免疫反应性

摘要： 为获得番鸭细小病毒(muscovy duck parvovirus,MDPV)重组结构蛋白VP2、VP3,本研究以含有MDPV YL08株VP1基因的重组载体pET-32a-VP1为PCR扩增模板,分别亚克隆VP2、VP3基因。构建了重组载体pGEX-6p-VP2、pGEX-6p-VP3并将它们转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)中,分别构建了重组菌株pGEX-6p-VP2/Rosetta(DE3)和pGEX-6p-VP3/Rosetta(DE3)。2种重组菌株在IPTG诱导下分别获得了重组蛋白GST-VP2和GST-VP3,分子质量分别为91、86 ku。Western blot分析结果表明,重组蛋白GST-VP2和GST-VP3可特异性结合GST-tag单克隆抗体和MDPV感染番鸭血清,免疫反应性良好。Dot-ELISA比较分析结果表明,在等质量条件下,GST-VP2的免疫反应性强于GST-VP3。

摘要： 为研究鸡毒支原体(MG)的可变脂蛋白血凝素(VLHA)的生物学功能,对VLHA 3.03蛋白进行原核表达,然后进行了免疫原性和免疫反应性分析。通过Overlap PCR方法对MG Rlow株的vlha 3.03基因进行点突变扩增,将突变成功的vlha 3.03基因全长与原核表达载体pCold Ⅰ连接,连接产物转入大肠杆菌BL21进行诱导表达和纯化。用纯化后的重组蛋白rVLHA3.03免疫新西兰大白兔,制备兔多克隆抗体,并用ELISA检测抗体效价,再用制备的兔多克隆抗体、MG不同分离株阳性鸡血清及MS标准阳性血清分别与rVLHA3.03蛋白进行Western blot反应,分析rVLHA3.03蛋白的免疫原性和免疫反应性。结果表明,在大肠杆菌BL21中成功表达rVLHA3.03蛋白,且该蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性。

摘要： 用KLH偶联合成细胞角蛋白7(CK7)优势表位多肽片段(C14)免疫小鼠,经细胞融合技术制备CK7单克隆抗体(mAb),并收集临床组织进行免疫组化鉴定。C14多肽作为抗原具有良好的免疫反应性。本研究共获得了3株能稳定分泌抗CK7抗体的单克隆细胞株,选择亲和力较好的7A8单克隆抗体进行免疫组化鉴定,结果表明,本研究筛选的7A8单克隆抗体的质量浓度为0.49μg/mL时,与收集的临床标本均有良好的特异性反应,低于医院常用CK7检测试剂盒中抗体质量浓度2~5μg/mL,表现出较高的灵敏度。本研究筛选的7A8单克隆抗体为研发CK7快速诊断试剂提供了关键的原材料。

摘要： 肾移植是终末期肾脏疾病最有效的治疗方式,虽然免疫抑制药物的应用显著提高了移植肾的短期存活率,但是慢性排斥反应的发生发展,其长期存活率仍较低。此外,患者长期服用免疫抑制药物不仅增加了罹患感染性疾病、恶性肿瘤及骨髓抑制的风险[1],还加重了患者的经济负担。免疫耐受是指在机体内免疫系统对某种特定的抗原无免疫反应性,其不仅能够提升移植物的存活周期,大大降低甚至避免免疫抑制药物的使用,同时受者也具有正常的抵抗外界病原微生物入侵的能力[2]。国内外很多学者致力于移植免疫耐受发生机制和诱导移植肾免疫耐受等方面的研究,现予以综述。

摘要： 牛乳、羊乳酪蛋白是乳及其制品中主要的致敏蛋白之一,两者的组成和结构有所差异,所以对热加工下二者的氧化修饰和免疫反应性进行了比较研究.测定牛羊乳酪蛋白侧链基团巯基含量和羰基含量来分析酪蛋白氧化修饰;用圆二色谱、紫外光谱及疏水性变化来探究热加工下牛羊乳酪蛋白抗原表位结构的影响;采用间接ELISA法及体外模拟胃肠消化来分析牛羊乳酪蛋白免疫反应性的变化.结果表明:63°C低温长时巴氏杀菌、75°C高温短时巴氏杀菌和100°C家庭煮沸,牛羊乳酪蛋白二级结构未被破坏;134°C超高压灭菌,牛羊乳酪蛋白天然结构被破坏.不同热加工处理后,牛羊乳酪蛋白巯基含量减少,羰基含量增加,且羊乳酪蛋白比牛乳更易受温度影响而氧化;与牛乳相比,经不同热加工后再经胃肠消化,羊乳酪蛋白更有利于消化水解且免疫反应性也较低.

摘要： 通过免疫学方法研究了高温高压处理后花生主要致敏蛋白Ara h1溶解性和免疫反应性的变化.结果表明:高温高压处理可使Ara h1及花生蛋白粗提物均发生显著变性和分解,以135 °C处理最为显著;但Ara h1在121和135 °C处理20 min后均表现出良好的热稳定性,可溶性蛋白含量不再随处理时间延长而发生明显减小;135 °C处理20 min或更长时间后样品中15 kDa左右或更小分子量的蛋白片段成为分解物的主要组成部分.高温高压处理可使Ara h1的免疫反应性显著下降,且在蛋白粗提物的混合体系中更为显著:135 °C处理20和60 min后,Ara h1的IgG结合能力分别仅为对照的1/3和1/6;而在混合体系中,相同条件下Ara h1的IgG结合能力分别仅为对照的2/9和1/9.

摘要： 牛乳、羊乳酪蛋白是乳及其制品中主要的致敏蛋白之一,两者的组成和结构有所差异,所以对热加工下二者的氧化修饰和免疫反应性进行了比较研究.测定牛羊乳酪蛋白侧链基团巯基含量和羰基含量来分析酪蛋白氧化修饰;用圆二色谱、紫外光谱及疏水性变化来探究热加工下牛羊乳酪蛋白抗原表位结构的影响;采用间接ELISA法及体外模拟胃肠消化来分析牛羊乳酪蛋白免疫反应性的变化.结果表明:63°C低温长时巴氏杀菌、75°C高温短时巴氏杀菌和100°C家庭煮沸,牛羊乳酪蛋白二级结构未被破坏;134°C超高压灭菌,牛羊乳酪蛋白天然结构被破坏.不同热加工处理后,牛羊乳酪蛋白巯基含量减少,羰基含量增加,且羊乳酪蛋白比牛乳更易受温度影响而氧化;与牛乳相比,经不同热加工后再经胃肠消化,羊乳酪蛋白更有利于消化水解且免疫反应性也较低.

摘要： [目的]探讨两种不同纯度的双拷贝抑制素真核融合表达质粒pcISI(由抑制素α1-32基因与乙肝表面抗原(HbsAg)基因构建)免疫对黄牛的抗体P/N值、抗体阳性率和黄体发育的影响。rn [方法]本试验将四种不同剂量(0.75mg、1.5mg，2.25mg、3.0mg)的高纯度抑制素融合质粒pcISI和四种不同剂量(0.75mg、1.5mg，2.25mg、3.0mg)的低纯度的抑制素融合质粒pcISI免疫南阳黄牛。21天后加强免疫。rn [结果]高纯度pcISI(OD260/OD280介于1.8-2.0)的免疫效果略高于低纯度组(OD260/OD280介于1.7-1.8和2.0-2.1)(P＞0.05)。高纯度质粒组黄体略大于低纯度组(P＞0.05)。2.25mg抑制素融合表达质粒组的抗体P/N值和抗体阳性率明显高于0.75mg组(P＜0.05)。抗本阳性牛两侧黄体比抗体阴性牛大，且右侧差异显著(P＜0.05)。rn [结论]质粒纯度不影响双拷贝抑制素α1-32基因与乙肝表面抗原(HbsAg)基因构建的抑制素真核融合表达质粒pCISI免疫黄牛的免疫反应性和黄体发育能力。

摘要： 霉菌毒素被认为是对人类和动物的健康一个重要的危险因子,其中单端孢霉毒素被认为危害最为严重的霉菌毒素之一.呕吐毒素(DON)和其他B型单端孢(TCTB)可诱发肠道病理病变,对肠上皮细胞的完整性造成破坏,进而改变肠道屏障功能,并且DON和TCTB也可影响肠上皮免疫细胞产生免疫因子,抑制肠道上皮的免疫反应.本文在国内外已有的研究基础上,就呕吐毒素和其他B型单端孢霉烯毒素对肠道影响研究进展进行了综述.肠黏膜是天然毒素中遇到的第一个生物屏障。DON和其他TCTB毒素可诱导人类和动物肠道病变，也能扰乱肠道屏障功能，进而导致病原体迁移和肠道传染病易感性增加。DON调节肠道茹膜的免疫反应性，并对炎症性疾病起到诱发因素。对于未来的一个重要的研究领域将涉及DON和其他TCTB对肠道菌群的影响。另外，DON和其他TCTB对肠道的影响研究了不同物种，包括人类、试验动物、家禽和猪，但对啮齿动物的肠道的影响数据很少。今后的研究动物模型也可以放到啮齿动物上。

摘要： 目的:应用生物信息学技术对人类巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)分子进行抗原表位预测,构建并表达具有多表位的重组融合蛋白并进行免疫原性鉴定.rn 方法:GenBank中查询HCMV氨基酸序列,利用BepiPred、ABCpred、BcePred、PREDICTED四种在线表位预测软件进行细胞表位预测,筛选出可能的抗原决定簇表位,构建、原核表达,并利用免疫印迹实验筛选出可用的表位抗原,原核表达出融合蛋白,用Western Blot和ELISA检测其抗原性.rn 结果:综合预测分析结果,得出13种可能的表位,构建出pET32a原核表达载体,表达并纯化这13种表位的融合蛋白,经免疫印迹技术筛选出gp52、GB3、PP150-1、GB-5具有较强的抗原性表位,通过Ni2+亲和柱纯化,对gp52融合蛋白免疫印迹试验结果表明,蛋白抗原性较强;ELISA法鉴定具有较高的抗原性及特异性.rn 结论:在原核表达系统中能获得高效表达,纯化的融合蛋白具有较强的免疫反应性,对后期建立人HCMV免疫检测试剂提供了可能性.

摘要： 目的:高效表达HIV-1型截短基因片段，满足HIV体外检测试剂生产的需要。方法:将HIV-1型gp41部分外膜基因进行优化，利用DNA重组技术将片段基因插入到表达质粒E1，使其在大肠杆菌BL21DE3中表达。重组蛋白经纯化后双抗原夹心ELISA检测HIV-1型抗体阳性血清和HIV抗体阴性血清。结论:所克隆的基因片段获得高效表达，经测定具有较好的敏感性和特异性，可用于HIV体外检测试剂的生产。

摘要： 目的:对亚洲带绦虫膜联蛋白B2(Annexins B2)进行克隆表达及免疫学初步研究。rn 方法:利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出含有Annexins B2基因，并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中，在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达，表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定，重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化，纯化的重组蛋白用蛋白印迹(Western blotting)进行免疫学分析。rn 结果:PCR，双酶切及DNA测序均显示重组体构建成功，并得到高纯度的蛋白，且该重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫及牛带绦虫病人血清识别，表明其具有免疫反应性。rn 结论:亚洲带绦虫成虫Annexins B2基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达，为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。

摘要： 抗肾小球基底膜(glomerular basement membrane ，GBM)疾病是一种罕见的自身免疫性疾病，特点是急进性肾小球肾炎和肺出血。虽然本病的发病率低，但多数患者病情重，预后差，死亡率高。本文通过基因工程重组技术和亲和层析技术，得到了纯化的单链抗体scFv3，经间接ELISA试验鉴定了这种单链抗体与抗GBM抗体的免疫反应性。

摘要： 目的：构建布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒,并检测其遗传稳定性和特异性表达情况,为今后研究布鲁氏菌的新型疫苗奠定基础。rn 方法：将扩增出的OMP31基因克隆到GTPV(Goat poxvirus)重组载体上,经PCR、测序鉴定;将构建好的山羊痘病毒转移载体与GTPV疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊睾丸细胞,筛选、鉴定重组病毒rGTPV株,并对该重组病毒的细胞裂解物表达的OMP31蛋白进行Western blot检测。rn 结果：得到了布鲁氏菌omp31基因重组山羊痘病毒,该重组病毒经PCR可扩增出目的基因;在绵羊睾丸细胞中连续传10代,毒力稳定;westen blot免疫印记结果显示rGTPV株表达的蛋白能够被布鲁氏菌的阳性血清识别。rn 结论：获得了稳定表达布鲁氏菌OMP31蛋白的重组山羊痘病毒株G14-STV44-55-BOMP31;wlestern blot检测表明重组山羊痘病毒表达的OMP31蛋白具有免疫反应性。

摘要： 目的：构建和表达乙肝表面抗原突变体用于HBsAg抗原性的深入研究。方法 利用定点突变技术构建HBsAg突变体,然后转化毕赤酵母GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,SDS-PAGE检测表达蛋白,并进行ELISA和Western blot鉴定。结果 通过序列分析结果表明突变体构建成功,SDS-PAGE证明突变体能在毕赤酵母中有效表达,ELISA和Western blot表明HBsAg突变体具有一定的生物活性,分子量约为38kD。结论 利用毕赤酵母表达系统高效表达出具有一定免疫反应性的HBsAg突变体。

摘要： 目的：克隆与表达结核分枝杆菌蛋白Rv0341并对其免疫反应性进行研究。方法：利用聚合酶链式反应自结核分枝杆菌标准菌株HRv扩增Rv0341编码基因,克隆于pET-22b表达载体,测序证实后转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE、快速免疫金渗滤法(DIGFA)鉴定目的蛋白表达和免疫反应性。结果：成功克隆了1440bp的表达Rv0341蛋白的全长基因,测序结果与GeneBank公布序列相符,IPTG诱导后表达出了约43KD的目的蛋白。以重组蛋白作为抗原进行DIGFA免疫反应,其与依R菌肺结核患者血清呈现强阳性反应,而不与非依R菌肺结核患者血清反应。结论：克隆表达了具有特异免疫反应性的Rv0341蛋白,为依R菌结核病临床血清学快速诊断方法的建立和试剂盒的研发奠定了基础。

摘要： 目的：分析我国上海地区部分HIV-1分离株Vif基冈突变率;表达并纯化HIV-1 Vif蛋白,制备HIV-I Vif鼠多克隆抗体,并通过ELISA法检测HIV-1 Vif鼠多克隆抗体免疫原性与免疫反应性。rn 方法：采用RT-PCR法扩增我国上海地区HIV-1分离株Vif蛋白编码基因并测序,结合GeneBank中已经注册我国其他地区HIV-1Vif基因序列,与HIV-1国际标准毒株比较,分析我国上海HIV-1感染者Vif蛋白编码基因突变的分子流行病学;从中选择突变较少的Vif编码基因连接入原核表达载体pET32b(+),将构建好的质粒转化入细胞BL21D3(Star)进行蛋白表达、纯化HIV-1Vif蛋白,并以ELISA方法应用重组Vif蛋白检测HIV感染者及正常人血清中Vif抗体;以纯化的Vif蛋白免疫小鼠制备鼠多克隆抗体。rn 结果：上海地区HIV-1流行毒株间Vif基凶存在较高突变,与HIV-1国际标准毒株比较突变系数为0.179±0.006,其中G(C)→A和A(T)→G突变率较高为25％;HIV感染者血清及正常人血清与重组Vif蛋白反应特异性无差异(P＞0.05);ELISA法检测制备的鼠多克隆抗体与重组Vif蛋白可发生特异性反应(P＜0.01)。rn 结论：本试验提供了我国上海地区HIV-1分离株Vif基因的突变数据;表达、纯化HIV-1 Vif蛋白,制备了HIV-1 Vif鼠多克隆抗体。

摘要： 本发明涉及双特异性分子(例如，双抗体、双特异性抗体、三价结合分子等)，其具有对于PD‑1的表位免疫特异性的至少一个表位‑结合位点和对于CTLA‑4的表位免疫特异性的至少一个表位‑结合位点(即，“PD‑1xCTLA‑4双特异性分子”)。本发明的PD‑1xCTLA‑4双特异性分子能够同时结合PD‑1和结合CTLA‑4，尤其当这类分子排列在人细胞的表面上时。本发明涉及药物组合物，其包含这类PD‑1xCTLA‑4双特异性分子，并且涉及包括这类双特异性分子在治疗癌症和其他疾病和病况中的用途的方法。本发明也涉及使用这类PD‑1xCTLA‑4双特异性分子刺激免疫应答的方法。

摘要： 本发明涉及包括两条或更多条多肽链的双特异性双抗体，其具有对PD‑1的表位为免疫特异性的至少一个表位结合位点和对LAG‑3的表位为免疫特异性的至少一个表位结合位点(即，“PD‑1x LAG‑3双特异性双抗体”)。更优选地，本发明涉及包括四条多肽链的双特异性双抗体，其具有对PD‑1的一个(或两个)表位为免疫特异性的两个表位结合位点和对LAG‑3的一个(或两个)表位为免疫特异性的两个表位结合位点(即，“PD‑1x LAG‑3双特异性、四价双抗体”)。本发明还涉及另外包括免疫球蛋白Fc结构域的这样的双抗体(“双特异性Fc双抗体和双特异性、四价Fc双抗体”)。本发明的双抗体能够同时结合PD‑1和LAG‑3，尤其是当这样的分子排列在人细胞的表面上时。本发明涉及包含这样的双抗体的药学组合物，并且涉及使用这样的双抗体治疗癌症和其他疾病和病况的方法。

摘要： 本发明涉及可以融合至分子伴侣的可溶性和抗原性HTLV p24变体及其在诊断应用诸如用于检测分离的生物样品中的针对HTLV‑I或HTLV‑II的抗体的免疫测定中的用途。具体而言，本发明涉及包含p24的N‑或C‑末端结构域且缺乏其它结构域的可溶性HTLV‑I或HTLV‑II p24抗原。而且，本发明涵盖编码这些HTLV‑I和‑II融合抗原的重组DNA分子以及使用表达载体和用这样的表达载体转化的宿主细胞的它们的重组产生。此外，本发明聚焦于这些HTLV p24抗原与HTLV gp21抗原的组合物和用于使用本发明的抗原检测HTLV抗体的免疫测定方法。还包括HTLV p24抗原在体外诊断测定中的用途以及包含所述HTLV抗原的用于检测抗‑HTLV‑的抗体的试剂盒。

摘要： 本发明涉及双特异性分子，其能够将表达激活受体的免疫效应细胞定位至病毒感染的细胞，从而利于杀伤病毒感染的细胞。在优选的实施方式中，使用对免疫效应细胞的激活受体和对感染病毒的细胞表达的抗原具有免疫反应性的双特异性分子实现这样的定位，其中抗原可检测地存在于被病毒感染的细胞上，所述抗原存在的水平大于通过双特异性分子在病毒上检测的抗原水平，和涉及这样的双特异性分子在治疗潜伏性病毒感染中的用途。

摘要： 本发明的免疫反应性物质运载体通过将包括抗体和细胞因子的各种免疫反应性物质稳定地递送至靶位点而具有优异的免疫治疗效果。因此，包含本发明的运载体的组合物可以用于免疫疗法，从而在预防或治疗癌症或各种免疫疾病方面具有优异的效果。

摘要： 本发明涉及与表达激活受体的免疫效应细胞具有免疫反应性的双特异性分子。本发明涉及双特异性分子，其能够将表达激活受体的免疫效应细胞定位至病毒感染的细胞，从而利于杀伤病毒感染的细胞。在优选的实施方式中，使用对免疫效应细胞的激活受体和对感染病毒的细胞表达的抗原具有免疫反应性的双特异性分子实现这样的定位，其中抗原可检测地存在于被病毒感染的细胞上，所述抗原存在的水平大于通过双特异性分子在病毒上检测的抗原水平，和涉及这样的双特异性分子在治疗潜伏性病毒感染中的用途。

摘要： 本发明涉及双特异性分子，其能够将表达激活受体的免疫效应细胞定位至病毒感染的细胞，从而利于杀伤病毒感染的细胞。在优选的实施方式中，使用对免疫效应细胞的激活受体和对感染病毒的细胞表达的抗原具有免疫反应性的双特异性分子实现这样的定位，其中抗原可检测地存在于被病毒感染的细胞上，所述抗原存在的水平大于通过双特异性分子在病毒上检测的抗原水平，和涉及这样的双特异性分子在治疗潜伏性病毒感染中的用途。

摘要： 本发明公开了具有免疫反应性的新冠状病毒B‑细胞抗原，属于医药技术领域。具体公开了一种检测待测样品中是否含有与感染新型冠状病毒相关的感染新型冠状病毒抗体的方法，和/或一种检测受试者是否感染感染新型冠状病毒的方法。本发明还涉及一种检测待测样品中是否含有与感染新型冠状病毒相关的冠状病毒抗体的试剂盒。本发明进一步涉及所述的感染新型冠状病毒B‑细胞抗原用于制备预防感染新型冠状病毒相关适应症的药物的用途，以及一种预防与感染新型冠状病毒相关的冠状病毒感染的疫苗。

摘要： 本发明的免疫反应性物质运载体通过将包括抗体和细胞因子的各种免疫反应性物质稳定地递送至靶位点而具有优异的免疫治疗效果。因此，包含本发明的运载体的组合物可以用于免疫疗法，从而在预防或治疗癌症或各种免疫疾病方面具有优异的效果。

摘要： 本实用新型的目的在于提供一种肿瘤免疫反应性检测试剂盒，包括底盒和封片，所述底盒上具有至少一个反应槽，所述封片设置成在该检测试剂盒使用前对反应槽进行密封，且该封片能够由某一侧撕开并使反应槽的至少一部分露出，所述封片与所述底盒之间设置有在该试剂盒使用后能够将反应槽进行二次密封的胶带，该胶带呈闭环结构，所述封片上还具有当反应槽进行二次密封后对其进行观察的第一透明视窗，所述胶带为圆形或矩形的一种，所述封片具有与所述底盒连接的连接侧以及所述连接侧的易开侧，所述胶带包括带层和胶层，所述带层粘贴在胶层上以对胶层在使用前进行完全覆盖，所述带层具有靠近所述连接侧的剥离部，以及远离所述连接侧的连接部。