色观察脑组织病理变化，免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和轴突再生抑制蛋白(Nogo-A)表达情况。余新生鼠喂养至术后4周行5天的Morris水迷宫学习和记忆的测试。rn 结果:HE染色观察到缺氧缺血性脑病后脑组织广泛的神经元变性和水肿。与缺氧缺血组相比，麻黄碱、高压氧单用及两者联用组脑组织Caspase-3和Nogo-A表达均减少，差异具有统计学意义(P<0.01)，两者联用组Caspase-3和Nogo—A表达较单治疗组减少，差异具有统计学意义(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示：第2～5天各组平均逃避潜伏期明显短于缺氧缺血组(P<0.05)，平台穿过次数各组均多于缺氧缺血组(P<0.05);与两单治疗组相比，第3～5天两者联用组平均逃避潜伏期较短(P<0.01)，平台穿过次数较多(P<0.01)。rn 结论:麻黄碱和高压氧治疗均能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑组织损伤，提高新生缺氧缺血性脑损伤大鼠年长后的空间定向能力和学习记忆能力。与单一治疗相比，两者联用具有更加显著的保护作用。其机制考虑与下调缺氧缺血性脑损伤后Caspase-3和Nogo—A的表达有关。

摘要： 目的:探讨麻黄碱联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经可塑性的影响及其分子机制。rn 方法:新生SD大鼠80只，随机分成5组：假手术组，缺氧缺血组，麻黄碱治疗组，高压氧治疗组以及麻黄碱和高压氧联合治疗组，每组16只。于7日龄行左侧颈总动脉永久结扎，吸入8％O2+92％N2混合气体行低氧处理2小时，制成缺氧缺血性脑损伤模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎，不缺氧。麻黄碱组每日腹腔注射麻黄碱1.5 mg·kg-1，高压氧组每日以2.5个大气压行2小时干预，联合治疗组给予麻黄碱和高压氧治疗，假手术组和缺氧缺血组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，上述各组干预均为每日一次，共7日。各组大鼠均于术后1周麻醉下处死8只取脑。HE染色观察脑组织病理变化，免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和轴突再生抑制蛋白(Nogo-A)表达情况。余新生鼠喂养至术后4周行5天的Morris水迷宫学习和记忆的测试。rn 结果:HE染色观察到缺氧缺血性脑病后脑组织广泛的神经元变性和水肿。与缺氧缺血组相比，麻黄碱、高压氧单用及两者联用组脑组织Caspase-3和Nogo-A表达均减少，差异具有统计学意义(P<0.01)，两者联用组Caspase-3和Nogo—A表达较单治疗组减少，差异具有统计学意义(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示：第2～5天各组平均逃避潜伏期明显短于缺氧缺血组(P<0.05)，平台穿过次数各组均多于缺氧缺血组(P<0.05);与两单治疗组相比，第3～5天两者联用组平均逃避潜伏期较短(P<0.01)，平台穿过次数较多(P<0.01)。rn 结论:麻黄碱和高压氧治疗均能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑组织损伤，提高新生缺氧缺血性脑损伤大鼠年长后的空间定向能力和学习记忆能力。与单一治疗相比，两者联用具有更加显著的保护作用。其机制考虑与下调缺氧缺血性脑损伤后Caspase-3和Nogo—A的表达有关。

摘要： 目的:探讨麻黄碱联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经可塑性的影响及其分子机制。rn 方法:新生SD大鼠80只，随机分成5组：假手术组，缺氧缺血组，麻黄碱治疗组，高压氧治疗组以及麻黄碱和高压氧联合治疗组，每组16只。于7日龄行左侧颈总动脉永久结扎，吸入8％O2+92％N2混合气体行低氧处理2小时，制成缺氧缺血性脑损伤模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎，不缺氧。麻黄碱组每日腹腔注射麻黄碱1.5 mg·kg-1，高压氧组每日以2.5个大气压行2小时干预，联合治疗组给予麻黄碱和高压氧治疗，假手术组和缺氧缺血组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，上述各组干预均为每日一次，共7日。各组大鼠均于术后1周麻醉下处死8只取脑。HE染色观察脑组织病理变化，免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和轴突再生抑制蛋白(Nogo-A)表达情况。余新生鼠喂养至术后4周行5天的Morris水迷宫学习和记忆的测试。rn 结果:HE染色观察到缺氧缺血性脑病后脑组织广泛的神经元变性和水肿。与缺氧缺血组相比，麻黄碱、高压氧单用及两者联用组脑组织Caspase-3和Nogo-A表达均减少，差异具有统计学意义(P<0.01)，两者联用组Caspase-3和Nogo—A表达较单治疗组减少，差异具有统计学意义(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示：第2～5天各组平均逃避潜伏期明显短于缺氧缺血组(P<0.05)，平台穿过次数各组均多于缺氧缺血组(P<0.05);与两单治疗组相比，第3～5天两者联用组平均逃避潜伏期较短(P<0.01)，平台穿过次数较多(P<0.01)。rn 结论:麻黄碱和高压氧治疗均能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑组织损伤，提高新生缺氧缺血性脑损伤大鼠年长后的空间定向能力和学习记忆能力。与单一治疗相比，两者联用具有更加显著的保护作用。其机制考虑与下调缺氧缺血性脑损伤后Caspase-3和Nogo—A的表达有关。

摘要： 目的:探讨麻黄碱联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经可塑性的影响及其分子机制。rn 方法:新生SD大鼠80只，随机分成5组：假手术组，缺氧缺血组，麻黄碱治疗组，高压氧治疗组以及麻黄碱和高压氧联合治疗组，每组16只。于7日龄行左侧颈总动脉永久结扎，吸入8％O2+92％N2混合气体行低氧处理2小时，制成缺氧缺血性脑损伤模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎，不缺氧。麻黄碱组每日腹腔注射麻黄碱1.5 mg·kg-1，高压氧组每日以2.5个大气压行2小时干预，联合治疗组给予麻黄碱和高压氧治疗，假手术组和缺氧缺血组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，上述各组干预均为每日一次，共7日。各组大鼠均于术后1周麻醉下处死8只取脑。HE染色观察脑组织病理变化，免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和轴突再生抑制蛋白(Nogo-A)表达情况。余新生鼠喂养至术后4周行5天的Morris水迷宫学习和记忆的测试。rn 结果:HE染色观察到缺氧缺血性脑病后脑组织广泛的神经元变性和水肿。与缺氧缺血组相比，麻黄碱、高压氧单用及两者联用组脑组织Caspase-3和Nogo-A表达均减少，差异具有统计学意义(P<0.01)，两者联用组Caspase-3和Nogo—A表达较单治疗组减少，差异具有统计学意义(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示：第2～5天各组平均逃避潜伏期明显短于缺氧缺血组(P<0.05)，平台穿过次数各组均多于缺氧缺血组(P<0.05);与两单治疗组相比，第3～5天两者联用组平均逃避潜伏期较短(P<0.01)，平台穿过次数较多(P<0.01)。rn 结论:麻黄碱和高压氧治疗均能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑组织损伤，提高新生缺氧缺血性脑损伤大鼠年长后的空间定向能力和学习记忆能力。与单一治疗相比，两者联用具有更加显著的保护作用。其机制考虑与下调缺氧缺血性脑损伤后Caspase-3和Nogo—A的表达有关。

摘要： 目的:探讨麻黄碱联合高压氧治疗对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经可塑性的影响及其分子机制。rn 方法:新生SD大鼠80只，随机分成5组：假手术组，缺氧缺血组，麻黄碱治疗组，高压氧治疗组以及麻黄碱和高压氧联合治疗组，每组16只。于7日龄行左侧颈总动脉永久结扎，吸入8％O2+92％N2混合气体行低氧处理2小时，制成缺氧缺血性脑损伤模型。假手术组只作左颈总动脉分离而不结扎，不缺氧。麻黄碱组每日腹腔注射麻黄碱1.5 mg·kg-1，高压氧组每日以2.5个大气压行2小时干预，联合治疗组给予麻黄碱和高压氧治疗，假手术组和缺氧缺血组大鼠每日腹腔注射等量生理盐水，上述各组干预均为每日一次，共7日。各组大鼠均于术后1周麻醉下处死8只取脑。HE染色观察脑组织病理变化，免疫组化法检测半胱天冬氨酸蛋白-3(Caspase-3)和轴突再生抑制蛋白(Nogo-A)表达情况。余新生鼠喂养至术后4周行5天的Morris水迷宫学习和记忆的测试。rn 结果:HE染色观察到缺氧缺血性脑病后脑组织广泛的神经元变性和水肿。与缺氧缺血组相比，麻黄碱、高压氧单用及两者联用组脑组织Caspase-3和Nogo-A表达均减少，差异具有统计学意义(P<0.01)，两者联用组Caspase-3和Nogo—A表达较单治疗组减少，差异具有统计学意义(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示：第2～5天各组平均逃避潜伏期明显短于缺氧缺血组(P<0.05)，平台穿过次数各组均多于缺氧缺血组(P<0.05);与两单治疗组相比，第3～5天两者联用组平均逃避潜伏期较短(P<0.01)，平台穿过次数较多(P<0.01)。rn 结论:麻黄碱和高压氧治疗均能减轻新生大鼠缺氧缺血引起的脑组织损伤，提高新生缺氧缺血性脑损伤大鼠年长后的空间定向能力和学习记忆能力。与单一治疗相比，两者联用具有更加显著的保护作用。其机制考虑与下调缺氧缺血性脑损伤后Caspase-3和Nogo—A的表达有关。

摘要： 本发明涉及生物医学领域，具体而言，涉及一种NogoA抗体及其在脊髓损伤中的应用。本发明所制备得到的NogoA抗体亲和力高，且特异性好，不与NogoB及NogoC发生交叉反应。特别地，该抗体的一个重要优点在于其具有结合并中和NogoA的活性和物理稳定性，因而优选可作为抗体药物使用，其在治疗脊髓损伤中具有优秀的应用前景。

摘要： 本发明涉及生物医药技术领域，具体而言，涉及低氧培养的hUCMSC联合NogoA抗体在脊髓损伤治疗中的应用。通过低氧诱导培养得到的hUCMSC细胞与NogoA抗体配合，能有效增强对脊髓组织损伤的修复效果，具有很好的应用前景。