凝乳酶

摘要： 为揭示地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶对切达干酪成熟过程中质地的影响,利用地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶制作切达干酪(C_(DF)组)和切达干酪类似物(C_(D3)组),采用商品凝乳酶作为对照(C_(CF)组),分析干酪成熟过程中质构、流变特性、微观结构的变化规律。结果表明:3组干酪的硬度随着干酪的成熟而增加,而弹性和咀嚼性则呈现下降趋势,C_(DF)组干酪硬度、弹性、咀嚼性均最小;蛋白结构的致密性随干酪成熟度的增加而减弱,C_(DF)组干酪结构相比于C_(CF)组干酪较为松散;在6个月的成熟期内,3组干酪的储能模量和损耗模量随着成熟时间和扫描温度的增加而降低,损耗角正切值(tanδ)在成熟期内下降,表明干酪流动性随着成熟时间的延长而减弱,其中C_(DF)组干酪流动性和熔融性更好。以上结果表明,地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶所制干酪机械性能优于商品凝乳酶所制干酪,商品凝乳酶所制干酪质地更硬且蛋白网络结构更为致密。

摘要： 以实验室自制黄粉虫凝乳酶(Tenebrio molitor rennet,TMR)为对象,研究不同温度对TMR凝乳行为和水解特性的影响,并通过傅里叶红外光谱和激光共聚焦显微镜表征凝乳的结构。结果表明,随温度的升高,TMR凝乳的持水力显著增大(P0.05);二级结构和微观结构表明,45°C时TMR凝乳的柔韧性、稳定性和致密性最好。与商品凝乳酶(commercial rennet,CR)相比,TMR凝乳的持水力、乳清OD值在45°C逐渐趋于稳定,凝乳粒径显著大于CR凝乳,形成连续不规则且较为致密的网状结构,凝乳性能较好。因此,45°C可作为TMR的最佳凝乳温度。本研究可为新型昆虫凝乳酶的开发及其应用提供理论依据和参考。

摘要： 利用地衣芽孢杆菌凝乳酶制作切达干酪和切达干酪类似物,分析干酪成熟过程中各蛋白水解指标的变化规律,以揭示地衣芽孢杆菌凝乳酶对切达干酪成熟过程中蛋白水解的影响。结果表明,C_(DF)组(添加地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶所制切达干酪)、C_(D3)组(添加地衣芽孢杆菌D3.11凝乳酶但未添加发酵剂制成的干酪类似物)和C_(CF)组(添加商品凝乳酶所制切达干酪)干酪蛋白含量、pH 4.6-可溶性氮、12%三氯乙酸-可溶性氮、5%磷钨酸-可溶性氮、总游离氨基酸含量均随着成熟时间延长呈显著增加趋势,并且成熟期间C_(DF)组干酪均显著高于C_(CF)组干酪(P<0.05);十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳分析表明,C_(DF)组干酪α-酪蛋白水解程度较大;pH 4.6-可溶性肽段分析表明,随着干酪的成熟,总肽含量呈先增加后下降趋势,但疏水性肽与亲水性肽的比值呈持续下降趋势,在成熟第6个月时,C_(DF)组、C_(D3)组和C_(CF)组干酪疏水性肽与亲水性肽比值分别为2.668、2.822、3.788。主成分分析表明,3组干酪的蛋白水解程度与成熟度呈正相关,与疏水性肽和亲水性肽的比值呈负相关。以上结果表明,利用地衣芽孢杆菌凝乳酶制作的干酪蛋白水解度更高,但其疏水性肽比例较小,研究结果可为地衣芽孢杆菌凝乳酶在干酪生产中的应用提供理论依据。

摘要： 据澳新食品标准局(FSANZ)消息,2021年11月15日,澳新食品标准局发布178-21号通知,其中A1244号申请,申请将来自转基因里氏木霉的凝乳酶(Chymosin)作为加工助剂。据通知,该凝乳酶用于某些乳制品的生产中。[信息来源]食品伙伴网.澳新拟批准一种来自转基因里氏木霉的凝乳酶作为加工助剂[EB/OL].(2021-11-16).http://news.foodmate.net/2021/11/612108.html。

摘要： 为探究解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶制备的羊奶干酪(干酪B)成熟特性的变化,以采用商业凝乳酶和同批次羊奶制作的干酪(干酪A)为对照组,比较两组干酪在60d成熟期主要组分、质构特性、微生物指标及风味物质的变化。结果表明,两组干酪得率相差不大。成熟期间干酪的水分、蛋白质及脂肪含量呈先上升后下降趋势,干酪B始终高于干酪A;干酪游离氨基酸总量在成熟期间呈先下降后上升趋势,且干酪B中苯丙氨酸、天冬氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、丝氨酸含量高于干酪A。成熟前期干酪B质构特性优于干酪A。干酪A成熟后乳酸乳球菌数量增加了(5.22±0.02)%,干酪B无显著变化(P>0.05)。成熟期内,两组干酪中挥发性风味物质种类和含量均增加,但干酪B中的壬酸、辛醇、2-庚酮、2-壬酮、二甲基砜使羊奶干酪风味独特、浓郁。因此,GSBa-1凝乳酶具备替代商业凝乳酶用于羊奶干酪生产的潜力,可对干酪风味的形成和品质的提升起到一定促进作用。

摘要： 本文重点介绍了凝乳酶的种类和凝乳机理,以及自制羔羊凝乳酶及其活力测定的方法,对引导我国家庭牧场和小型羊乳企业突破凝乳酶自制核心技术,创新开展羊奶酪生产研发,填补国产羊奶酪市场空白与丰富羊乳制品种类,具有重要的指导意义。

摘要： 为筛选较好的牛乳外泌体提取方法,分别采用凝乳酶辅助法、等电点辅助法及EDTA辅助法提取牛乳中的外泌体,并通过纳米追踪分析、透射电子显微镜(TEM)观察、Western blot等方法来比较所提外泌体的形态、大小及蛋白浓度。结果显示:凝乳酶辅助法所获得的外泌体粒径符合正常的外泌体粒子直径范围,且粒子浓度极显著高于另外2种方法所提取的外泌体(P<0.01);凝乳酶辅助法所提取的外泌体数量较多,且外泌体双层膜结构完整且明显,背景清晰,而其他2种方法提取的外泌体杂质较多;凝乳酶辅助法所提外泌体中含有的溶酶体相关膜蛋白(CD63)和肿瘤易感基因(TSG101)2种标志性蛋白表达量显著高于其他2组(P<0.01)。提示:利用凝乳酶预处理牛乳后再对其进行超速离心,可以获得纯度更高的外泌体,试验结果为深入研究外泌体提供了实践基础。

摘要： 我国奶酪产业前景广阔,而研制生产出适合国人口味的奶酪,无疑将会推动我国奶酪产业及整个乳业更快地发展,同时对畜牧业的发展也起到积极的促进作用.本文详细地介绍了奶酪的制作流程,以期为奶酪加工产业提供参考.

摘要： 我国奶酪产业前景广阔,而研制生产出适合国人口味的奶酪,无疑将会推动我国奶酪产业及整个乳业更快地发展,同时对畜牧业的发展也起到积极的促进作用。本文详细地介绍了奶酪的制作流程,以期为奶酪加工产业提供参考。

摘要： 本文主要对微小毛霉凝乳酶的酶学特性进行研究.结果表明,该微小毛霉凝乳酶的最适凝乳温度为65°C,35～45°C有较好的热稳定性;最适凝乳pH为5.0,pH为6.0时凝乳酶最稳定;最适底物质量分数为5％.Ca2+、Mg2+、Fe3+、Fe2+和Mn2+对凝乳酶活力有明显促进作用,且Mg2+、Mn2+和Ca2+的最适作用浓度为0.025 mol/L、0.025 mol/L和0.02 mol/L.Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+对凝乳酶活力有抑制作用,而Na+、K+、Li+对凝乳酶的活力作用不明显.此外,乙醇、SDS溶液可抑制凝乳酶活力,而β-巯基乙醇可促进凝乳酶活力.

摘要： 对分离自酒曲的一株解淀粉芽孢杆菌GSBa-1发酵所产的凝乳酶进行了研究,该酶凝乳活力高而蛋白水解活力低,纯酶凝乳活力可达1.46x106SU/g;使用该凝乳酶和商品凝乳酶制作马苏里拉干酪,并对干酪的理化成分,成熟过程中pH和微生物指标及干酪成熟前后质构、游离脂肪酸、可溶性蛋白、风味和性能等指标进行对比分析.结果显示,理化成分上菌株凝乳酶与商品凝乳酶制作的干酪相接近(p＜0.05).干酪在成熟过程中,发酵剂存活数先增加后减少,但其差异不大;菌株凝乳酶制作的干酪pH4.6可溶性蛋白含量较多,干酪的游离氨基酸总量(76mg/100g)也高于商品凝乳酶制作的干酪游离氨基酸总量(55.3mg/100g);菌株凝乳酶制作的干酪质构性均大于商品凝乳酶制作的干酪,电镜结果显示,菌株凝乳酶制作的干酪内部网状结构更充实;菌株凝乳酶具有稍强的蛋白水解能力,导致其制作的干酪风味物质的种类多于商品凝乳酶制作的干酪,风味物质更加丰富.干酪样品的保形性和拉丝性实验测定结果显示,两种凝乳酶制作的干酪性能差异不大(p＜0.05);对两种凝乳酶制作的干酪进行感官评定,其总得分相接近,以上结果表明,解淀粉芽孢杆菌GSBa-1凝乳酶能在一定程度上可以代替小牛凝乳酶应用于马苏里拉干酪的生产。

摘要： 本研究利用梯度稀释法和平板划线纯化法对酒曲中的微生物进行分离纯化,得到11株细菌和2株真菌,并采用酪蛋白平板法和Arima时间法筛选出了1株产凝乳酶的细菌菌株LB-51.通过形态学观察、生理生化实验、16S rDNA序列分析以及种间特异性基因分析鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).该菌在液体LB培养基中发酵72时产凝乳酶活力为431.53±15.89Su/mL,蛋白水解活力为5.05±0.59U/mL,所产凝乳酶凝乳活力高而蛋白水解活力低,凝乳酶粗酶单位酶活力为153846.16Su/g.LB-51菌是分离筛选自酒曲中的一株高产凝乳酶细菌,因此其来源安全,可作为工业化候选菌株进一步研究开发.

摘要： 首先通过单因素实验分析了不同碳源、氮源、金属盐、磷源对解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的影响,然后在此基础上采用Box-Behnken设计对葡萄糖、酵母粉和CaCO3三因素的最优组合进行了定量研究,建立并分析了各因素与凝乳酶活力关系的数学模型。结果表明，解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的最佳工艺条件：马铃薯浸粉0.5％，葡萄糖1.13％，酵母浸粉1.76％,CaCO3为0.32％(均为质量分数)，在此最佳培养基条件下，凝乳酶活力可达436.8SU/mL，与理论预测值438.4SU/m基本一致,优化后解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的活力比基础培养基提高了5.21倍。

摘要： 首先通过单因素实验分析了不同碳源、氮源、金属盐、磷源对解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的影响,然后在此基础上采用Box-Behnken设计对葡萄糖、酵母粉和CaCO3三因素的最优组合进行了定量研究,建立并分析了各因素与凝乳酶活力关系的数学模型.结果表明,解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的最佳工艺条件:马铃薯浸粉0.5％,葡萄糖1.13％,酵母浸粉1.76％,CaC03为0.32％(均为质量分数),在此最佳培养基条件下,凝乳酶活力可达436.8SU/mL,与理论预测值438.4SU/mL基本一致,优化后解淀粉芽孢杆菌产凝乳酶的活力比基础培养基提高了5.21倍.

摘要： 目的:构建小牛凝乳酶毕赤酵母分泌型表达载体,表达重组凝乳酶.方法:通过转换工具将小牛凝乳酶基因的氨基酸密码子转换成酵母偏好密码子,而后用全基因合成的方法获得小牛凝乳酶原的基因片段,将目的基因插入酵母表达载体pPIC9K结合因子分泌信号下游,得到重组载体.线性化后电转化毕赤酵母GS115,筛选并PCR鉴定重组酵母菌.阳性转化子经摇瓶表达,取上清沉淀后做SDS-PAGE分析并检测凝乳酶的活力,通过检测阳性转化子产凝乳酶的活力.结果:经测序及PCR证实,具酵母偏好密码子的凝乳酶基因准确插入酵母表达载体pPIC9K中,转化后重组载体通过同源重组整合进入酵母基因组中.SDS-PAGE分析证明凝乳酶的分子量约为35kD,测得培养基中凝乳酶的酶活为7.6SU/ml.结论:成功构建出酵母表达载体pPIC9K-rennin,在培养基中获得分泌表达的有活性的重组凝乳酶.

摘要： 本文主要建立了凝乳酶活性测定方法,并考察了温度、pH值、Ca2+浓度对凝乳酶活性的影响,并提出了凝乳酶、温度、pH值、Ca2+浓度在牛乳酶凝乳过程中的作用,从而更好地优化牛乳酶凝乳条件.

摘要： 凝乳酶是干酪生产中的关键性酶。它对干酪的质构形成及特有风味的形成有非常重要的作用。随着干酪工业的不断发展，传统来源的凝乳酶已远不能满足生产需要，各国研究者不断地寻找新的来源。霉菌MJ229是从我国传统食品江米酒酒醪中筛选得到的一株凝乳酶高产菌株。本论文对霉菌MJ229固态发酵物中凝乳酶的提取工艺进行了研究，分别研究了提取时间、食盐浓度、提取温度、次数对固态发酵液中凝乳酶提取效果的影响。结果表明，霉菌MJ229固态发酵中凝乳酶在温度40°C条件下，用0.3moL/L的Nacl溶液提取20min，提取3次的效果为最好。

摘要： 凝乳酶是干酪生产中的关键性酶，随着世界干酪工业的不断发展，传统来源的凝乳酶已远不能满足生产需要，各国研究者不断地寻找新的来源。MJ229是从我国传统食品江米酒酒醪中筛选得到的一株凝乳酶高产菌株。本实验利用截留分子量为60kDa和6kDa的中空纤维超滤膜对MJ229固态发酵物中凝乳酶的浸提液进行浓缩，浸提液体积被浓缩了15.6倍，凝乳酶纯化倍数达2.15倍，活力回收率为82.6％。进一步通过SephadexG-100纯化，得到电泳纯的凝乳酶，活力为2200.0U/mg，同时测得其分子量为35kDa。

摘要： 微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶是微生物凝乳酶的主要来源之一，但与传统的牛凝乳酶相比，尚具有一定的缺陷。为将其采用基因工程的方法进行改造获得理想的凝乳酶，本研究克隆了微小毛霉凝乳酶基因，构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115，在甲醇诱导下进行凝乳酶的表达，SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为47 kD，培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8SU/mL。本研究首次应用毕赤酵母表达微小毛霉凝乳酶，在培养基中获得分泌表达的重组凝乳酶。

摘要： 利用响应面分析法优化微小毛霉的发酵培养基，提高微小毛霉凝乳酶的凝乳活力。在单因素试验的基础上，用Design-Expert软件对试验数据进行多元回归分析，建立了3种因素与凝乳酶活力之间的函数关系，得出在基础发酵培养基中加入的氯化钙、乳清粉和葡萄糖的最佳浓度分别为0.58％、0.64％和1.13％，在该最佳培养条件下，微小毛霉凝乳酶的凝乳活力的理论值为1150.81SU/ml，验证平均值为1109.7SU/ml，与预测值基本一致。

摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种高产凝乳酶的方法及其所产凝乳酶。本发明提供一株微小毛霉菌株具体为微小毛霉(Mueor pusillus)GHM356，保藏编号为CGMCC No.14136。本发明还公开了利用该菌株生产凝乳酶的工业生产方法，用该菌株经种子培养和液体深层发酵可使发酵液酶活达到272000U/mL以上，经提取制得的凝乳酶产品，成品低廉，凝乳酶酶活力较高，蛋白酶活力低，稳定性好、专一性强，其最适反应温度明显低于其他来源的凝乳酶，在适合乳酸菌生长的温度条件下可以保持较高的酶活性，热稳定性较差，在较低的温度条件下就可以除去乳清中残存的凝乳酶，有利于乳清的再次利用，比其他来源的凝乳酶更加适用于干酪的生产行业。

摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一株高产凝乳酶的微小毛霉突变菌株及生产凝乳酶的方法。所述微小毛霉菌株具体为微小毛霉(Mueor pusillus)GHM356，保藏编号为CGMCC No.14136。本发明还公开了利用该菌株生产凝乳酶的工业生产方法，用该菌株经种子培养和液体深层发酵可使发酵液酶活达到272000U/mL以上，经提取制得的凝乳酶产品，成品低廉，凝乳酶酶活力较高，蛋白酶活力低，稳定性好、专一性强，其最适反应温度明显低于其他来源的凝乳酶，在适合乳酸菌生长的温度条件下可以保持较高的酶活性，热稳定性较差，在较低的温度条件下就可以除去乳清中残存的凝乳酶，有利于乳清的再次利用，比其他来源的凝乳酶更加适用于干酪的生产行业。

摘要： 具有提高的凝乳特性的凝乳酶变体。

摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一种高产凝乳酶的方法及其所产凝乳酶。本发明提供一株微小毛霉菌株具体为微小毛霉(Mueor pusillus)GHM356，保藏编号为CGMCC No.14136。本发明还公开了利用该菌株生产凝乳酶的工业生产方法，用该菌株经种子培养和液体深层发酵可使发酵液酶活达到272000U/mL以上，经提取制得的凝乳酶产品，成品低廉，凝乳酶酶活力较高，蛋白酶活力低，稳定性好、专一性强，其最适反应温度明显低于其他来源的凝乳酶，在适合乳酸菌生长的温度条件下可以保持较高的酶活性，热稳定性较差，在较低的温度条件下就可以除去乳清中残存的凝乳酶，有利于乳清的再次利用，比其他来源的凝乳酶更加适用于干酪的生产行业。

摘要： 本发明属于生物工程领域，具体涉及一株高产凝乳酶的微小毛霉突变菌株及生产凝乳酶的方法。所述微小毛霉菌株具体为微小毛霉(Mueor pusillus)GHM356，保藏编号为CGMCC No.14136。本发明还公开了利用该菌株生产凝乳酶的工业生产方法，用该菌株经种子培养和液体深层发酵可使发酵液酶活达到272000U/mL以上，经提取制得的凝乳酶产品，成品低廉，凝乳酶酶活力较高，蛋白酶活力低，稳定性好、专一性强，其最适反应温度明显低于其他来源的凝乳酶，在适合乳酸菌生长的温度条件下可以保持较高的酶活性，热稳定性较差，在较低的温度条件下就可以除去乳清中残存的凝乳酶，有利于乳清的再次利用，比其他来源的凝乳酶更加适用于干酪的生产行业。

摘要： 本发明公开了一种凝乳酶贮藏方法及可常温贮藏的凝乳酶液。所述贮藏方法包括以下步骤：取CaCl2加入凝乳酶液中混合，所述凝乳酶液由保藏编号为CGMCC？No.8333的类芽孢杆菌BD3526发酵液上清中提取得到。所述凝乳酶液包括CaCl2和凝乳酶，所述凝乳酶由BD3526发酵液上清中提取得到。本发明所述的凝乳酶的贮藏方法简单易行，首次实现了在常温范围内，对类芽孢杆菌所产凝乳酶活性的保护；本发明提供的可常温贮藏的凝乳酶液适合常温贮藏，便于工厂化实际操作，且实施效果显著，有效提高了类芽孢杆菌BD3526产的凝乳酶酶活保留率，为在常温条件下保存通过类芽孢杆菌发酵制备的凝乳酶制剂提供了可行性。

摘要： 本发明提供了具有改善的凝乳性质的凝乳酶变体，其制备方法，以及将其用于食品或饲料产品制造的方法。

摘要： 具有提高的凝乳特性的凝乳酶变体，及其制备方法。所述凝乳酶变体在具有凝乳酶活性的亲本多肽中的一个或更多个位置处产生改变，其中所述改变包含在至少一个氨基酸位置的替换，所述至少一个氨基酸位置对应于以下任意位置：77；154；156；212；224；256和367。所述凝乳酶变体具有提供更高C/P比的凝乳酶活性。

摘要： 具有改善的凝乳特性的凝乳酶变体。

摘要： 具有改善的凝乳特性的凝乳酶变体。