高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)

摘要： 采用QuEChERS前处理技术,建立了鱼肉中6种替考拉宁组分的高效液相色谱-串联质谱检测方法。搅碎均匀的鱼肉样品经乙腈-10%三氯乙酸(6∶4,体积比)提取,100 mg乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)净化后,使用Agilent SB C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,以0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离正离子(ESI+),多反应监测模式(MRM)进行检测,内标法定量。考察了提取溶剂种类与体积、吸附剂种类与用量对目标化合物回收率的影响。评价了6种目标物在不同鱼肉基质中的基质效应。在优化条件下,6种替考拉宁组分在4 min内得到良好分离。目标物在各自浓度范围内线性良好,相关系数(r2)均不小于0.998;在5.0、10.0、25.0μg/kg 3个加标水平下,各组分的回收率为84.3%~93.3%,日内相对标准偏差和日间相对标准偏差(n=6)分别不大于7.0%和6.2%,方法的检出限和定量下限分别为0.5~2.0μg/kg和2.0~5.0μg/kg。采用该方法对采集的9种40个鱼肉样品进行检测,所有样品均未检出替考拉宁组分。该方法简单、灵敏、准确、可靠,可用于鱼肉中6种替考拉宁组分的定量分析。

摘要： 建立了高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(HPLC-MS/MS)测定水产品中氨苯砜及其代谢物残留量的方法。样品加入D8-氨苯砜内标,经1%氨化乙腈提取,正己烷去脂后,采用MCX阳离子固相萃取柱进行富集和净化,氮吹浓缩至0.2 mL左右。用甲醇和水作为流动相,以CAPCELL PAK C18色谱柱(2.0 mm×100 mm,3μm)进行分离,在质谱多反应监测(MRM)、正离子电离模式下测定,采用内标法定量。氨苯砜和N-乙酰氨苯砜在0.1~5.0μg/kg范围内线性关系良好,相关系数(r^(2))均大于0.99,方法检出限(LOD)为0.1μg/kg,定量下限(LOQ)为0.2μg/kg。以不同类型的水产品为空白基质,在0.2、1.0、2.0μg/kg加标水平下,平均加标回收率为94.0%~109%,相对标准偏差(RSD)为2.7%~11%。用该法对药代实验中获得的阳性肌肉样品进行测定,通过对化合物的保留时间和离子对信息进行鉴别,鉴定出氨苯砜的代谢产物为N-乙酰氨苯砜。该方法的检出限低、精密度好、准确度高,能够实现对不同水产品中氨苯砜残留量的准确定性与定量检测。

摘要： 建立了高效液相色谱串联质谱法测定泡面桶中总壬基酚迁移量的分析方法,并对市售泡面桶中壬基酚迁移进行了风险分析与评估。优化了色谱分离条件和固相萃取条件,线性范围1~500μg/L内线性关系良好,壬基酚的方法检出限为0.002~0.004μg/L,对实际样品迁移液进行加标回收试验,回收率在79.8%~105.2%之间,相对标准偏差(Relative Standard Deviation,RSDs)在1.74%~9.88%之间。应用该方法对市售54批泡面桶中壬基酚总迁移量进行测定,其中45件样品的迁移液中检出了壬基酚,壬基酚含量在0.006~0.079μg/L。根据检测结果对市售泡面桶中壬基酚的安全性进行了风险分析,壬基酚的最大每日摄入量为0.0237μg/d,远低于壬基酚的健康指导值3μg/d,说明市场上泡面桶相对比较安全,对人体健康存在较低风险。

摘要： 建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定食品接触材料及制品中33种初级芳香胺的迁移量。根据食品特性以及食品与食品接触材料的接触特点,不同基质样品分别采用20%乙醇、50%乙醇和3%乙酸溶液作为食品模拟浸泡液进行迁移实验。迁移溶液以甲醇和0.05%甲酸水溶液为流动相,经五氟苯基色谱柱梯度洗脱,在电喷雾正离子模式下以动态多反应监测模式检测,外标法定量。33种初级芳香胺在20%乙醇、50%乙醇和3%乙酸(氨水调至pH 7.0)迁移溶液中的绝对基质效应分别为86.1%~97.3%、88.7%~104.0%和62.7%~81.3%,在各自线性范围内的线性关系良好(r>0.99),检出限和定量限分别为0.02~1.04μg/kg和0.07~3.26μg/kg。本方法的迁移实验针对性强、灵敏可靠,可实现食品接触材料及制品中初级芳香胺迁移量的准确测定。

摘要： 建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定小鼠肝、肺、肾中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量。首先识别小鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白特征多肽,分别为GSEGPQGVR、GPSGFR。采用子离子及保留时间定性,以GLAGMK为内标对小鼠肝、肺、肾中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白含量进行分析。结果表明,2个特征多肽在1~500 mg/L浓度范围内的线性关系良好,相关系数均大于0.99,精密度相对标准偏差小于3.7%,加标回收率在86%~118%之间。小鼠生长过程中,肝、肺、肾中Ⅰ型胶原蛋白的比例呈增加趋势,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白总量呈先增加后降低的趋势。该方法前处理简便高效、精密度高、重现性好,可用于小鼠肝、肺、肾中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的精确定量。

摘要： 采用改良的QuEChERS法结合高效液相色谱-串联质谱技术,建立了黄金罗汉果中50种常用农药残留的测定方法。样品采用水-1%(体积分数)乙酸乙腈提取,经900 mg无水MgSO_(4)、450 mg PSA、300 mg C_(18)和50 mg GCB组合吸附剂净化。采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)色谱柱(150 mm×3.0 mm,2.7μm)分离,0.05%甲酸水溶液(含10 mmol/L甲酸铵)和95%甲醇(含10 mmol/L甲酸铵和0.05%甲酸)为流动相,电喷雾正负离子同时扫描、多反应监测(MRM)模式下检测,基质匹配标准溶液外标法定量。结果显示,50种农药在各自质量浓度范围内线性关系良好,相关系数(r)均大于0.99,定量下限为0.01~0.02 mg/kg。2 LOQ、5 LOQ、20 LOQ、40 LOQ 4个加标水平下的平均回收率为60.7%~115%,95%以上农药的相对标准偏差(RSD)小于15%,符合痕量分析要求。该方法便捷可靠,适用于黄金罗汉果中农药多残留检测。

摘要： 建立了婴幼儿果蔬米粉中17种新烟碱类杀虫剂及代谢物的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)分析方法。样品经含1%(体积分数)甲酸的乙腈提取,QuEChERS净化,氮气吹干后,用含0.1%甲酸的乙腈水溶液(1∶4,体积比)定容。采用Acquity BEH C色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,0.1%甲酸水溶液和乙腈作为流动相梯度洗脱,高效液相色谱-串联质谱检测。结果表明,17种目标物在对应的质量浓度范围内线性良好,相关系数(r)均大于0.995 4;方法检出限(LOD)为0.02~0.15μg/kg,定量下限(LOQ)为0.06~0.50μg/kg;在LOQ、2.0μg/kg、10.0μg/kg 3个加标水平下,17种目标物在水果米粉中的平均回收率为62.5%~103%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~17%;蔬菜米粉中的平均回收率为66.4%~108%,RSD为4.3%~13%。该方法灵敏、准确,简便、可靠,适用于婴幼儿果蔬米粉中17种新烟碱类杀虫剂及代谢物的同时检测。

摘要： 建立了高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定化妆品中9种禁用生物碱.采用水作为样品分散剂,氨水-甲醇(2:98,V/V)作为提取剂,使用正己烷除脂,实现一步完成提取与净化;用Poroshell 120 Bonus-RP色谱柱分离,以0.2％甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾正离子模式下,以多反应监测(MRM)模式测定,推测生物碱的质谱碎裂机理.结果表明,9种生物碱在相应的浓度范围内线性关系良好,线性相关系数r2为0.997 8～0.999 8.方法的检出限和定量限分别为0.03?0.36 μg/kg和0.1?1.2 μg/kg,3种加标浓度的回收率为85.3％?135.3％,相对标准偏差为1.0％?13.4％.该方法前处理简便高效、测定结果准确、灵敏度高,适用于化妆品中禁用生物碱的检测及化妆品的安全性评价.

摘要： 目的 建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测定大鼠血浆中伏立康哇和卡泊芬净的浓度,并用于伏立康唑和卡泊芬净单独给药和联合给药后SD大鼠体内的药动学初步研究.方法 伏立康哇、卡泊芬净分别以氘代伏立康哇和氘代卡泊芬净为内标,血浆样品经乙腈提取,以0.1％甲酸-乙腈和0.1％甲酸-水为流动相,用Phenomenex Synergi Hydro-RP80A柱进行梯度分离,0.5 mL/min体积流量,柱温为常温,10μL进样量,多级反应监测(MRM)ESI正离子模式;12只SD大鼠随机分成3组,即伏立康哇(ig,40mg/kg)组、卡泊芬净(iv,5mg/kg)组、伏立康唑(ig,40mg/kg)与卡泊芬净(iv5 mg/kg)联合给药组,分别于给药后不同时间点颈静脉采血进行浓度测定,并计算药动学参数.结果 伏立康唑在0.5?500.0ng/mL、卡泊芬净在4?4000 ng/mL线性关系均良好,批内精密度(RSD％)和准确度(RE％)均小于10％,伏立康唑和卡泊芬净提取回收率均大于90％;SD大鼠单剂量联合给予伏立康唑和卡泊芬净后,伏立康哇消除变快,卡泊芬净的消除变慢;伏立康哇、卡泊芬净的Cmax、AUC均高于单独用药.结论 HPLC-MS/MS法的专属性强、灵敏、准确、可靠,可用于测定SD大鼠血浆中伏立康哇和卡泊芬净的浓度及药动学研究.伏立康唑延缓了卡泊芬净在动物体内的消除速度,卡泊芬净通过促进伏立康唑的吸收,增加了其在动物体内的血药浓度,联用后二者生物利用度均提高.

摘要： 建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定大鼠血浆中烟碱、可替宁对映异构体,并开展药代动力学研究.样品用甲醇进行蛋白沉淀,Chiralpak IG-3手性色谱柱(250 mm×4.6 mm×3μm)分离,流动相为0.2％ 甲酸铵-甲醇溶液,流速1.2 mL/min,内标法定量.结果表明,烟碱、可替宁对映异构体能同时实现基线分离,其定量限为0.5μg/L,该方法的线性范围、选择性、准确性、精密度、基质效应、稳定性等均符合方法学验证要求.药代动力学研究结果表明,在大鼠皮下注射烟碱消旋体条件下,烟碱对映异构体的代谢行为无显著性差异,S-可替宁和R-可替宁的生成速率无显著性差异,但S-可替宁的清除速度显著慢于R-可替宁.

摘要： 本发明公开了一种高通量液相色谱串联质谱的高通量液相色谱串联质谱的检测方法，所述方法包括：S1样品制备、S2样品前处理、S3液相色谱分离以及S4串联质谱检测等步骤；此外，本发明还公开了一种高通量液相色谱串联质谱法检测15种胆汁酸的方法，该方法提供了一种适用于人血清中胆汁酸检测，并且样品前处理简单、可以同时检测15种胆汁酸、检测特异性好、整个检测流程时间短、通量高的高通量液相色谱串联质谱的检测方法。

摘要： 本发明提供一种附子的高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法，属于药物检测技术领域，所述高效液相色谱检测方法是取附子供试品溶液利用0.04mol/L的乙酸铵‑乙腈作为流动相进行高效液相色谱检测，即得检测结果；所述高效液相色谱质谱联用检测方法利用上述附子的高效液相色谱检测条件进行检测。本发明通过调整色谱条件及附子的前处理过程，再分别采用高效液相色谱检测方法及高效液相色谱串联质谱联用检测方法对附子进行检测，能够有效将活性成分分离并检出。

摘要： 本发明涉及一种高效液相色谱配合液相色谱串联质谱检测兽药非法添加喹诺酮类物质，包括样品处理、标准工作溶液配置、标准曲线的绘制、定性分析和定量分析；其中样品处理包括以下步骤，步骤1：称取样品，将样品置于离心管中，加入Na2.EDTA、乙腈、甲醇、氯化钠和磷酸盐缓冲溶液，旋涡混匀，并震荡提取上清液，分组加入蒸馏水稀释至100倍、1000倍和10000倍；步骤2：用甲醇对步骤1中稀释后上清液进行洗脱，洗脱液置于试管中40°C氮气浓缩至干，加入甲酸乙腈定容液后，涡旋混匀，过0.22um滤膜备用；由于采用液相色谱串联质谱和高效液相色谱，提高了定性和定量的准确性。

摘要： 本发明属于微量化合物检测领域，涉及一种高效液相色谱‑串联质谱结合液液萃取法定量检测甲钴胺的方法，包括：取甲钴胺标准品配制甲钴胺储备液，在避光条件下进行；以氰钴胺内标成品作为内标溶液；在避光条件下，取血清样品，加入内标溶液，预处理后，采用正己烷进行液液萃取，均质、离心，取上清液，吹干，再用甲醇复溶，取上清溶液，进行HPLC－MS/MS分析，以内标法测定血清样品中甲钴胺浓度。用于临床上甲钴胺的浓度监测。将血清经过液液萃取的前处理后，用质谱扫描甲钴胺离子对，对其进行浓度定量。从特异性、线性、灵敏度、准确度、精密度、回收率和稳定性等方面对甲钴胺在人血清中的测定进行了充分的验证，检测效果较好。

摘要： 本发明公开一种分散液液微萃取‑高效液相色谱‑串联质谱同时测定烟叶中多种黄曲霉毒素的方法，包括以下步骤：S1、称取待测烟末，加入甲醇水溶液超声提取；S2、取上清液加C18吸附剂涡旋，离心取上层清液，加入萃取剂混合均匀，迅速注入水中超声振荡得到乳浊液；S3、将乳浊液离心分层，取下层有机溶液氮气吹干；S4、将固形物用甲醇‑水溶液复溶制成待测液；S5、配制黄曲霉毒素的基质配标系列标准工作溶液，采用HPLC‑MS/MS同时检测黄曲霉毒素，建立标准曲线；S6、将待测液置于色谱瓶内，采用HPLC‑MS/MS进行定量分析。本方法的样品前处理简单，结果准确，灵敏度高，适合于烟叶中多种黄曲霉毒素同时检测。

摘要： 本发明公开了一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中3种脂质的方法，所述3种脂质分别为：α‑HB、OA和LGPC；采用超高效液相色谱串联质谱法检测预处理的血浆中的脂质的含量，先利用超高效液相色谱将目标待测物与血浆基质中的干扰组分进行分离，再利用质谱同位素内标法定量，以标准品与内标物的浓度比为X轴，标准品与内标物峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算出3种脂质的含量；采用本发明的技术方案，将血浆样本与所有待测物的混合内标溶液混合，样本无需衍生化处理，前处理简单，只需一步蛋白沉淀处理，样本用量小，灵敏度高，特异性强，5.0分钟之内可同时检测3种脂质，可用于临床上血浆脂质的诊断及健康评估。

摘要： 本发明提供了一种基于超高效液相色谱串联高分辨质谱的细胞脂质组学分析方法，涉及分析化学领域和脂质组学研究领域，本发明的方法包括将细胞用PBS调整密度后，进行超声破碎，得到细胞悬液；将细胞悬液用甲醇与二氯甲烷溶液提取后获得待测样品；将所述待测样品通过超高效液相色谱‑四极杆‑静电场轨道阱傅里叶转换质谱进行分离和测定；利用软件对测得的脂质化合物进行定性分析，筛选检测典型的甘油脂类、甘油磷脂类、鞘脂类等多类脂质，该方法操作简单、脂质覆盖范围广，且无需标准品，可有效应用于不同类型细胞的脂质组学分析，从而进一步开展细胞毒性或活性等生物效应研究。

摘要： 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中3种脂质的试剂盒，3种脂质分别为：α‑HB、OA和LGPC；所述试剂盒包括如下试剂：洗脱液：洗脱液A和洗脱液B、混合标准品储备液、混合内标溶液、蛋白质沉淀剂和质控品；本发明涉及一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中3种脂质的试剂盒，将血浆样本与所有待测物的混合内标溶液混合，样本无需衍生化处理，前处理简单，只需一步蛋白沉淀处理，样本用量小，灵敏度高，特异性强，5.0分钟之内可同时检测3种脂质，可用于临床上血浆脂质的诊断及健康评估。

摘要： 本发明公开了一种基于高效液相色谱串联高分辨质谱的弓形虫的脂质组学分析方法及应用，该脂质组学分析方法包括：将待测虫体样品用氯仿‑甲醇‑水溶液悬起后超声波破碎，提取液经离心、氮吹和甲醇复溶后过滤进样，使用液相C18色谱柱分离，利用由乙腈、异丙醇、乙酸铵、甲醇和水组成的A和B流动相进行洗脱，之后分别在正、负离子模式下用QTOF高分辨质谱仪全扫描模式检测，根据目标脂类分子的化学式，对测得的数据进行筛查和鉴定；该方法具有灵敏、准确和不依赖标准化合物的优点，可高效地适用于弓形虫脂质组学分析。

摘要： 本发明涉及一种污水中抗生素的固相萃取‑超高效液相色谱‑串联质谱快速测定法，该方法包括以下步骤：(1)样品前处理：向污水中加入内标溶液，混合均匀后，将水样过滤，并调节pH值；(2)样品萃取：将固相萃取小柱活化，将水样在固相萃取小柱进行富集，然后对固相萃取小柱进行淋洗和洗脱，收集洗脱液并吹至近干，得到残渣；(3)质谱检测：溶解残渣得到待检测液，将待检测液进行色谱‑质谱检测。与现有技术相比，本发明运检出限较低、回收率较高，且前处理步骤简单，上样量较小，检测分析时间优化，为污水中抗生素的快速检测提供了更灵敏和准确的技术方法。