分子生物学检测

摘要： 随着医学科学技术的发展,临床分子生物学诊断水平在不断提升,临床分子生物学检测从手工操作发展为更精准的自动化操作,可排除人为因素造成的误差及污染。根据临床实验室标准研究所(clinical and laboratory standards institute,CLSI)[1,2]以及中国合格评定国家认可委员会(China national accreditation service for conformity assessment,CNAS)[3~5]的要求,在新引入仪器进行常规应用前。

摘要： 鸭疫里氏杆菌病又称鸭传染性浆膜炎,是由鸭疫里氏杆菌引起的主要侵害雏鸭的一种急性败血性传染病。近几年,该病的发病率和死亡率不断升高,迄今为止还主要靠药物治疗。了解鸭疫里氏杆菌的耐药机制及其快速准确检测,其污染是控制鸭疫里默氏杆菌感染传播及其疾病治疗的关键环节。因此本文对鸭疫里氏杆菌的耐药现状、耐药机制以及分子生物学检测方法做了总结概述,以期为临床合理用药防治鸭疫里氏杆菌病,减缓耐药菌株的产生提供依据。

摘要： 巴贝斯虫是一种寄生于宿主红细胞内的血液原虫,感染羊时可导致羊巴贝斯虫病。通过动物发病史、临床症状、实验室血涂片显微镜镜检即可确诊巴贝斯虫。但在动物感染早期及后期,由于染虫率较低,显微镜镜检常会出现漏检;而且在基层使用过程中常会由于血涂片质量较差、检测人员对巴贝斯虫形态不熟悉而出现误诊。PCR方法很好地解决了传统病原学检测中由于敏感性不足而漏检的问题,现已成为巴贝斯虫分子生物学检测领域应用最广的技术。

摘要： 煤污病又称煤烟病,在各种园林植物上普遍发生。紫薇是我国重要的观赏性园林树木,煤污病发生较为严重。目前紫薇煤污病研究较少,病原还未被完全确定。紫薇煤污病可能由小煤炱属真菌引起,或者枝孢霉、散播烟霉、多绺孢属、煤炱菌等多种病原菌混生。该研究主要是根据当地环境条件确定并分离鉴定该地的紫薇煤污病病原,通过形态学观察初步判定紫薇煤污病病原菌主要包括链格孢菌(Alternaria sp.)、枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides)、黑附球菌(Epicoccum nigrum)、聚生小穴壳菌(Dothiorella gregaria)等。为后续病原菌的分子生物学鉴定,综合防治及抗病品种筛选工作提供理论基础。

摘要： 犬种布鲁氏菌病为临床及畜牧业常见传染病,尽管近年来我国对传染病的防控能力有很大提升,但随着人民生活水平提高,城镇家庭饲养宠物犬增加,犬种布鲁氏菌病的隐患增大,需尽早发现、诊断和治疗。目前对该病的诊断,常见诊断方法有全乳环状试验(MRT)、补体结合试验(CET)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析检测技术(GICA)及病原学诊断中的分子生物学检测等。在对该病的治疗中,患病动物多以抗生素治疗为主,配合按时更换消毒剂。

摘要： 山东省农业科学院家禽研究所监测中心(原禽病检测中心)是2008年成立的动物疫病监测专职机构(证书编号191504090292)。中心现有实验室面积约500平方米,分设分子生物学检测室、细菌学检测室、血清学检测室共3套标准实验室。中心现有工作人员27名,其中研究员6人,副研究员5名,助理研究员5名.

摘要： 布鲁氏杆菌是一种胞内寄生菌,现阶段针对布鲁氏杆菌病主要从细菌学、血清学、分子生物学等几方面进行检测。该文对布鲁氏杆菌及检测方法加以介绍,以期为后续研究提供参考。

摘要： 布鲁氏菌病是全球最常见的人畜共患病之一。布鲁氏菌病大多是由羊种布鲁菌感染所致,其次是牛种和猪种。在过去的20年里,人类和动物布病的防控已经取得了较大进展。然而,由于其非特异性的临床表现,控制和根除布病仍然面临巨大的挑战。随着20世纪90年代以来分子生物学技术的快速发展,分子生物学检测方法已被国内外用来迅速检测研究布鲁氏菌,同时由于全球数据共享的数据库的建立,使得全球对于布病的研究越来越深入。

摘要： 随着养殖技术的进步以及国内对猪肉需求量的不断增加,我国的猪养殖业越来越向规模化的方向发展,同时也给当地带来了不菲的经济收益。在猪养殖过程中,猪病毒性疾病问题给养殖带来了很多不利影响,导致猪疫病传播,造成猪群的死亡,从而带来巨大的经济损失。因此针对猪病毒性疾病的快速、准确诊断就显得尤为重要。本文对常见猪病毒性疾病及其检测方法研究进展进行了归纳总结,供广大研究者参考。

摘要： 肺外结核病指由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)感染所引起的发生在肺部以外器官和部位的结核病.近年来肺外结核的发病率逐渐升高,未能得到早期有效治疗的肺外结核病患者可能并发畸形、截瘫甚至死亡等严重后果.微生物学检测方法对从病原学角度诊断肺外结核病至关重要.基于此,总结了近年来肺外结核病细菌学检查方法、结核分枝杆菌的抗原检测与分子生物学检测等微生物学诊断方法的概况及应用进展,并对这些检测方法的优缺点及适用范围进行了分析、比较,以期为今后肺外结核病病原学诊断的研究提供相关信息.

摘要： 副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌均是食源性致病菌,灵敏、快速的检测方法对水产品安全以及保护人类健康极为重要.本文主要综述了水产品中副溶血性弧菌、溶藻弧菌、创伤弧菌的分子生物学检测研究进展.rn 研究表明，对于副溶血性弧菌，荧光定量PCR技术检测的灵敏度可达102CFU/mL;多重PCR技术检测的灵敏度可达2.32×103CFU/mL;但常规PCR技术有的比较高，有的比较低，如李志锋等检测的灵敏度为2.4×l02CFU/mL，而黄晨阳等检测的灵敏度达到了1.161×102CFU/mL。对于溶藻弧菌，目前的研究还是比较少的，韩一凡等利用常规PCR技术检测的灵敏度为3.7×103CFU/mL;刘阳等利用多重PCR技术检测的灵敏度为2.56×103CFU/mL;王海波等主要是利用荧光定量PCR技术优化反应体系，发现其检测下限比常规PCR高出100倍。对于创伤弧菌，石琰璟等利用常规PCR技术检测的灵敏度达3.6×102CFU/mL;潘军航等利用荧光定量PCR技术检测的灵敏度达1.4CFU/mL。rn 通过上述研究，也可发现荧光定量PCR技术的灵敏度比较高，但是它的成本比较高，对于基层单位使用负担比较大，与其它两种技术相比其省去了凝胶电泳的繁琐操作，避免了实验过程中污染，既减少了假阳性的发生率，又缩短了检测时间，近年来己被广泛应用于临床、食品等样品中致病菌的检测；而常规PCR技术虽然成本低，但是它不能定量，灵敏性相对较低；多重PCR技术的体系比较复杂，需要花费更多的时间去摸索稳定的体系，以及要避免引物之间形成二聚体，干扰实验结果，但它消耗的时间和试剂比较少，而且还可减少或避免因操作步骤过多而污染所带来的假阳性等问题。

摘要： 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种猪的高传染性出血性疾病,流行范围广,致死率高,被世界卫生组织(OIE)列为必须报告的动物传染性疾病.随着猪瘟病毒的研究,多种猪瘟毒病毒的检测方法逐渐的被建立,其中分子生物学检测技术包括反转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)、反转录介导等温核酸扩增技术(RT-LAM功及荧光定量RT-PCR技术(Real-time RT-PCR)。分子生物学检测技术以其高特异性、高灵敏性在广大的科研实验中得到了广泛的应用。本文就上述几种分子生物学检测技术作简要的阐述，为进一步了解猪瘟病毒及开展猪瘟病毒相关研究提供参考。

摘要： 腹膜转移是胃癌最常见的转移形式,胃癌的腹膜转移是造成患者预后差的主要原因,因此,及时地进行细胞学及分子生物学检测腹膜转移,从而采取相应治疗,对提高患者术后生存率具有重要意义。目前，细胞学检测主要包括腹腔冲洗液细胞涂片法检查、腹腔冲洗液切片细胞学检查、薄层液基细胞涂片技术(TCT)。而分子生物学检测常用的四种是流式细胞术、免疫磁珠分离技术、逆转录-聚合酶链反应及免疫印迹法。用到的肿瘤标志物为癌胚抗原、细胞角蛋白、基质金属蛋白酶、肝素酶及多巴脱梭酶。

摘要： 猫白血病(Feline Leukaemia,FeL)是由猫白血病病毒(Feline Leukaemia Virus,FeLV)和猫肉瘤病毒(Feline sarcoma virus,FeSV)引起的一种恶性淋巴瘤病,主要引起猫肿瘤并造成免疫系统抑制.主要特征是恶性淋巴肿瘤、骨髓性白血病以及变性性胸腺萎缩和非再生性贫血等,其中对猫最严重的是恶性淋巴肿瘤.幼猫易感性高,随年龄增长易感性降低.主要诊断手段有血常规检查、血液生化检查、血清学检测、分子生物学检测,当前分子生物学检测检出率及准确率较高.目前临床上并没有能彻底治愈FeL的方法,大多预后不良.最为有效的防范措施是加强疾病的预防工作,尤其应加强检疫.

摘要： 影响食品安全最主要的因素之一是食品微生物污染的问题,其中细菌性污染是涉及面最广、影响最严重的一种.为了保障人民群众的健康和对食品安全的有效监管与防控,应用快速的检测方法来加强食品的检测,同时能够有效的预防食品安全问题.本文总结了动物性食品中重要病原微生物的检测方法,重点阐述了分子生物学检测技术和酶底物法检测技术等检测方法，并介绍动物源性食品中重要病原微生物的快速检测研究进展.

摘要： 单核细胞增生李斯特菌是一种人畜共患病的病原菌。临床症状的多样性和血清检测无严格特异性，为本病菌的诊断带来一定困难。现就目前分子生物学检测和分型技术做具体比较分析。指明在实践中考虑到成本和效率的问题，可以将两种或多种检测分型技术联合起来，找到一个高效又节省成本的综合方法，还需要我们在实践中不断摸索。

摘要： 对采自上海市五家生猪屠宰场（复新、裕农、五丰、申兰和爱森）的猪肝脏、盲肠样品的空肠弯曲杆菌进行了检测，这些屠宰场的猪分别来自河南、山东、江苏、安徽、浙江及上海等地区，从猪肝脏样品检测空肠弯曲杆菌感染阳性率来看，上海嘉定、南汇、奉贤，浙江嘉善和山东青岛显著低于其它地区，而江苏张家港和大丰感染阳性率较高；从盲肠内容物检测空肠弯曲杆菌感染阳性率来看，上海金山、嘉定、奉贤和浙江嘉善显著低于其他省市地区。由此可见，生猪的产地对其空肠弯曲杆菌的带菌状况有着较大的影响。本文发挥上海地区地位优势，利用屠宰场集中多个产地动物样品的特点，采用分子生物学检测技术，对所采样品进行空肠弯曲杆菌检测，并对不同来源地域间的流行分布状况进行了统计学分析，较为全面系统地开展了空肠弯曲杆菌感染的地域分布状况研究。得到的分析结果为进一步掌握空肠弯曲杆菌流行分布规律，对我国今后空肠弯曲杆菌病流行趋势做出预测，为国家制定防制空肠弯曲杆菌病有效的措施提供了一定的科学理论依据。

摘要： 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术是一门新兴的分子生物学检测技术，因其具有特异性强、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点，受到了生物医学研究者的高度关注。目前，该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。本文综述了近年来环介导等温扩增技术在动物疫病检测中的具体应用实例和目前的研究进展，并对LAMP方法在动物疫病诊断中的应用前景做了展望。

摘要： 肥大细胞白血病(mast cell leukemia,MCL)是系统性肥大细胞恶性增生所致,在WHO2016版分类中隶属于髓系肿瘤,该病预后差,患者生存期一般不超过1年.在我国MCL是极为罕见的疾病,报道一例诊断为非白血病性MCL的病例.

摘要： 肥大细胞白血病(mast cell leukemia,MCL)是系统性肥大细胞恶性增生所致,在WHO2016版分类中隶属于髓系肿瘤,该病预后差,患者生存期一般不超过1年.在我国MCL是极为罕见的疾病,报道一例诊断为非白血病性MCL的病例.

摘要： 本发明涉及一种利用分子生物学技术定量检测纳米材料生物安全性的方法，该方法是通过检测纳米材料对体外基因扩增的影响，从而实现定量衡量不同类型纳米材料的生物安全性。本发明利用体外基因扩增技术和基因重组技术，可对于纳米材料所引起的体外基因突变率进行精确地计算；此外，利用高效的rpsl基因正向选择系统，可在进行大规模分析时节省大量的原材料和劳动力。

摘要： 本发明涉及一种利用分子生物学技术定量检测纳米材料生物安全性的方法，该方法是通过检测纳米材料对体外基因扩增的影响，从而实现定量衡量不同类型纳米材料的生物安全性。本发明利用体外基因扩增技术和基因重组技术，可对于纳米材料所引起的体外基因突变率进行精确地计算；此外，利用高效的rpsl基因正向选择系统，可在进行大规模分析时节省大量的原材料和劳动力。

摘要： 本发明提供了一种用于香米纯度定量检测的方法和用于香米纯度定量检测的试剂盒。本发明提供的用于香米纯度定量检测的方法包括：1)提取米样DNA；2)使用可扩增香米和非香米的差异片段序列的引物进行PCR扩增；3)进行定量分析，确定待测米样香米纯度。本发明利用香米区别于非香米的特异序列，设计高效灵敏的香米特异性引物和探针，对样本DNA进行实时荧光PCR扩增，通过设置内源参照基因与参照样本再对扩增数据进行定量分析，从而对香米纯度进行定量判断。基于分子生物学的香米纯度定量检测，有效地解决了香米中掺入非香米的定量鉴别的难题。

摘要： 本发明公开了一种利用分子生物学技术定量检测设备，其结构包括料筒、支架、导料板、扶把、门吸、入料口，料筒上连接有支架和入料口，入料口上滑动配合有导料板，导料板通过扶把与门吸间接配合，门吸包括磁铁、框架、助力组件、固定座、安装板，磁铁连接在框架和固定座之间，固定座内通过安装板设置有助力组件，框架连接在入料口上，在助力组件上设置有活结和控位装置，利用活结和控位装置在撑板之间相配合，当导料板在料筒和门吸之间以不同加速度抖动时，将会通过控位装置快速按压住撑板，使得撑板剖开缩套，快速承接住活结，两者交叉对接相互借力，阻挡和锁紧住扶把，保证导料板高处的稳定性。

摘要： 本发明公开了一种快速检测庆大霉素高产菌株的分子生物学方法，先采用氯化锂和ARTP相结合的方法对生产菌株进行诱变，可产生大量的正突变菌株；然后采用微卫星标记技术，结合琼脂糖凝胶电泳法，以待检测菌种DNA为模板，微卫星标记为引物，经聚合酶链式反应，扩增出大量特异性条带，经过琼脂糖凝胶电泳的检测，去除没有条带的菌落。本发明实现了对突变菌株的大规模初筛，避开了酶标仪检测，衍生产物不稳定，易分解对数据造成的影响。同时扩大筛选数量，大大提高了筛选效率。可以对绛红色小单孢菌诱变菌株进行大范围筛选，操作简便，筛选范围增大，筛选效率提高，减轻后期筛选力度。

摘要： 本发明提供了本发明通过分子生物学方法(例如，荧光实时PCR和高分辨率熔解曲线分析)来定性鉴别黑芝麻和白芝麻的方法。本发明还提供了用于鉴别黑芝麻和白芝麻的特异性引物。

摘要： 本实用新型公开了一种分子生物学用检测设备，包括本体，所述本体的两侧均固定连接有第一弹簧，所述第一弹簧远离本体的一端固定连接有防护板，所述本体的两侧且位于第一弹簧之间均固定连接有阻尼器，所述阻尼器远离本体的一侧与防护板的表面固定连接。本实用新型通过本体、第一弹簧、防护板、阻尼器、竖管、活塞杆、第一连接块、连接杆、第二连接块、横管、移动板、第二弹簧和横杆的配合，实现了防护效果好的目的，能够对冲击力进行有效缓冲，有效避免因冲击力导致分子生物学用检测设备损坏，满足当今市场的需求，提高了分子生物学用检测设备的实用性和使用性，解决了以往分子生物学用检测设备防护效果不佳的问题。

摘要： 本发明属于生物检测技术领域，公开了一种甲型肝炎病毒的负链RNA分子生物学检测方法及应用，所述方法以HAV(‑)RNA为模板，运用RT‑PCR法进行(‑)RNA的检测。若检测到(‑)RNA，则说明有HAV在复制，即样品中有活着的HAV，若检测不到(‑)RNA，则说明没有HAV复制，即样品中没有活的HAV；同时，检测到(‑)RNA时，亦可依据(‑)RNA的含量来推断样品中活的HAV的量，进而推算出样品中的HAV滴度。RT‑PCR的高灵敏度性使得可在较短的培养时间内检测出代表HAV复制的(‑)RNA的存在与否及其相对含量，进而在更少的时间内完成病毒灭活效果的验证和病毒滴度的测定，加速甲肝疫苗的研发进度以及减少成品甲肝疫苗的库存期。

摘要： 本实用新型公开了一种安装有防滑橡胶垫的生化与分子生物学检测用PCR仪，包括PCR仪本体，所述PCR仪本体的底部设置有两个锁紧组件，所述PCR仪本体通过两个锁紧组件连接有四个防滑支撑组件，所述防滑支撑组件包括插块，所述插块的内部开设有插孔。本实用新型通过防滑支撑组件中的吸盘可以吸附在光滑的桌面上，而且通过防滑橡胶垫的设置，不仅提高了PCR仪位于桌面的防滑性，而且提高了PCR仪位于桌面的稳定性，而防滑橡胶垫还具备良好的拆装功能，便于后续工作人员针对损坏的防滑橡胶垫进行更换，有效的解决了PCR仪位于光滑工作台面上工作时，稳定性较差，容易出现振动偏移的问题，进一步提高了PCR仪的实用性。

摘要： 本实用新型公开了一种安装有辅助散热机构的生化与分子生物学检测用PCR仪，包括PCR仪本体，PCR仪本体的顶部设置有PCR检测组件，PCR仪本体的内部开设有活动槽，PCR仪本体的两侧均开设有散热口，两个散热口均与PCR仪本体的内部连通，两个散热口的内部均设置有过滤网，活动槽内部的正面和背面之间固定连接有垫板，垫板上设置有遮挡组件。本实用新型，通过散热口的开设，便于活动槽内部气体的流通，进而提高PCR仪内部的散热效果，通过散热翅片的设置，便于将PCR检测组件的热量进行导出，而且通过两个风扇组件的设置，可以向散热翅片的位置进行吹风，形成热转换，并且使热流通过排出孔进行排出，进一步提高了散热效果。