去甲基化

摘要： 骨髓增生异常综合症(MDS)是一种以造血功能不全和发育异常为特征的克隆性疾病。临床表现为外周血细胞的减少,可能演变为急性髓细胞性白血病(AML)。通过了解MDS患者的病理学参数与细胞遗传学信息,将有助于患者的诊断、预后判断及治疗。研究表明,基因突变对治疗结果也有影响,对预后的影响可导致患者预后风险分层的改善。某些基因突变自身就可能是治疗该病的潜在靶向目标,为新的靶标药物的研究与应用提供了可能。本文主要对MDS相关基因突变的致病机制及其对MDS预后的影响,基因突变与去甲基化药物治疗疗效的关系进行综述,以期为临床治疗MDS提供参考。

摘要： 目的:探讨去甲基化药物地西他滨(DAC)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)和复发急性髓细胞性白血病(AML)的疗效。方法:选择2016年6月—2021年9月收治的16例患者,其中骨髓增生异常综合征9例[难治性贫血伴原始细胞过多(MDS-RAEB)8例和慢性粒单细胞白血病(CMML)1例],复发急性髓细胞白血病(AML)7例,均使用低剂量地西他滨治疗,静脉滴注15 mg·m^(-2)·d^(-1),连续给药5 d,每4周为1个周期,连续使用4个周期。结果:所有患者使用DAC的中位周期数为2个周期,中位反应持续时间为22.5周。MDS-RAEB患者中,完全缓解(CR)率为44.4%,治疗反应率为77.8%;AML患者中,CR率为42.9%,治疗反应率为71.4%。16例患者的CR率为43.8%,总体治疗反应率为75.0%。无一例发生与DAC治疗相关的骨髓抑制、感染、出血、恶心、呕吐等反应。结论:单药低剂量(5 d方案)地西他滨治疗MDS和复发AML疗效优于传统的化疗方案,可以增加治疗反应率,减少毒性反应,提高患者生活质量,延长无病生存期。

摘要： 目的回顾分析地西他滨与阿扎胞苷去甲基化治疗骨髓增生异常综合征的临床疗效及安全性。方法选取北京燕化医院2017年6月—2021年6月确诊为骨髓增生异常综合征患者120例,遵照随机数表法分为地西他滨组以及阿扎胞苷组,每组60例。地西他滨组选择应用地西他滨,阿扎胞苷组应用阿扎胞苷,对比评估治疗效果,评估指标包含治疗有效率、不良反应严重程度、外周血细胞计数。结果地西他滨组临床治疗有效率68.33%高于阿扎胞苷组临床治疗有效率40.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=9.701,P0.05),治疗后,两组外周血细胞计数对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论地西他滨治疗中高危骨髓增生异常综合征骨髓抑制明显,但是和阿扎胞苷比较具有较高的治疗有效率,对于提升患者整体生存质量具有积极意义,可作为骨髓增生异常综合征治疗的主要手段,在临床实践过程中具有借鉴价值。

摘要： 以工业碱木质素为原料,通过去甲基化处理提高木质素酚羟基含量,然后在碱性条件下与环氧氯丙烷反应合成去甲基木质素环氧树脂(DLEP),用于改性大豆基胶黏剂。去甲基化结果表明,木质素酚羟基含量由1.97 mmol/g提升至2.98 mmol/g,与未处理木质素相比,提高约51%。环氧值滴定结果显示,DLEP的环氧值达到0.297 mol/100 g,比直接用木质素合成环氧树脂(LEP)的环氧值提高近29%。红外光谱(FT-IR)和扫描电镜(SEM)表征显示,木质素甲氧基脱除生成了新的酚羟基;DLEP成功枝接了环氧基团;DLEP中的环氧基与大豆蛋白中氨基、羧基及羟基反应,形成致密的交联结构。当DLEP质量分数为4%时,胶黏剂的湿胶合强度达1.34 MPa,比纯大豆基胶黏剂高119.6%,满足GB/T 9846—2015中Ⅱ类板的要求。

摘要： 目的:探讨姜黄素对肺癌细胞组织因子途径抑制物-2(tissue factor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因去甲基化的作用。方法:将人A549细胞分为姜黄素低剂量组(20μmol·L^(-1))、姜黄素中剂量组(40μmol·L^(-1))、姜黄素高剂量组(80μmol·L^(-1))及空白对照组,分别采用完全培养液及含相应浓度姜黄素的培养液培养后,MTT法检测A549细胞的增殖情况;RT-PCR检测TFPI-2 mRNA及DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)mRNA、DNMT3a mRNA、DNMT3b mRNA的表达情况;甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测TFPI-2基因甲基化状态。结果:与空白对照组比较,处理细胞12 h、24 h及48 h后,各剂量姜黄素组细胞增殖降低,且40μmol·L^(-1)姜黄素处理细胞48 h时OD值最低,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞抑制率结果显示,各剂量姜黄素处理细胞12 h、24 h及48 h后均可抑制细胞增殖。与空白对照组比较,姜黄素各剂量组TFPI-2 mRNA表达水平升高,DNMT1 mRNA、DNMT3a mRNA、DNMT3b mRNA表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。TFPI-2甲基化检测显示:空白对照组未显示甲基化及去甲基化产物,各剂量姜黄素组同时显示甲基化产物和去甲基化产物,尤以姜黄素中剂量组去甲基化产物条带最为明显。结论:姜黄素可通过降低DNMT1 mRNA、DNMT3a mRNA、DNMT3b mRNA表达水平抑制TFPI-2甲基化,进而抑制A549细胞增殖,且以浓度40μmol·L^(-1)抑制效果最佳。

摘要： 赖氨酸去甲基化酶6A(lysine demethylase 6A,KDM6A)在20多年前首次被发现,于2007年被鉴定为特异性组蛋白去甲基化酶[1],能去除组蛋白H3第27位赖氨酸三甲基化(H3K27me3)修饰的抑制作用,对生理造血有重要意义。髓系肿瘤是骨髓内异常造血干祖细胞(hematopoietic stem and progenitor cell,HSPC)的克隆性增生。

摘要： 骨髓增生异常综合征(MDS)又称为难治性贫血,依赖输血,高风险向急性白血病转化,严重影响患者的生活质量和生存周期.因此尽早经骨髓形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等检查明确诊断,精准预后分层及规范化治疗至关重要.本文通过回顾1例MDS(高危组)患者,应用不同剂量地西他滨治疗并复习相关文献,探讨减低剂量地西他滨治疗MDS患者效果与安全性.

摘要： 目的 系统评价去甲基化药物治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的效果和安全性,为该类药物的临床应用提供依据和指导.方法 计算机检索PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、中国期刊全文数据库(CNKI)、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普(VIP)数据库2000年1月至2019年12月发表的去甲基化药物治疗MDS的随机对照试验(RCT).经过筛选,采用RevMan 5.3软件进行疗效及完全性的Meta分析.结果 共纳入7项RCT研究的1 172例患者.Meta分析显示,去甲基化药物治疗组在完全缓解率(OR=6.26,95％ CI 1.74 ～ 22.49,P=0.005)、部分缓解率(OR=4.65,95％ CI1.51～14.29,P=0.007)、总有效率(OR=14.14,95％ CI 7.27～ 27.51,P＜0.01)、血液学改善(OR=3.47,95％ CI 1.44～ 8.32,P=0.005)方面均优于支持治疗组.阿扎胞苷治疗组患者总生存得到改善(HR=0.62,95％ CI 0.50～0.77,P＜ 0.01).在不良反应方面,去甲基化药物增加了粒细胞减少性发热的发生(OR=4.19,95％ CI 2.26 ～ 7.76,P＜0.01),但是在粒细胞减少、血小板减少、贫血、感染、恶心、肝损害、疲劳的发生率方面,两组间差异均无统计学意义(均P＞ 0.05).结论 去甲基化药物治疗MDS效果明显,可提高缓解率,阿扎胞苷可延长患者生存时间,但去甲基化药物增加了粒细胞减少性发热的发生.在临床应用该类药物时,需进一步仔细评估其临床安全性.

摘要： 目的 探讨骨髓增生异常综合征(MDS)伴Sweet综合征的临床特点及治疗方案选择.方法 回顾性分析厦门大学附属中山医院2019年12月收治的1例MDS伴Sweet综合征患者的临床资料,并进行文献复习.结果 该患者实验室及病理活组织检查提示MDS伴Sweet综合征诊断明确,使用激素类药物治疗后肺部浸润病灶吸收不明显,疗效不佳.采用激素和地西他滨治疗后,皮肤损害明显改善,肺部浸润吸收明显.结论 去甲基化治疗对于MDS和Sweet综合征均具有疗效.

摘要： 目的 探讨地西他滨对人乳腺癌细胞中miR-5047 表达及其启动子甲基化状态的影响.方法 用甲基化特异性PCR(MSP)法和qRT-PCR 法分别检测人乳腺正常MCF-10A 细胞和人乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7 细胞中miR-5047 的表达水平及miR-5047 启动子区的甲基化状态.用5 μmol/L 和10 μmol/L浓度的地西他滨分别处理MDA-MB-231 细胞,MSP 法检测miR-5047 启动子区的甲基化状态,qRT-PCR 法检测miR-5047 的表达.结果 与人乳腺正常上皮细胞MCF-10A 相比,乳腺癌MDA-MB-231 和MCF-7 细胞中miR-5047 呈低表达,而其启动子区均呈高甲基化状态;地西他滨处理后,MDA-MB-231 细胞中miR-5047 启动子区的甲基化水平明显降低,miR-5047 表达水平则显著升高.结论 地西他滨可通过降低乳腺癌细胞中miR-5047基因启动子区甲基化水平从而促进miR-5047 的表达.

摘要： 随着工业的发展,土壤中重金属污染成为国内外研究的难点与热点.汞污染尤其是甲基汞由于其具有剧毒性,引起了人民的广泛关注.甲基汞主要在还原环境中形成,然后通过生物地球化学过程降解.其中光降解和微生物降解是甲基汞去甲基化的两个主要过程,目前已有大量研究及相关报道.然而,人们很少关注在黑暗/厌氧土壤/沉积物中甲基汞的降解行为.前期调查发现,在我国南部广州市重汞污染区土壤中汞含量与铁、铜含量成显著的负相关性.通过XRD分析鉴定,研究区内土壤中(俗称"红壤土")首次发现了一种含铁矿物-羟铁云母(KFe2+3(AlSi3O10)(OH)2.本文研究了羟铁云母氧化产生羟基自由基的机制及其相应的环境效应,提出了结构态二价铁在氧化过程中不仅生成具有反应活性的羟基自由基,同时二价铁氧化过程中产生的中间产物(双氧水与活性氧)可激活土壤中铜离子成为具有强氧化能力的活性三价铜,二者均能促进甲基汞的去甲基化.这些发现帮助正确理解土壤中甲基汞污染的分布差异不仅与污染物的外部来源有关,而且与其所在土壤中的生物地球化学行为密切相关.

摘要： 有症状的与高危MDS的治疗包括多个治疗目标和选择.这种异质性疾病成功治疗的关键是认真的鉴别并明确诊断,包括对每名患者进行临床、细胞遗传学、生物学和分子学的评价.任何针对MDS新的治疗策略,必须基于公认的和经验证的预后评分系统,如国际预后评分系统(IPSS),并考虑到患者对现有药物治疗反应的预测参数及其合并症情况.对于IPSS低危MDS患者,诸多一线方案可供选择,包括促红细胞生成素、来那度胺和免疫抑制剂.一旦对治疗没有反应,就可以采取序贯疗法.阿扎胞苷和地西他滨与一线或二线治疗密切相关,尤其是患者出现血细胞减少和贫血症状时.去甲基化药物在IPSS高危患者的治疗中扮演核心角色.这类药物包括阿扎胞苷和地西他滨,可用于老年及体质虚弱的患者,能够使大约半数病人血象改善并摆脱输血.阿扎胞苷治疗已被证明能够显著延长生存期.由于去甲基化药物不能治愈疾病,它们对年轻MDS患者效果欠佳,此时,移植应该纳入日程.虽然去甲基化药物应用广泛,但是,越来越多的MDS患者缺乏治疗反应或进步.未来的挑战是,不仅要找到靶向发育不良克隆的治疗方案,以便实现持久缓解(特别是在生存期短和/或白血病转化率高的高危患者),而且也要发展积极的补救方案.

摘要： 本文以小鼠为研究对象，通过分析ShmC在合子和早期植入前胚胎中的分布以及甲基化质粒在早期胚胎中的变化，得到如下结果:(1)在合子中，雌雄原核SmC和ShmC表现出不对称的分布，而在孤雌原核时期胚胎两个原核中SmC和ShmC染色信号一致，并没有观察到不对称的分布;(2)甲基化质粒在受精和孤雌胚胎中能够发生主动去甲基化，在注射后50h时能够观察到甲基化质粒的蛋白水平表达。在注射后的胚胎中绿色荧光的表达呈现出嵌合的表达模式，并且受精胚胎中绿色荧光蛋白阳性胚胎数明显高于孤雌胚胎。在甲基化质粒去甲基化过程中，质粒启动子区域内能够检测到ShmC的存在;(3)Tet3基因在MII期卵母细胞和合子时期表达量较高，随着胚胎的发育其表达量逐渐下降，Tet1和Tet2基因在合子时期和植入前胚胎中表达量较低。在植入前胚胎中，甲基化和去甲基化过程是共同存在的，并且是一个动态变化的过程，4细胞到8细胞发育过程中LINEI原件的总甲基化程度和ShmC含量发生明显的降低，但是囊胚阶段内细胞团中甲基化和轻甲基化程度出现升高的趋势。本研究结果对于深入研究DNA主动去甲基化的机制提供了理论依据。

摘要： 维生素C(Vc)是人体必需的一种营养物，除了抗坏血病和抗氧化作用以外，还可作为许多双加氧酶的辅助因子。因而，设想Vc是Tet酶(属于双加氧酶家族)的一种新辅助因子。利用发展的超高效液相色谱-串联质谱方法，证实了在体外氧化反应中Vc能显著增强Tet氧化5mC的能力，而其它强还原剂并不能提高Tet的催化效率。荧光猝灭数据及Vc类似物对比分析表明这种增强效应与Vc和Tet相互作用直接相关。进一步发现Vc能促进Tet转染细胞和小鼠胚胎干细胞内5mC的氧化和DNA去甲基化。特别是Vc处理后，小鼠干细胞内5fC和5caC增加量超过了一个数量级，5mC水平降低了40%。在Tetl/Tet2双敲除小鼠胚胎干细胞内并没有观察这种增强效应。以同卵sfx/sfx小鼠作为模型动物，结果表明Vc同样能促进哺乳动物体内5mC氧化和DNA去甲基化。结合基因本体分析和5hmC富集测序分析，发现维生素C引起小鼠胚胎干细胞内545个基因富集5hmC。rn 研究建立了Vc,Tet和DNA甲基化之间的直接联系，揭示了Vc通过Tet参与了细胞内DNA甲基化的动态调节过程，进而参与特定基因的转录调控中。

摘要： 构建用于高甲基化重组质粒载体并借此研究污染物去甲基化表观遗传毒性评价方法。方法pEGFP-C3质粒经过体外人工甲基化处理后，被转染进入HepG2细胞以构建重组细胞株；以5-AZA为阳性去甲基化毒物与重组细胞共培养，通过亚硫酸氢钠测序法定量检测EGFP基因启动子区甲基化状态，通过实时定量PCR定量检测EGFP基因表达，借助流式细胞术和荧光定量摄片定量检测共培养细胞的绿色荧光强度，在DNA甲基化、EGFP基因mRNA表达、GFP蛋白等多个层次研究5-AZA染毒处理与其去甲基化能力和荧光表达改变的响应关系。并借此对天津污染水产的去甲基化能力进行了实际样品测试。结果5-AZA与重组细胞的DNA甲基化、基因表达、蛋白产物变化之间存在显著关联，具有良好的灵敏度和重复性。天津污染海域的水产去甲基化能力较强。结论初步建立了一种污染物去甲基化表观遗传毒性评价方法。

摘要： 目的：RASSF1A是位于3p21．3区域的新犁抑癌基因,其启动子区的高甲基化导致该基因在某些肿瘤组织和肿瘤细胞中表达缺失。本研究用去甲基化剂5-氮杂-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理肺腺癌细胞株A549,诱导高甲基化失活的抑癌基因RASSF1A重新表达并观察其对肺腺癌细胞生物学行为的影响。rn 方法：分别使用浓度为5×10-mol/L、5×10-mol/L、5×10-'mol/L的5-Aza-CdR处理肺腺癌细胞株A549,对照组细胞以PBS处理。rn 通过RT-PCR榆测处理后抑癌基因RASSF1A mRNA表达的改变,MTT法观察处理后细胞的生长活性,并应用流式细胞术进行细胞周期、凋亡率的分析。rn 结果：肺腺癌细胞株A549经不同浓度之5-Aza-CdR处理后,RASSF1A mRNA表达缺失的A549细胞检出基因重新表达mRNA,对照组A549细胞无RASSF1A mRNA表达：由MTT法绘制细胞生长曲线,5-Aza-CdR处理后的A549细胞与对照组相比,生长速度出现不同程度减慢。rn 5-Aza-CdR处理后细胞无明显的G1、G2期改变；A549细胞凋亡率由4．2%增至12．3%、15．9%和19．5%。不同浓度5-Aza-CdR作用使A549RASSF1A mRNA表达的量与凋亡率呈正显著相关。rn 结论：(1)肺腺癌A549细胞存在着RASSF1A的表达缺失。(2)5-Aza-CdR可实现启动子去甲基化诱导肺腺癌A549细胞重新表达RASSF1A,并在一定范围内呈浓度依赖性。(3)5-Aza-CdR可抑制肺腺癌A549细胞的生长、诱导细胞凋亡,且与RASSF1A基因表达呈正相关,这提示RASSF1A重新表达可能为去甲基化剂诱导细胞凋亡的途径之一,去甲基化剂可能成为肺癌化疗的侯选用药,RASSF1A有可能作为肺癌防治的新靶点。

摘要： DNA的甲基化及去甲基化是重要的表观遗传学标志之一.其碱基修饰物5-甲基胞嘧啶(5-mdC)及其氧化产物(5-hmdC,5-fdC和5-cadC)与基因的表达和调控、基因组的结构及稳定性、以及生命体生长发育等多种生物过程紧密相关.1-2近年来,科学家们建立了多种检测这些潜在生物标志物的方法.3-6随着精准医疗的普及以及液体活检的兴起,研究者们对痕量的细胞游离DNA(cfDNA)以及循环肿瘤细胞(CTC)的核酸修饰情况十分关注.针对这些痕量、微体积的样品，检测其DNA的甲基化及去甲基化情况是极具挑战又十分有意义的。本工作便建立了一种利用多孔喷头无鞘液接口的毛细管电泳电喷雾质谱联用（CESI-MS）技术高灵敏检测超微体积生物样品中这些碱基修饰物的方法。该方法有着优异的检出限（LODs低至amol）、线性范围和检测重复性。同时，此方法对5-mdC及其氧化产物有良好的定性及定量检测能力。利用5?L，125pg的小鼠胚胎干细胞基因组DNA（相当于20个细胞中的基因组DNA含量）该方法便可成功定量其中的5-mdC和5-hmdC含量。此用量远低于现有的常规高效液相色谱质谱联用方法。同时，由于毛细管电泳的一个独特的优势是其进样量极小（约为5nL到100nL），通过减小样品总体积（200nL到5?L）还可以进一步减小该方法所需的DNA样品量，以达到超微体积样品检测的最终目标。

摘要： 本实验以普通小麦(Triticum aestvum L.)为材料,用0、25、50、75、100 mM NaHCO3溶液处理其根尖,通过常规细胞制片、随机扩增多态性DNA(Random Amplified Polymorphic DNA, RAPD)、CRED-RA(Coupled Restriction Enzyme Digestion-Random Amplification)等方法研究发现:(1) NaHCO3处理后的小麦根端分生细胞出现微核与畸变染色体,包括染色体断片、染色体桥、染色体滞后等;微核率与染色体畸变率随NaHCO3处理浓度的上升而增大.(2)RAPD方法证实50mM NaHCO3处理后的小麦根端细胞DNA受到损伤.(3) CRED-RA检测显示小麦根端细胞DNA的甲基化修饰水平降低.本研究对于NaHCO3导致细胞畸变机制提供了坚实的细胞和分子生物学证据.

摘要： DNA甲基化是表现遗传学(Epigenetics)的一个重要组成部分。在维持正常细胞功能、遗传印记、胚胎发育以及肿瘤的发生发展中起到重要作用。rn 近来研究显示P15基因、P16基因、降钙素(CT)基因、紧密连接蛋白-1(ZO-1)基因等高度甲基化与MDs的发生发展具有重要关系。各种各样的甲基化检测方法被开发出来以满足不同类型研究的需要。5-氮杂胞苷(5-azacytidine)和5-2’-脱氧胞嘧啶(decitabine)等在MDS患者的治疗中已经取得一定效果。去甲基化治疗有望成为今后MDS治疗的有效方案之一。

摘要： 骨髓增生异常综合征(MDS)发病的病理生理学机制尚不完全清楚，这主要是因为MDS的高度异常性决定的。已知一些与MDS发病相关的一些机制，如多种遗传学的异常，表观遗传学的异常，造血干细胞和造血微环境的异常等。随着MDS发病机制研究的进展，出现了一些新的治疗策略和新的治疗药物，本文就近年来这些新的进展作一介绍。

摘要： 本发明涉及一种具有伯、仲或叔氨甲基芳环的化合物的制备方法，该制备方法是使用以下述式(I)Ra(Rb)N-CH2-BF3M (I)表示的氟硼化合物或其二聚物、或所述化合物或其二聚物的溶剂合物作为芳环的氨甲基化剂，在钯化合物等金属催化剂存在下使所述氨甲基化剂和具有可与该氨甲基化剂反应的芳环的化合物发生反应，从而进行芳环的直接氨甲基化。

摘要： 本发明公开了一种酚化羟甲基化并羧甲基化木素及其制备方法，其中酚化羟甲基化并羧甲基化木素的制备方法包括如下步骤：(1)制备酚化木素：用酚和酸将木质素进行酚化得到酚化木素；(2)制备酚化并羟甲基化木素：用碱溶液和醛将所述的酚化木素进行羟甲基化得到所述的羟甲基化木素；(3)将所述的酚化并羟甲基化木素进行羧甲基化得到酚化羟甲基化并羧甲基化木素。本发明方法制备的酚化羟甲基化并羧甲基化木素水溶性和金属离子吸附能力都很强，适合作为螯合微肥使用。

摘要： 本发明涉及一种具有伯、仲或叔氨甲基芳环的化合物的制备方法，该制备方法是使用以下述式(I)Ra(Rb)N－CH2－BF3M(I)表示的氟硼化合物或其二聚物、或所述化合物或其二聚物的溶剂合物作为芳环的氨甲基化剂，在钯化合物等金属催化剂存在下使所述氨甲基化剂和具有可与该氨甲基化剂反应的芳环的化合物发生反应，从而进行芳环的直接氨甲基化。

摘要： 本发明涉及调节核酸的甲基化/去甲基化状态的方法和试剂。本发明人首次证实，基因组DNA中的5-甲基胞嘧啶(5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)都可以被Tet双加氧酶氧化为5-羧基胞嘧啶(5caC)。胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)可以特异性地识别该5caC，并将其从基因组中切除，引起DNA主动去甲基化。因此，可基于此来调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用，以及制备调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用的试剂。本发明确证了细胞中基因组DNA存在5caC修饰，5caC修饰谱式可用来监测细胞状态，并发现ATP及其类似物可以作为Tet酶的调节剂。并且，白血病中Tet突变使5caC活性降低或丧失。

摘要： 本发明涉及一种DNA 5mC或RNA m6A甲基化酶/去甲基化酶的酶活性检测方法。所述方法包括：在所述DNA 5mC甲基化酶/去甲基化酶或者RNA m6A甲基化酶/去甲基化酶的存在下，通过利用荧光偏振、时间分辨荧光能量共振转移(TR‑FRET)或均相光激发化学发光的信号来监测DNA甲基化结合蛋白或者RNA甲基化结合蛋白与带有荧光标记的底物结合状态随时间的变化，进而检测DNA 5mC甲基化酶/去甲基化酶或者RNA m6A甲基化酶/去甲基化酶的酶活性。所述方法具有高效快速、高灵敏度、所需样品少、低成本的特点。

摘要： 本发明公开了一套用于水稻表观基因组甲基化/去甲基化的载体系统。本发明提供了一套用于水稻表观基因组去甲基化的载体系统。该系统通过随机去甲基化水稻基因组来快速产生DNA甲基化变异。该系统涉及水稻OsALKBH DNA 6mA去甲基化酶的表达，导致广泛的低甲基化。该“诱变”技术对于具有重要农业意义的植物，可能导致通常由DNA甲基化沉默的等位基因的差异表达，从而揭示先前隐藏的表型变异的应用具有重要意义。

摘要： 一种特定基因区域DNA甲基化和去甲基化同步分析新方法，可实现特定基因区域5‑甲基胞嘧啶和5‑羟甲基胞嘧啶的同步检测，其特征在于：所述新方法包括捕获、水解、分离、标记和测定五个步骤；其中所述捕获是用DNA限制性内切酶和特异性捕获探针钓取目标DNA片段；其中所述水解是用DNA外切酶将目标DNA片段水解为单核苷酸；其中所述分离是应用功能化纳米颗粒和磁分离技术对单核苷酸进行分离；其中所述标记是应用不同DNA探针标记的5‑甲基胞嘧啶单克隆抗体和5‑羟甲基胞嘧啶单克隆抗体识别目标分子；其中所述测定是在数字化PCR设备上完成两种不同标记DNA探针的定量分析。本发明可广泛用于科研和临床的检测，具有广阔的市场前景。

摘要： 本发明涉及调节核酸的甲基化/去甲基化状态的方法和试剂。本发明人首次证实，基因组DNA中的5-甲基胞嘧啶(5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)都可以被Tet双加氧酶氧化为5-羧基胞嘧啶(5caC)。胸腺嘧啶DNA糖基化酶(TDG)可以特异性地识别该5caC，并将其从基因组中切除，引起DNA主动去甲基化。因此，可基于此来调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用，以及制备调节基因组中DNA的甲基化/去甲基化作用的试剂。本发明确证了细胞中基因组DNA存在5caC修饰，5caC修饰谱式可用来监测细胞状态，并发现ATP及其类似物可以作为Tet酶的调节剂。并且，白血病中Tet突变使5caC活性降低或丧失。

摘要： 本发明提供了一种ESRP1启动子报告基因转录活性可视化及在去甲基化抗癌药物筛选中的应用，本发明构建了ESRP1启动子报告基因载体如SEQ ID NO.3所示，将报告基因转染肿瘤细胞并建立稳定转染细胞株后，外源ESRP1基因启动子将整合至基因组，并与内源性启动子呈同步甲基化。当去甲基化类药物处理稳定转染细胞株后，因启动子去甲基化从而引起报告基因表达上调，荧光信号增强、细胞发光强度增加，因此可用于在体内外条件下监测DNA甲基化抑制剂抗癌药物作用效果。该报告基因可用于在活体小动物肿瘤模型中实时、无创地对抗癌药物疗效进行早期评价，为以DNA甲基化为靶点的抗癌药物筛选提供了一个强有力的工具。

摘要： 本实用新型公开了一种原位测定湖泊水体汞甲基化与去甲基化速率的装置，该发明属于环境研究领域，该装置包括用于使装置保持竖直的支撑杆；用于原位环境参数测定的若干个培养瓶，所述若干个培养瓶分别连接于所述支撑杆的不同高度以实现湖泊分层湖水的参数测定；套装于支撑杆下部的配重铜环；以及套装于支撑杆下部的卡位盘；所述卡位盘固定于所述配重铜环下方，卡位盘上进一步设有透水孔。采用本实用新型的原位测定装置置于湖泊原位环境，更接近实际的湖泊环境条件，能够提供更为接近实际水平的基础数据。