HOTAIR

摘要： 目的探讨姜黄素对肺癌细胞A549上皮间质转化的影响。方法姜黄素诱导肺癌细胞A54924 h,CCK-8法检测A549细胞活性,Transwell实验检测A549细胞迁移、侵袭的能力,Western blotting检测上皮间质转化标志蛋白的相对表达量,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HOTAIR、E-cadherin、N-cadherin及Snail mRNA的相对表达量,测序方法检测姜黄素诱导后lncRNA表达的变化,实验验证介导姜黄素发挥作用的具体非编码RNA,分析HOTAIR与临床病理参数之间的关系。结果CCK-8法检测结果显示,姜黄素诱导肺癌细胞A54924 h后,不同浓度组肺癌细胞A549的OD值比较,差异有统计学意义(P<0.05),随着姜黄素浓度的升高,OD值降低。Transwell结果显示,姜黄素诱导肺癌细胞A54924 h后,姜黄素诱导组抑制肺癌细胞A549的侵袭、迁移,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blotting和qRT-PCR检测结果显示,姜黄素诱导组的间质表型基因和蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Snail)与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),N-cadherin、Snail相对表达量下降,E-cadherin相对表达量升高。癌旁正常组和肺癌组中HOTAIR的相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05),肺癌组高于癌旁正常组。测序检测和qRT-PCR结果显示,姜黄素抑制HOTAIR的表达。分析HOTAIR在肺癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系显示,HOTAIR的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移密切相关。对照组、姜黄素诱导组、姜黄素诱导+HOTAIR过表达组A549细胞OD值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素有效抑制肺癌细胞A549的增殖、侵袭及迁移,姜黄素抑制lncRNA HOTAIR表达,姜黄素抑制肺癌细胞A549上皮间质转化是通过HOTAIR实现的。

摘要： HOTAIR是第一个被发现具有反式作用的lncRNAs,多种肿瘤的发生、发展与其异常表达密切相关,本文就HOTAIR在肿瘤发展及在药物治疗中的作用进行综述。

摘要： 目的研究HOX transcript antisense RNA(HOTAIR)通过靶向miR-513c-5p调控乳腺癌增殖的作用及机制。方法选取来自蚌埠医学院第一附属医院2020年6—12月间女性患者乳腺癌和癌旁组织各40例,应用real-time PCR方法检测癌组织和癌旁组织中HOTAIR和miR-513c-5p表达并分析其表达的相关性。沉默MCF-7细胞中HOTAIR表达建立不同HOTAIR沉默水平的sh-HOTAIR-1组和sh-HOTAIR-2组,感染空载体作为对照组。应用real-time PCR方法检测MCF-7细胞中HOTAIR和miR-513c-5p表达并分析其表达的相关性,CCK-8法分析sh-HOTAIR-1组和sh-HOTAIR-2组细胞24,48,72 h体外增殖的变化,应用流式细胞方法分析细胞周期的变化,通过蛋白印迹法(Western blot)分析细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4/6蛋白表达。将miR-513c-5p抑制物转染至沉默sh-HOTAIR-2的MCF-7细胞,观察miR-513c-5p抑制物对HOTAIR沉默后MCF-7细胞增殖、细胞周期及相关蛋白表达调控的影响。结果与癌旁组织相比,乳腺癌组织HOTAIR表达显著上调,miR-513c-5p表达显著下调,二者成负相关(r=-0.5498,P<0.05)。与对照组比较,sh-HOTAIR-1组和sh-HOTAIR-2组MCF-7细胞中miR-513c-5p表达显著上调,MCF-7细胞体外增殖水平均显著下调,细胞周期G2/M期显著上调,CDK4/6蛋白和mRNA表达显著下调(均P<0.05)。与sh-HOTAIR-2组相比,sh-HOTAIR-2+miR-513c-5p抑制组中MCF-7细胞体外增殖显著上调,细胞周期G2/M期显著下调,CDK4/6蛋白和mRNA表达显著上调(均P<0.05)。结论HOTAIR在乳腺癌中高表达,可促进肿瘤细胞体外增殖,可能与抑制miR-513c-5p表达有关。

摘要： 目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)HOTAIR在胰腺癌细胞系(AsPC-1和Panc-1)中的表达,分析其对细胞增殖、迁移生物学能力的影响。方法体外培养人胰腺癌细胞系(Panc-1、AsPC-1),利用qRT-PCR技术检测lncRNA HOTAIR在胰腺癌细胞中的表达水平,并通过基因转染上调或下调HOTAIR的表达,观察HOTAIR对胰腺癌细胞增殖、迁移能力的影响。结果 HOTAIR过表达对AsPC-1细胞增殖能力影响较弱,但可促进Panc-1细胞增殖;HOTAIR过表达对两种细胞迁移均有促进作用。HOTAIR敲低抑制两种胰腺癌细胞增殖,并抑制两种胰腺癌细胞的迁移能力。结论 HOTAIR可增强胰腺癌细胞增殖、迁移的能力,提示HOTAIR可能与胰腺癌的进展和预后相关。

摘要： 目的探讨长链非编码RNA (LncRNA) HOTAIR对乳腺癌细胞放疗敏感性的影响及其机制。方法检测乳腺癌组织、癌旁组织及常用乳腺癌细胞株中HOTAIR的表达情况,选取HOTAIR表达较低的SKBR3细胞株作为研究对象。通过慢病毒转染构建过表达HOTAIR乳腺癌细胞株。经放疗后,采用CCK-8实验、Transwell小室实验检测过表达HOTAIR乳腺癌细胞放疗前后的增殖和侵袭能力的变化情况。采用Western blot技术检测HOTAIR对自噬信号通路中Beclin1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和m TOR、p-m TOR等蛋白表达的影响。结果乳腺癌组织中的HOTAIR表达高于癌旁组织(P 0.05)。结论 HOTAIR过表达提高了放疗后乳腺癌SKBR3细胞株的活力及侵袭能力,HOTAIR过表达能增强乳腺癌SKBR3细胞放射抵抗性。其机制可能与通过调控m TOR信号通路增强乳腺癌细胞自噬水平有关。

摘要： 宫颈癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一,也是女性癌症死亡的第二大常见原因。放射治疗可在宫颈癌患者的所有阶段进行。辐射抗性是肿瘤放射治疗中的关键问题。因此,研究宫颈癌放射治疗过程中DNA损伤修复相关基因,有利于寻找新的治疗靶点以进一步提高宫颈癌放疗疗效。

摘要： 乳腺癌是女性中与癌症相关死亡的第二大主要原因,三阴性乳腺癌因其复发和转移率高且对内分泌及靶向治疗不敏感,一直是乳腺癌治疗的难题.因此,要想提高诊疗和预后,了解三阴性乳腺癌的特征及现状至关重要.在过去的几年中,HOX转录反义RNA(HOX transcript antisense RNA,HOTAIR)作为肿瘤疾病相关的潜在关键角色,它的出现已经引起了普遍关注,该长链非编码RNA的过表达通过不同的分子机制促进了乳腺癌的进展.本文就HOTAIR与三阴性乳腺癌的相关研究进行综述.

摘要： 骨关节炎是一种以关节软骨损伤为中心特征的老年退行性病变,随着人口老龄化的加重,骨关节炎的致残率也逐年上升。骨关节炎的发病机制尚不清楚,传统的治疗方案也无法阻止关节炎的进展,只能进行手术治疗。近年来,随着研究的深入,学者们发现,关节炎软骨细胞中长链非编码RNA(lncRNA)表达水平的变化与骨关节炎的发生和发展有很大关联,其中以HOTAIR的表达量差别较大。HOTAIR在关节软骨细胞中的表达上调,促进关节软骨基质的降解、软骨细胞的凋亡,相反,如果沉默HOTAIR可以控制基质的降解,减少细胞的凋亡,然而对于HOTAIR的研究目前仍不完善,仍需进一步研究。

摘要： 目的 构建稳定过表达HOTAIR的人滋养细胞HTR-8/SVneo细胞系,并验证HOTAIR的表达.方法 利用PCR技术扩增HOTAIR基因全长序列,并将其克隆入LV5载体中,构建LV5-HOTAIR载体,重组质粒经双酶切鉴定及测序验证成功后,转染人胚肾细胞293T,包装过表达病毒颗粒,制备并浓缩慢病毒颗粒.将构建好的过表达HOTAIR慢病毒载体感染HTR-8/SVneo细胞,采用嘌呤霉素筛选出HO-TAIR稳定表达的细胞系,荧光显微镜观察绿色荧光表达;qRT-PCR验证HOTAIR表达.结果 重组质粒酶切得到的条带与预期相符,过表达HOTAIR慢病毒载体中序列与目标序列一致.荧光显微镜下过表达HOTAIR组细胞有绿色荧光表达;qRT-PCR结果表明过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR表达是Control组的206.3倍(P<0.05),是NC组的232.8倍(P<0.05).结论 成功建立稳定过表达HOTAIR的HTR-8/SVneo细胞,且过表达HOTAIR的HTR-8/Svneo稳定细胞株中HOTAIR mRNA表达水平明显升高.

摘要： 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOTAIR对乳腺癌细胞放疗敏感性的影响及其机制.方法 检测乳腺癌组织、癌旁组织及常用乳腺癌细胞株中HOTAIR的表达情况,选取HOTAIR表达较低的SKBR3细胞株作为研究对象.通过慢病毒转染构建过表达HOTAIR乳腺癌细胞株.经放疗后,采用CCK-8实验、Transwell小室实验检测过表达HOTAIR乳腺癌细胞放疗前后的增殖和侵袭能力的变化情况.采用Western blot技术检测HOTAIR对自噬信号通路中Beclin1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ和mTOR、p-mTOR等蛋白表达的影响.结果 乳腺癌组织中的HOTAIR表达高于癌旁组织(P0.05).结论 HOTAIR过表达提高了放疗后乳腺癌SKBR3细胞株的活力及侵袭能力,HOTAIR过表达能增强乳腺癌SKBR3细胞放射抵抗性.其机制可能与通过调控mTOR信号通路增强乳腺癌细胞自噬水平有关.

摘要： 本发明公开了一种HOTAIR‑PRC2阻断剂及其复合制剂在制备治疗子宫内膜癌药物中的用途。本申请提供了HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂及将其与EZH2抑制剂联用均能够抑制子宫内膜癌的进展，尤其是将HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂及EZH2抑制剂联合应用，可以增效EZH2抑制剂在子宫内膜癌中的治疗效果，降低EZH2抑制剂的抗肿瘤用药剂量。本申请提供的含有HOTAIR‑PRC2特异性阻断剂和EZH2抑制剂的复合制剂可有效抑制肿瘤的增殖，侵袭和迁移，改善肿瘤免疫微环境，为子宫内膜癌的治疗提供了新的治疗思路。

摘要： 本发明公开了一种放射性核素99mTc标记的LncRNAHOTAIR靶向探针、制备方法以及显像剂，属于核素标记和分子显像技术领域。所述靶向探针的反义寡核苷酸序列为序列1，所述靶向探针的合成结构为5′‑ASON‑(CH2)6‑NH2‑3′；其中，所述序列1的两端分别以2′甲基化修饰，所述序列2的两端各以两个碱基硫代修饰；3′端连上一个伯胺结构，所述伯胺结构中的NH2与所述序列1的骨架之间以(CH2)6作为连接子。由于ASON可以高效、特异、不可逆的与靶目标互补结合，所以通过该LncRNAHOTAIR靶向探针，可以及时且准确地反应出癌症的检测结果。

摘要： 本发明发现了lncRNA‑HOTAIR在骨质疏松症中作用，lncRNA‑HOTAIR是一种长链非编码RNA，长度为2158nt，该长链非编码RNA可直接用于制备检测、预防和/或治疗骨质疏松疾病的试剂或者药物。

摘要： 本发明公开了一种用于辅助诊断结直肠癌（CRC）的长链非编码RNA标志物，所述的长链非编码RNA为HOTAIR，检测其表达量可应用于结直肠癌辅助诊断或预测病情的发展，监测p21的表达情况可预测结直肠癌的分化、浸润深度、增生和转移情况，具有判断预后的价值。可通过RT‑qPCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交、芯片或高通量测序平台检测LncRNA HOTAIR基因的表达水平，同时还公开了沉默HOTAIR能显著抑制CRC细胞的增殖、迁移能力、侵袭能力，降低PCNA、Ki67、cyclin E、CDK2的表达，并且可介导p21的表达增加。本发明提供了一种结直肠癌的分子标记物，为结直肠癌的机制研究以及临床个体化治疗提供理论基础，通过对LncRNA HOTAIR在CRC中表达的监测可以为临床治疗CRC提出了一种新的治疗策略。

摘要： 本发明公开了一种Hotair小分子抑制剂及在制备治疗肿瘤药物中的应用，属于含有机有效成分的医药配置品领域。本发明Hotair小分子抑制剂的化学名称为7‑氮‑2‑[4‑(7‑氮‑3‑氧‑4,9‑二氢呋喃[3,2‑b]喹喔啉‑2‑基)苯基]‑4,9‑二氢呋喃[3,2‑b]喹喔啉‑3‑酮，分子量为540。其能特异性的抑制Hotair的5’端与PRC2中的EZH2蛋白结合；在U87细胞中有效的抑制EZH2入核；小鼠体内实验中其有效抑制乳腺癌肿瘤模型的生长和肺转移。本发明小分子抑制剂能应用于制备治疗肿瘤药物中，对肿瘤发生、发展和治疗的研究具有重大的临床意义，具有广阔的应用前景。

摘要： 本发明公开了一种用MspI鉴定人HOTAIR基因多态性rs920778的方法，抽提样品的基因组DNA；提供扩增人HOTAIR基因多态性rs920778位点附近序列的正向引物和反向引物，以所述待测人基因组DNA为模板，进行PCR扩增反应，获取扩增产物；使用限制性内切酶对所述扩增产物进行酶切，获取相应的酶切产物；将酶切产物采用3％的琼脂糖凝胶进行电泳，以判定HOTAIR基因多态性rs920778的各基因型。本发明建立的HOTAIR？rs920778多态性的检测方法，内切酶价格十分便宜，同时PCR产物纯度较高，酶切结果易于分辨。该检测方法通过测序验证，其结果准确可靠。

摘要： 本发明公开靶向抑制HOTAIR的小RNA在制备抗前列腺癌药物中的应用。编码HOTAIR基因的DNA序列位于12号染色体的HOXC11基因与HOXC12基因之间。HOTAIR是长度为2158nt、迭接的多聚核苷酸转录产物。编码HOTAIR的序列中包括5个短外显子和1个长外显子。本发明包含多种序列的siRNA，这些小RNA能通过靶向下调前列腺癌细胞中HOTAIR基因的表达，诱导细胞周期阻滞，抑制细胞侵袭迁移能力，进而可以应用于前列腺癌药物的制备。本发明siRNA制备简单，成本低，用量少，50nM的转染浓度即可达到良好的抑制效果，抑制作用确切；且siRNA抑制基因表达不会破坏基因组的完整性。