高表达

摘要： 着丝粒蛋白M(CENP-M)是着丝粒蛋白家族的重要一员,对着丝粒内部的组装和稳定至关重要,其功能异常可导致有丝分裂停滞以及染色体排列缺陷,进而引起细胞周期异常,可能与肿瘤的发生、发展相关。近年来有研究在多种恶性肿瘤的基因或蛋白层面发现CENP-M高表达,但由于研究方法差异及数量较少,对于CENP-M在恶性肿瘤发生、发展中起到的作用目前尚无明确定论。本文就目前CENP-M在恶性肿瘤中的相关研究作一综述,以期为进一步研究其相关临床应用提供参考。

摘要： 目的分析富含脯氨酸蛋白酪氨酸激酶2(Pyk2)蛋白在非肌层浸润性膀胱癌患者中阳性表达情况及对预后评估能力。方法将我院于2017年9月至2019年6月收治的78例膀胱癌患者列为研究对象,以回顾性研究方式分析其临床资料,统计Pyk2阳性占比,分析Pyk2与临床常规资料之间的相关性,随访2年后分析Pyk2与预后转归间的相关性。结果75.64%患者检出Pyk2蛋白阳性,Pyk2高表达与肿瘤分期、分化程度有密切关联(P<0.05);Pyk2阳性组患者肿瘤复发率高于阴性组,且总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)等预后指标均低于阴性组(P<0.05)。结论非肌层浸润性膀胱癌患者Pyk2蛋白呈阳性,该蛋白表达情况与肿瘤恶变程度、分化程度等存在关联,且对预后有一定指导意义,有较大的临床应用意义。

摘要： 目的 miR-1262、miR-424表达与上皮性卵巢癌临床病理特征及预后的关系。方法 选择上皮性卵巢癌患者85例。使用问卷调查法调查患者年龄。查阅患者病案信息,收集患者的肿瘤直径、淋巴结转移、FIGO分期、分化程度、组织类型。抽取患者肘静脉血3 ml,离心处理后留下血清,采用Qrt-pcr法检测血清miR-1262、miR-424相对表达量。根据miR-1262、miR-424表达情况,分为低表达和高表达。结果 miR-1262表达与年龄、淋巴结转移无相关性(P>0.05),与FIGO分期、分化程度、组织学类型有关(P0.05),与淋巴结转移、FIGO分期、分化程度、组织学类型有关(P<0.05)。miR-1262低表达患者生存时间(8.02±0.58)个月,高表达患者(6.57±0.51)个月;miR-424低表达患者生存时间(8.14±0.51)个月,高表达患者(6.01±0.58)个月。miR-1262低表达患者生存时间长于高表达者(P<0.05)。miR-424低表达患者生存时间长于高表达者(P<0.05)。miR-1262表达与预后生存时间呈负相关(P<0.05),miR-424表达与预后生存时间呈正相关(P<0.05)。结论 上皮性卵巢癌患者miR-1262、miR-424高表达,其表达水平与疾病临床病理特征及预后密切。miR-1262、miR-424高表达会促使肿瘤发生和发展,建议密切灌注。

摘要： 赖氨酸甲基转移酶2(Lysine methyltransferase 2,SMYD2)是一类特殊的赖氨酸甲基转移酶,包含SET(Suppressor of variegation,Enhancer of zeste,Trithorax)结构域和MYND(Myeloid-nervy-deaf1)结构域。通过对组蛋白和其他蛋白的翻译后修饰,SMYD2在表观遗传、机体发育和癌变中发挥关键作用。近年来,SMYD2在恶性肿瘤中的作用日益受到关注。多项研究表明,SMYD2在卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肾细胞癌等恶性肿瘤的发生发展以及转移过程中发挥重要作用。本文对近年来SMYD2在恶性肿瘤中的研究进展进行阐述。

摘要： 目的:研究miRNA26a的高表达与新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)的关联.方法:应用RT-PCR检测30例患NRDS的新生儿(实验组)及30例正常新生儿(对照组)血液组织中及支气管镜提取肺泡盥洗液中的miRNA26a.结果:RT-PCR检测表明,NRDS组新生儿miRNA26a表达明显高于对照组(P<0.05).结论:miRNA26a在肺发育及NRDS中起重要作用,其值升高、表达过度,可能预示新生儿呼吸窘迫综合征的发生.

摘要： 目的 旨在确定长链非编码RNA表达水平在小细胞肺癌(SCLC)中的潜在预后和临床病理价值.方法 计算机全面检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国知网、万方数据库、维普中文期刊全文数据库和中国生物医学文献数据库等在线数据库,收集LncRNA高表达与SCLC预后的相关性研究(建库至2020年5月).由2名研究人员独立筛选文献、提取资料,质量评价后使用统计软件STATA12.0进行Meta定量综合分析.结果 共计纳入13个病例-对照研究,包括1302例患者.结果 表明:LncRNA高表达的SCLC患者更易早期广泛转移[比值比(Odds ratio,OR)=6.10,95％置信区间(confidence interval,CI)(4.69,7.93),P<0.01]、对化疗药物反应较差[OR=5.17,95％CI(3.44,7.77),P<0.01]、生存状态较差[OR=5.96,95％CI(4.22,8.40),P<0.01]、总生存期(OS)[风险比(hazard ratio,HR)=3.33,95％CI(2.65,4.19),P<0.01]及无进展生存期(PFS)[HR=4.88,95％CI(3.00,7.94),P<0.01]更短.结论 LncRNA高表达可以预测SCLC患者的不良生存率和不良的临床病理特征,可能是潜在的预后标志物.然而,这需要更多高质量研究的支持.

摘要： 目的 探讨DEK在乳腺癌中的表达情况和临床价值.方法 60例乳腺癌患者,术中进行肿瘤和癌旁组织(正常组织)病理取样,分别获得60份乳腺癌组织和60份癌旁组织样本作为研究样本.比较患者乳腺癌组织和癌旁组织DEK蛋白表达情况、免疫组化结果、DEK mRNA表达水平,统计不同肿瘤大小、病理分级和预后患者的DEK蛋白高表达情况,观察不同预后患者DEK蛋白表达情况.结果 乳腺癌组织DEK蛋白相对表达量为(4.92±1.02),高于癌旁组织的(1.56±0.58),差异具有统计学意义(P<0.05).乳腺癌组织DEK蛋白表达阳性率78.33％高于癌旁组织的8.33％,差异具有统计学意义(P<0.05).乳腺癌组织DEK mRNA平均表达量(4.85±1.07)高于癌旁组织的(1.14±0.42),差异具有统计学意义(P<0.05).肿瘤大小T2、T3和T4患者DEK蛋白高表达率均显著高于T1患者,差异具有统计学意义(P<0.05).病理分级Ⅱ级和Ⅲ级患者DEK蛋白高表达率均显著高于Ⅰ级患者,差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者2年生存率为70.00％(42/60),死亡患者乳腺癌组织DEK蛋白高表达率94.44％(17/18)显著高于未死亡患者的71.43％(30/42),差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者5年生存率为60.00％(36/60),死亡患者乳腺癌组织DEK蛋白高表达率95.83％(23/24)显著高于未死亡患者的69.44％(25/36),差异具有统计学意义(P<0.05).60例患者随访5年显示,复发或远处淋巴结转移者共28例,其乳腺癌组织DEK蛋白高表达率为89.29％(25/28)显著高于无复发和转移患者的65.63％(21/32),差异具有统计学意义(P<0.05).结论 乳腺癌患者存在肿瘤组织DEK蛋白高表达情况,而其表达水平与肿瘤大小、病理分级、预后情况存在一定联系,DEK基因具有潜在的鉴别、诊断与预后评估价值.

摘要： 目的 探讨血清细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)在结肠癌中的表达情况及与预后关系.方法 检测78例结肠癌患者手术前后CYFRA21-1、NSE的表达水平,术后进行为期1年的随访,统计复发转移情况,比较不同临床特征结肠癌患者术后的血清CYFRA21-1、NSE表达水平,分析影响结肠癌患者术后复发转移的危险因素.结果 结肠癌患者术后血清CYFRA21-1、NSE水平均明显低于手术前(P﹤0.01).术后随访1年,有复发转移25例(32.05%),无复发转移53例(67.95%).单因素分析结果显示,淋巴结转移情况、分化程度、CYFRA21-1水平、NSE水平均可能是结肠癌患者术后复发转移的影响因素(P﹤0.05),肿瘤部位、性别、年龄、饮酒史、吸烟史均可能不是结肠癌患者术后复发转移的影响因素(P﹥0.05).将可能的影响因素带入Logistic回归模型进一步分析,结果显示,有淋巴结转移、分化程度低、术后CYFRA21-1高表达及NSE高表达均是结肠癌患者术后发生复发转移的危险因素(P﹤0.01).结论 血清CYFRA21-1、NSE水平在结肠癌患者中呈高表达,术后血清CYFRA21-1、NSE表达水平则明显下降,且血清CYFRA21-1、NSE表达与患者术后复发转移关系密切,对判断患者预后有重要临床价值.

摘要： 本发明涉及皮蝇胶原酶（HlCollagenase）突变体的序列及其分泌表达的酵母菌株HlCollagenase-m/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产高活性皮蝇胶原酶的纯化方法。本发明采用基因工程表达的方法生产高活性的皮蝇胶原酶突变体，比活性达到1320国际单位/毫克,表达量达到241毫克/升蛋白，通过纯化可获得纯度达95%以上的目标蛋白皮蝇胶原酶，为皮蝇胶原酶今后的推广使用奠定良好基础。

摘要： 本发明公开了蛋白酶K（Proteinase K）突变体的序列及其分泌表达的酵母菌株Proteinase K‑m/pGAPZα‑A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产高活性蛋白酶K的纯化方法。本发明采用基因工程表达的方法生产高活性的蛋白酶K突变体，比活性达到26.8国际单位/毫克，表达量达到366.7毫克/升蛋白，通过纯化可获得纯度达95%以上的目标蛋白蛋白酶K，为蛋白酶K今后的推广使用奠定良好基础。

摘要： 本发明涉及皮蝇胶原酶（HlCollagenase）突变体的序列及其分泌表达的酵母菌株HlCollagenase-m/pGAPZα-A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产高活性皮蝇胶原酶的纯化方法。本发明采用基因工程表达的方法生产高活性的皮蝇胶原酶突变体，比活性达到1320国际单位/毫克,表达量达到241毫克/升蛋白，通过纯化可获得纯度达95%以上的目标蛋白皮蝇胶原酶，为皮蝇胶原酶今后的推广使用奠定良好基础。

摘要： 本发明公开了一种高拷贝高表达重组质粒的构建及其在外源基因表达中的应用，涉及基因工程技术领域。本发明以pcDNA3.1(‑)质粒为骨架，将cumate‑cymR诱导表达调控单元装入pUC ori高拷贝复制子和Ampicillin抗性基因之间，同时将pET‑28a T7启动子下游的多克隆位点以及6xHis编码序列和T7转录终止序列插入cumate‑cymR调控单元的下游构建出高复制和高表达的重组质粒DN‑001。本发明的重组质粒DN‑001具有最经济、最方便和高产量等优点，使得基因表达载体的重组省时、省力；可以适用于生产大剂量的重组蛋白；同时有效地抑制了漏出表达，使得这一载体特别适合有毒蛋白的表达，使得这一载体具有广泛的市场前景。

摘要： 本发明公开了一种MrgprX2高表达的重组细胞及MrgprX2高表达膜受体固定相及制备方法和应用，该重组细胞以HEK293细胞为宿主细胞，转染包含MrgprX2全长基因的表达载体，其细胞膜上能够稳定表达MrgprX2受体大分子，而且具有完整的受体生物活性。该MrgprX2高表达膜受体固定相由活化硅胶吸附MrgprX2高表达的重组细胞的细胞膜制成，可应用于特异性筛选识别由MrgprX2引发的类过敏组分。本发明通过实际应用发现盐酸青藤碱可以特异性与MrgprX2相结合，同时细胞水平的过敏实验表明盐酸青藤碱均可以刺激肥大细胞释放组胺和β氨基己糖苷酶，证实MrgprX2高表达膜受体固定相确实可以应用于特异性识别类过敏组分。

摘要： 本发明公开了一种高拷贝高表达重组质粒的构建及其在外源基因表达中的应用，涉及基因工程技术领域。本发明以pcDNA3.1(‑)质粒为骨架，将cumate‑cymR诱导表达调控单元装入pUC ori高拷贝复制子和Ampicillin抗性基因之间，同时将pET‑28a T7启动子下游的多克隆位点以及6xHis编码序列和T7转录终止序列插入cumate‑cymR调控单元的下游构建出高复制和高表达的重组质粒DN‑001。本发明的重组质粒DN‑001具有最经济、最方便和高产量等优点，使得基因表达载体的重组省时、省力；可以适用于生产大剂量的重组蛋白；同时有效地抑制了漏出表达，使得这一载体特别适合有毒蛋白的表达，使得这一载体具有广泛的市场前景。

摘要： 本发明公开了一种MrgprX2高表达的重组细胞及MrgprX2高表达膜受体固定相及制备方法和应用，该重组细胞以HEK293细胞为宿主细胞，转染包含MrgprX2全长基因的表达载体，其细胞膜上能够稳定表达MrgprX2受体大分子，而且具有完整的受体生物活性。该MrgprX2高表达膜受体固定相由活化硅胶吸附MrgprX2高表达的重组细胞的细胞膜制成，可应用于特异性筛选识别由MrgprX2引发的类过敏组分。本发明通过实际应用发现盐酸青藤碱可以特异性与MrgprX2相结合，同时细胞水平的过敏实验表明盐酸青藤碱均可以刺激肥大细胞释放组胺和β氨基己糖苷酶，证实MrgprX2高表达膜受体固定相确实可以应用于特异性识别类过敏组分。

摘要： 本发明公开了一种得到高表达、高活力及高稳定性的酶突变体的方法，属于基因工程技术领域。此方法基于以SAPs为基础构建的功能性多肽文库，整个获得酶突变体的过程快速、高效、便捷；同时，本发明得到的酶突变体，相较于野生型碱性果胶酶，碱性果胶酶的融合酶突变体的胞外酶活最高提高了15.32倍，稳定性最高提高了3.86倍，比酶活最高提高了2.55倍；脂肪氧合酶融合酶突变体胞内酶活最高提高了2.49倍，稳定性最高提高了3.13倍，比酶活最高提高了0.9倍；天冬酰胺酶融合酶突变体胞外酶活最高提高了2.25倍，稳定性最高提高了3.56倍，比酶活最高提高了1.34倍。

摘要： 本发明公开了一种高表达烟碱NtPMT1启动子、其表达载体及应用，旨在解决当前烟草中烟碱生物合成效率难以提升的技术问题。本发明通过加倍烟草PMT1启动子上包含G‑box元件的序列“ATGCACGTTGTAAT”，实现对烟草烟碱生物合成的分子调控，并改造设计了相关的植物表达载体、重组质粒，将其应用于烟草转化，能够显著提升烟草烟碱的生物合成。

摘要： 本发明公开了一种利用含有硒代半胱氨酸的GPI锚定蛋白表达系统及高表达重组蛋白的细胞。其通过准备载体、连接特定蛋白、定点诱变、插入SECIS、更换至pME‑Hyg步骤制备获得，该系统可以利用硒元素诱导可溶性重组蛋白以GPI锚定蛋白的形式表达到细胞膜表面或以可溶性蛋白形式分泌到培养基中。在不添加硒元素的情况下，使重组蛋白分泌到培养基中，从而获得高表达重组蛋白的细胞株，该系统大大简化了检测和筛选高表达细胞的难度。与其它筛选系统相比，该系统将重组可溶蛋白表达在细胞膜表面，利用流式分选，筛选方便，高效。