黄瓜花叶病毒

摘要： 为探明湖南烟草上发生的黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV)的遗传多样性及分子进化特征,对来自湖南烟区的303份疑似感染病毒的烟草样品进行检测,分析CMV系统发育、遗传变异和群体结构等特征。结果表明:部分分离物的外壳蛋白(coat protein,CP)基因与NCBI上登录的CMV分离物的一致性为86.34%~98.42%;系统发育分析发现湖南烟草CMV分离物属ⅠB组,不同组间的分离物地理特征不明显,无重组现象,进化的主要驱动力是负选择;组间遗传变异比较明显,基因交流频率较低,受到遗传漂变影响,遗传多样性高,群体趋于扩张。研究结果为烟草抗CMV育种提供了理论依据,对病害防治具有重要意义。

摘要： 为调查我国太子参主产区病毒病发生情况,使用RT-PCR法对采自福建省柘荣县,贵州省施秉县、丹寨县和安徽省宣城市的71份具有典型病毒病症状的太子参样品进行检测,并根据CP氨基酸序列对不同地区病毒进行系统进化分析。RT-PCR结果显示,65份样品检出病毒,检出率为91.55%,其中,56份样品检出芜菁花叶病毒Turnip mosaic virus(TuMV),49份样品检出蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2(BBWV2),9份样品检测出黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV),检出率分别为78.87%、69.01%和12.68%。未检测到烟草花叶病毒Tobacco mosaic virus(TMV)。序列和系统发育进化分析显示,本研究获得的TuMV、BBWV2和CMV与NCBI数据库中的序列相似度较高,核苷酸相似度分别为98.05%~98.98%、93.61%~94.25%和98.02%~99.17%,氨基酸序列相似度分别为:96.14%~97.47%、97.33%~98.50%和98.00%~100%,分别属于World-B组、Ⅰ-a亚组和Ⅱ组。

摘要： 为了探明云、川、渝各地三七园区的病毒病发生情况、发生规律及病毒多样性,利用逆转录聚合酶链式扩增反应技术(Reverse transcription-Polymerase Chain Reaction, RT-PCR)/PCR技术对田间采集的疑似病样进行了检测.结果表明病毒病在各地三七园区均有发生,病毒的检出率呈现逐年上升的趋势.其中CMV的阳性检出率为51.04%,PnVA阳性检出率为63.54%,两种病毒复合侵染率为32.29%.将获得的黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus, CMV)和三七A病毒(panax notoginseng virus A, PnVA)的外壳蛋白基因(coat protein,CP)序列进行了序列比对及系统进化分析.结果表明各地病毒分离物的CP基因均存在差异.

摘要： 为明确黄瓜花叶病毒(CMV)在草莓上的发生和危害情况,科研人员利用RT-PCR方法,对不同产地的不同品种草莓种苗进行了检测,并对CMV草莓分离物的部分核苷酸序列进行了分析。结果表明,CMV侵染草莓后产生的症状主要为植株不同部位的畸形、变色,但有些无明显症状的植株也可以检测出CMV。

摘要： [目的]探明黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)侵染烟草对烟蚜(Myzus persicae)生长发育和行为的影响,研究CMV 2b基因在烟蚜与CMV互作中的作用.[方法]供试寄主植物为健康烟草和CMV侵染、CMV 2b基因缺失突变体(CMVΔ2b)侵染烟草,利用Y型嗅觉仪测定烟蚜对不同烟草寄主的选择趋向;利用刺吸电位图谱(electrical penetration graph,EPG)监测烟蚜取食行为,并结合寄主植物内总糖和游离氨基酸含量分析CMV侵染对烟蚜取食行为的影响;通过单株微虫笼记录蚜虫生命参数并分析CMV侵染烟草对烟蚜生长发育和繁殖的影响.[结果]CMV侵染烟草叶片中总糖含量显著低于健康烟草,而游离氨基酸的含量显著高于健康烟草和CMVΔ2b侵染烟草.CMVΔ2b侵染烟草中的苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、酪氨酸、组氨酸、精氨酸和脯氨酸含量显著高于其他处理烟草,缬氨酸和赖氨酸含量显著高于健康烟草;而CMV侵染烟草中的天冬氨酸含量显著低于其他处理烟草,其胱氨酸含量显著高于CMVΔ2b侵染烟草.相较于CMV侵染烟草,烟蚜对健康烟草和CMVΔ2b侵染烟草有着更强的选择趋向,而烟蚜对健康烟草与CMVΔ2b侵染烟草的选择行为无显著差异.CMV侵染烟草对烟蚜的生长发育和取食行为产生不利影响.烟蚜在CMV侵染烟草上的刺探行为(pd波)发生次数最多,韧皮部取食(E2波)的持续时间最短,且木质部吸食(G波)的发生频率显著高于健康烟草和CMVΔ2b侵染烟草,表明CMV侵染烟草不适宜烟蚜取食.烟蚜的生长特性试验表明CMV侵染烟草显著延长了烟蚜的若蚜历期,提高了2龄若蚜的死亡率,缩短了烟蚜的寿命,显著降低了烟蚜繁殖力.CMV侵染烟草上烟蚜的内禀增长率(r)和周限增长率(λ)均显著低于健康烟草和CMVΔ2b侵染烟草,CMV的侵染不利于烟蚜种群的增长.[结论]CMV侵染改变了烟草营养物质组成,CMV 2b基因的存在增加了烟蚜刺探频率,减少了烟蚜在烟株上的韧皮部取食;CMV侵染导致烟蚜若蚜历期延长、死亡率增加,烟蚜寿命和繁殖力均显著降低;CMV侵染降低了烟蚜的寄主适合度,促使蚜虫向新寄主植物转移,从而促进了病毒的扩散传播.

摘要： 烤烟是贵州省的重要经济作物,但是烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)和马铃薯Y病毒(PVY)3种RNA病毒在贵州烤烟产区造成巨大损失.3种病毒引起的症状相似性造成了田间诊断的困难.针对贵州烟区的样品,开发了一套包含了靶向3种病毒外壳蛋白基因特异性片段的RT-PCR检测方法.3对引物涵盖的基因片段长度分别为:TMV-120 bp,CMV-240 bp,PVY-660 bp,退火温度均为55?C.通过1次PCR反应,就可以根据扩增条带的大小判断病毒的种类,还可以检测复合侵染的样品中2种病毒与3种病毒混合DNA的种类.该方法非常适合基层检测站点快速和高效地检测大批量烟叶样品,指导后续防控工作的开展.

摘要： 为了研究辣椒在黄瓜花叶病毒侵染下的分子响应机制、发掘抗病相关基因,以感病材料茄门和抗病材料JJ101为对象,对接种黄瓜花叶病毒前后的茄门和JJ101叶片进行高通量转录组测序,并利用生物信息学方法对基因表达和功能进行研究.结果显示,采用RPKM法计算基因表达量,共筛选出JJ101和茄门接种黄瓜花叶病毒后的1158个差异表达基因.其中有643个差异基因在GO(gene ontology)中富集,功能主要涉及酶活性、代谢过程和防御反应等.有287个差异基因归入KEGG通路,在这些通路中,包括植物-病原互作、植物激素信号传导等过程.研究发现,辣椒对黄瓜花叶病毒的免疫是一个极其复杂、多个通路共同调节的过程,蛋白质代谢、防御反应、激素调节等通路均参与其中,为后续深入研究辣椒抗病分子机理奠定了理论基础.

摘要： 内蒙古农业大学园艺与植物保护学院以采自内蒙古土默特左旗具有典型花叶症状的籽用西葫芦叶片为材料,对其进行了病原鉴定,并确定了其分类地位。结果表明,对具有典型花叶症状的籽用西葫芦叶片的sRNA测序结果进行拼接,在数据库中比对共注释到14种病毒。

摘要： 对引起花叶狭长及疱斑畸形重症的烟草黄瓜花叶病毒,采用生物学接种、CP基因扩增测序、电镜观察、免疫印迹、荧光定量等方法,研究病毒分离物的株系、粒体形态、致病力、稀释限点、传导路径以及在抗感烟草上的症状.结果显示,分离物外壳蛋白基因长度为657 bp,其核苷酸序列与亚组Ⅱ的代表Q株系同源性为69.83％,与亚组Ⅰ的代表Fny株系同源性为93.00％,介于ⅠA与ⅠB株系之间.病毒粒体球形,直径28～30 nm,对烟草致病力强.病汁液稀释限点为10-5,质量浓度40倍稀释接种后病毒由接种叶移动到主茎后,先向下至根、向上至心叶,再扩散布满全株,最后集中在上部叶.亮黄和G28对其表现高感,病叶狭窄、黄化斑驳、变薄革质化及疱斑畸形;Ti245和铁耙子表现中抗,病叶轻微脉明斑驳.

摘要： 目的:检测安徽省太和县板蓝根花叶病病原.方法:采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,使用黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、蚕豆萎蔫病毒2号(broad bean mosaic virus 2,BBWV2)和马铃薯Y病毒属(Potyvirus)引物对5个板蓝根花叶样品进行分子鉴定.选取2个样品(AH-BLG3和AH-BLG4)的扩增产物进行测序,BLAST分析病原种类及分子特征,根据CMV外壳蛋白(coat protein,CP)氨基酸序列构建系统发育进化树,明确病原的分类地位.结果:5个板蓝根样品均被CMV侵染,未检测到BBWV2和马铃薯Y病毒属病毒.BLASTn分析发现,该CMV板蓝根分离物与我国白术中ZJAm分离物相似度最高,核苷酸相似度分别为98.93％和99.54％,氨基酸相似度均为100％.系统进化分析发现,该CMV板蓝根分离物与ZJAm和Anhui分离物亲缘关系最近,同属CMV IB亚组.结论:明确了安徽省太和县板蓝根花叶病的病原为CMV.

摘要： 本文采用DAS-ELISA法对采自甘肃省5个马铃薯种植区的180份马铃薯疑似病毒样品和随机无症样品进行了黄瓜花叶病毒CMV(Cucumber mosuic virus)的初步检测及亚组鉴定.共有99份样品检测到CMV,检出率达55％;其中CMV亚组Ⅰ侵染样品90份,占90.91％:CMV亚组Ⅱ侵染样品37份,占37.37％;CMV亚组Ⅰ和CMV亚组Ⅱ复合侵染样品31份,占34.44％.结果表明,CMV在甘肃省马铃薯上的侵染相当普遍,且CMV亚组Ⅰ是甘肃省马铃薯上的优势CMV亚组类型.

摘要： 本文根据黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因序列设计扩增引物,以蝴蝶兰病叶总RNA为模板通过RT-PCR扩增得到目的大小片段,进一步将扩增片段进行克隆与测序.结果表明,扩增片段包括该病毒外壳蛋白基因全长序列,同其他分离物同源性为85％～98％.

摘要： 本文利用RT-PCR的方法，获得了黄瓜花叶病毒M株系(M-CMV)全长序列及RNA2和RNA3的全长侵染性cDNA克隆。序列分析显示，M-CMV RNA1, RNA2. RNA3序列全长分别为3357nt、3000nt、2216nt，与以往报道的fny-CMV RNA1、RNA2、RNA3相同，且核昔酸序列一致性分别为91.95%、98.93%、98.33%。用M-CMV RNA3侵染性克隆结合己有的fny-CMV侵染性克隆为模板，使用T7RNA聚合酶在体外转录得到病毒RNA,合接种烟草。对收获的病毒用RT-PCR分析结果，证实侵染性克隆活性，得到FFM重组体。该株感染性克隆的构建为深入研究CMV的致病机制及防控方法等莫定了基础。

摘要： 黄瓜花叶病毒(CMV)是辣椒(Capsicum annuum L.)上一种为害严重的病害。多数辣椒材料对黄瓜花叶病毒的抗性表现为数量遗传。本文以对黄瓜花叶病毒抗、感病的辣椒品种为材料，通过分子标记方法，结合F3代株系上的黄瓜花叶病毒抗性鉴定结果，进行遗传学分析和数量遗传位点的定位，以分析辣椒抗黄瓜花叶病毒遗传机理，并为抗病育种奠定基础。

摘要： 黄瓜花叶病毒M株系能够引致烟草症状恢复,症状的变化跟很多因素有关,卫星病毒可能就是一个主要原因,通过对卫星病毒进行鉴定,发现M株并不存在卫星病毒。研究恢复现象需要有比较株系,通过单斑分离筛选,得到了症状推迟的突变株。

摘要： 黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)黄瓜花叶病毒属(Cucumovirus)典型成员,是世界范围内分布最为广泛的一类植物病毒,能够侵染1000多种植物,严重影响它们的产量和质量,给人类带来巨大的经济损失. M株系(M-CMV)是CMV的一个变异毒株,最早由英国一个研究小组分离到,是CMV致病性最强的一个株系,能引起烟草发病叶片完全黄化.M株系的一个显著特点就是具有恢复现象,即在叶片开始发病后一段时间内形成的新生叶不发病(没有外观症状),随后在上部新形成的叶片又开始出现症状.本实验室已用DAS-ELISE的方法定量检测各个时期病毒在植株中的分布,得出初步的结论"恢复叶片中存在一种较为高效的病毒抗性机制".本文测定M-CMV基因组全序列并构建全长cDNA侵染性克隆.

摘要： 通过对6个具有不同抗性的辣椒品种感染黄瓜花叶病毒(CMV)病和烟草花叶病毒(TMV)病前后的主要生理生化指标的测定,明确辣椒感染病毒病后生理生化指标的变化规律,为辣椒抗病毒病育种提供科学依据.结果表明,辣椒幼苗健全叶片中可溶性蛋白含量抗病材料比感病品种高,但差异并不明显.感染病毒病后,无论是抗病材料还是感病材料,其叶片中可溶性糖含量、可溶性蛋白质的含量总的变化趋势是先升高后降低;辣椒叶片内SOD活性显著下降,而过氧化物酶(POD)普遍增强,并且在接种后期,感病材料POD活性增加幅度大,酶活性高于抗病材料.

摘要： 本研究以拟南芥野生型Col-0、SA过表达突变体cvi-D, SA缺乏突变体NahG和。ds5-1为实验材料，接种黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)，观察病毒在野生型和突变体材料上的病程发展，并于接种后lOd检测各实验组病毒复制和病原相关蛋白的转录水平，同时检测了与生物胁迫相关的活性氧含量、脂质过氧化水平以及数种抗氧化酶活性。结果显示，与对照的野生型拟南芥相比，SA缺乏突变体NahG和eds5-1表现更轻的病毒致病症状，其中以NahG的症状最轻。NahG和eds5-1突变体的活性氧水平明显低于cvi-0突变体组及对照野生型组。虽然NahG和eds5-1突变体中防御基因PR-1、NPR-1的本底及诱导水平都比cvi-0和Col-0要低，但它们的抗氧化酶活性，尤其是谷肤甘肤还原酶GSH活性明显高于后者。鉴于活性氧在植物病程发展前期的重要作用，外施了一定浓度的最常见的抗氧化物-抗坏血酸，结果表明ASA可明显减轻病毒的致病症状。

摘要： 根据黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus，CMV)和烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus，TMV)外壳蛋白基因序列分别设计特异性引物对，运用单重RT-PCR检测到病毒并筛选出适合多重RT-PCR的引物对。以唐菖蒲18S rRNA为内参照，建立了同时检测CMV和TMV的多重RT-PCR方法。此方法可从带病样品中扩增出CMV(629bp)和TMV(423bp)两条特异片段。测序结果表明，CMV扩增产物与其他分离物核苷酸的同源性为92％～96％，TMV扩增产物与其他分离物核苷酸的同源性可达99％。

摘要： 采用抗原直接包被酶联免疫吸附测定(EIJSA;对贵州烟区烟草花叶病样品进行了病毒种类检测。52个烟草样品共检测到烟草花叶病毒(TMV;及黄瓜花叶病毒(CMV;两种病毒，其检出率分别为32．69﹪和46．15﹪，未发现这两种病毒复合侵染，感染CMV的样品全部采自遵义烟区，而采自安顺烟区的样品仅检测到TMV。阳性样品中TMV含量较低，CMV含量较高。

摘要： 提供对ToBRFV具有抗性的番茄植物。本发明的烟草花叶病毒组抗性番茄植物中，SlTOM1a基因、SlTOM1c基因和SlTOM1d已丧失功能。

摘要： 一种百合隐症病毒、百合斑驳病毒和百合黄瓜花叶病毒双向复合胶体金免疫层析速测卡及制备方法，采用双向免疫层析技术，该速测卡可一次性同时快速检测LSV、LMoV和CMV，无需任何仪器和设备，较LSV和LMoV单一或LSV+LMoV复合胶体金免疫层析试剂卡，本发明速测卡检测效率更高，检测成本进一步降低，一次性检测病毒种类更齐全；此外，其操作简便，携带方便，检测快速、特异性强、重复性好，相对于PCR方法，假阳性率低于1％。可见本发明特别适用于在田间推广应用，并且可靠性很高。

摘要： 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT-PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT-PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。

摘要： 本发明“与黄瓜抗黄瓜花叶病毒基因cmv连锁的SNP标记及其试剂盒与方法”，涉及生物技术辅助育种领域。所述与黄瓜抗黄瓜花叶病毒基因cmv连锁的SNP标记的第190个碱基位点具有A/T单核苷酸多态性；所述SNP标记为SNP9153657 A/T；可扩增所述SNP标记的引物为核苷酸序列分别如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的dCAPS‑NlaIII‑F和dCAPS‑NlaIII‑R。本发明提供的SNP标记具有高效、限制少的优点，提高了选育抗黄瓜花叶病毒的黄瓜材料的效率，缩短了育种周期。

摘要： 本发明公开了一种兼抗黄瓜花叶病毒和烟草脉带花叶病毒的双价弱毒疫苗，所述双价弱毒疫苗含有CMVFny分离物的突变型RNA2；所述CMVFny分离物的突变型RNA2是在CMVFny分离物的RNA2全长序列第2661位之后插入TAATAG以及一段烟草脉带花叶病毒的保守序列；所插入的烟草脉带花叶病毒的保守序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述CMVFny分离物的突变型RNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的双价弱毒疫苗与含有CMVFny分离物RNA1和RNA3的质粒混合接种，可以预防黄瓜花叶病毒和烟草脉带花叶病毒的危害，为田间防治CMV和TVBMV引起的植物病毒病提供了疫苗材料和有效防治措施。

摘要： 本发明公开了一种兼抗黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒的双价弱毒疫苗，所述双价弱毒疫苗含有CMVFny分离物的突变型RNA2；所述CMVFny分离物的突变型RNA2是在CMVFny分离物的RNA2全长序列第2661位之后插入TAATAG以及一段烟草花叶病毒的保守序列；所插入的烟草花叶病毒的保守序列的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述CMVFny分离物的突变型RNA2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。将本发明的双价弱毒疫苗是将CMVFny分离物的突变型RNA2与含有CMVFny分离物RNA1和RNA3的质粒混合接种，可以预防黄瓜花叶病毒和烟草花叶病毒的危害。本发明的双价弱毒疫苗对CMV和TMV具有交叉保护效果；为田间防治CMV和TMV引起的植物病毒病提供了疫苗材料和有效防治措施。

摘要： 本发明的芜菁花叶病毒外壳蛋白基因和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因双价抗病载体pCam－TuMVCP－CMVCP是由潮霉素、NoS终止子NoSter、黄瓜花叶病毒CP基因(CMVCP)、35S启动子CaMV35Spro、35S启动子CaMV35Spro、芜菁花叶病毒CP基因(TuMVCP)、NoS终止子NoSter依次连接而成。把芜菁花叶病毒CP基因和黄瓜花叶病毒CP基因共同构建在同一个植物表达载体上，由于CP封闭了病毒基因组的脱壳过程，当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后，它们立即被细胞中的自由CP所重新包裹，阻止了核酸的复制；CP限制了病毒粒体的扩展与转运，从而提高转基因植物的抗性。

摘要： 本发明提供了一种免疫捕获三重RT-PCR同步检测百合隐症病毒、斑驳病毒和黄瓜花叶病毒的方法，其步骤包括在同一个PCR反应管中用LSV、LMoV和CMV的多克隆抗体特异性捕获LSV、LMoV和CMV粒子、利用LSV、LMoV和CMV的特异性引物进行三重反转录聚合酶链式反应RT-PCR、琼脂糖凝胶电泳检测目的片段；该方法将ELISA和RT-PCR结合，对现有的免疫捕获RT-PCR进行了改进，实现了用免疫捕获RT-PCR同步检测三种百合病毒LSV、LMoV和CMV，从而完善了免疫捕获RT-PCR技术。

摘要： 一种百合隐症病毒、百合斑驳病毒和百合黄瓜花叶病毒双向复合胶体金免疫层析速测卡及制备方法，采用双向免疫层析技术，该速测卡可一次性同时快速检测LSV、LMoV和CMV，无需任何仪器和设备，较LSV和LMoV单一或LSV+LMoV复合胶体金免疫层析试剂卡，本发明速测卡检测效率更高，检测成本进一步降低，一次性检测病毒种类更齐全；此外，其操作简便，携带方便，检测快速、特异性强、重复性好，相对于PCR方法，假阳性率低于1％。可见本发明特别适用于在田间推广应用，并且可靠性很高。

摘要： 本发明提供了一种同步检测百合斑驳病毒(LMoV)、百合无症病毒(LSV)和黄瓜花叶病毒(CMV)的方法，属植物保护领域。其方案是，通过提取总RNA、多重RT－PCR以及电泳检测等步骤，在同一反应管及同一个热循环条件下对百合感染的LMoV、LSV和CMV三种病毒中的1～3种进行扩增，并通过凝胶电泳进行分离和检测。该方法除了具有普通RT－PCR具有的快速、特异、灵敏的优点外，主要是实现了三种病毒同步检测，降低了成本。