骨髓单个核细胞

摘要： 目的探讨急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞白细胞介素-24(IL-24)的表达及临床意义。方法选取我院2018年1月至2020年6月收治的126例急性淋巴细胞白血病患者作为观察组,另选取同期70例健康体检者作为对照组,采集并分离骨髓单个核细胞。实时荧光定量PCR(qPCR)检测IL-24表达水平;分析骨髓单个核细胞中IL-24表达与急性淋巴细胞白血病临床病理特征及预后的关系。结果观察组IL-24水平显著低于对照组,且观察组中T系显著低于B系,未缓解期显著低于缓解期(P0.05);IL-24低表达组中位生存期为5.00个月,高表达组中位生存期为7.00个月。结论IL-24对急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞具有明显的生长抑制、诱导凋亡作用。

摘要： 目的:探究颅内-外动脉搭桥术联合骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNCs)治疗缺血性脑血管病临床疗效.方法:选择于2016年1月-2018年1月间河南大学第一附属医院收治的缺血性脑血管病患者作为研究对象,随机抽出80例,将80例缺血性脑血管病患者随机分为对照组和观察组,每组各40例.对照组给予颅内外动脉搭桥术+血清注射,观察组给予颅内外血管搭桥手术+BMMNCs经搭桥血管注射.对比两组缺血性脑血管病患者术前及术后3个月、6个月、12个月、24个月NIHSS评分和治疗前后梗死脑组织面积.结果:术前两组缺血性脑血管病患者的NIHSS评分对比差异无统计学意义(P>0.05);术后3、6、12、24个月,两组缺血性脑血管病患者的NIHSS评分对比差异均有统计学意义(P0.05),治疗后,观察组患者梗死部位面积缩小程度明显大于对照组(P<0.05).结论:颅内-外动脉搭桥术联合BMMNCs治疗缺血性脑血管病临床疗效确切,能够明显改善患者梗死情况,减少神经功能损伤,具有较高的应用价值.

摘要： 目的 研究S100钙结合蛋白(S100A2)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(Blimp1)在多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNCS)中的表达水平及意义.方法 选取2018年3月至2020年5月于河南省中医院治疗的MM患者82例作为观察组(采用VAD治疗方案),同时选取同期贫血患者(常规贫血治疗)35例作为对照组.分别采用酶联免疫吸附法与反转录聚合酶链式反应法检测MM患者BMMNC中SS100A2、Blimp1的水平.观察比较两组一般资料及S100A2、Blimp1表达水平;采用Pearson相关性检验分析MM患者Blimp1、S100A2表达水平的相关性;建立受试者工作特征(ROC)曲线分析MM发生的预测价值.结果 观察组S100A2表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Blimp1表达水平显著高于对照,组差异有统计学意义(P<0.05).S100A2、Blimp1表达水平均为MM发生的独立危险因素(P<0.05).S100A2与Blimp1呈显著负相关(P<0.05).S100A2、Blimp1及联合指标预测MM发生的曲线下面积(AUC)分别为0.881、0.836、0.945,联合指标预测价值更高,敏感度和特异度分别为97.1％与78.0％.结论 S100A2、Blimp1表达水平均可作为MM发生的独立危险因素,且S100A2、Blimp1表达水平均可作为MM发生的预测因子,其中联合指标预测价值更高.

摘要： 目的:探讨急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者骨髓标本中鼠双微粒体2(murine double minute 2,MDM2)环状RNA(circ-MDM2)表达的临床意义.方法:采用实时定量PCR检测92例AML患者和22例对照组的骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMNCs)中circ-MDM2表达水平.采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价circ-MDM2表达的诊断价值.分析circ-MDM2表达水平与AML患者临床参数的关系.使用Kaplan-Meier曲线分析circ-MDM2对总体生存时间和无白血病生存时间的影响.结果:与对照组相比,circ-MDM2在AML患者中明显升高(P0.05).结论:circ-MDM2在AML患者中明显上调,并且可以作为诊断AML的潜在生物标志物.

摘要： 目的:通过对骨髓单个核细胞(BM-MNCs)移植治疗溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型中miR-155的表达,探讨BM-MNCs移植对UC的疗效及作用机制.方法:72只小鼠取54只随机分为正常对照组、UC模型组、BM-MNCs移植组,对UC模型组和BM-MNCs移植组构建小鼠溃疡性结肠炎模型,余18只小鼠用于提取BM-MNCs,对成功构建UC模型的移植组小鼠进行BM-MNCs细胞移植,对移植前后的各组小鼠使用DAI评分,HE染色的方法观察肠道组织损伤情况,应用rt-PCR技术测结肠组织中miR-155的表达.结果:BM-MNCs移植组中,移植后小鼠结肠组织中miR-155的表达较UC模型明显降低,且DAI评分随之降低,与UC模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05).结论:BM-MNCs移植对小鼠UC有治疗作用,并且考虑其通过抑制miR-155及其相关因子的表达而发挥效应.

摘要： Objective To analyze the safety of PPP2R5C small interference RNA. Methods Micromorphological changes between the cells transfected with PPP2R5C small interference RNA 72 h K562 cells and MOCK K562 cells by atomic force microscope(AFM). The expression of PPP2R5C gene in K562 cells, healthy individual bone marrow mononuclear cells(MNCs), MNC-siRNA and MOCK-siRNA were detected by real-time PCR. The effect of PPP2R5C-siRNA on the differentiation and proliferation ability of healthy individual BM-MNCs in vitro was analyzed by methylcellulose semi-solid culture. Results There was no significant difference in cell height and radius among the cells transfected with PPP2R5C small interference RNA. The expression of PPP2R5C in BM-MNCs of 3 healthy individuals was significantly lower than that of K562(P ＜ 0.05). There was no significant change in PPP2R5C gene expression in BM-MNCs before and after transfection. There was no significant difference in the formation of BFU-E, CFU-GM and CFU-Meg in healthy human BM-MNCs after PPP2R5C-siRNA transfection and seed plate 14 d compared with MOCK control group(P = 0.723, 0.826, 0.448). Conclusion PPP2R5C-siRNA has no significant effect on the proliferation and differentiation of BM-MNCs in healthy individual in vitro, which preliminarily illustrates its safety.%目的 探讨PPP2R5C小干扰RNA的安全性.方法 利用原子力显微镜观察转染PPP2R5C小干扰RNA 72 h K562细胞株干扰组、空转组及阴性对照组间微观形态学变化;利用荧光实时定量PCR检测K562细胞株组、健康人骨髓单个核细胞组、转染PPP2R5C-siRNA的健康人骨髓单个核细胞组及空转的健康人骨髓单个核细胞组的PPP2R5C基因表达量;利用甲基纤维素半固体培养方法分析PPP2R5C小干扰RNA作用后, 对转染组(siRNA)及空转组(MOCK)的健康人骨髓单个核细胞体外分化及增殖能力的影响.结果转染PPP2R5C小干扰RNA 72 h K562细胞株各组间在细胞高度和半径上的差异无统计学意义(P＞ 0.05); 3例健康人骨髓单个核细胞中的PPP2R5C基因表达明显低于K562, 差异有统计学意义(P ＜0.05);转染前后骨髓单个核细胞中PPP2R5C基因表达量无明显变化.PPP2R5C-siRNA转染、种板后14 d, 健康人骨髓单个核细胞体外BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg的形成与MOCK对照组比较差异无统计学意义(P=0.723、0.826、0.448).结论 PPP2R5C小干扰RNA对健康人骨髓单个核细胞的体外增殖和分化无显著影响, 初步说明其安全性.

摘要： 目的：体外培养骨髓单个核细胞(BMNCs),并观察其成脂肪细胞分化能力. 方法：脱臼处死1～2月龄雄性SD大鼠,无菌取股骨和胫骨骨髓制作细胞悬液,EBM-2(含20％FBS、15μg/ml ECGs)培养基差速贴壁法培养第三次贴壁细胞,传代扩增,3到5代细胞用于实验.流式细胞分析检测CD34、CD44、CD45、CD90、CD144(VE-cadherin)和血管内皮细胞生长因子受体-2(KDR)表达;STEMPRO Adipogenesis Differentiation Kit检测细胞成脂肪分化能力. 结果：通过差速贴壁法可以有效去除淋巴细胞、红细胞、骨髓间充质干细胞(BMSCs)等细胞而获得相对单一的骨髓单个核细胞(BMNCs),流式细胞分析表明培养的BMNCs细胞表达CD34、CD44、CD45以及CD90等表面标志,但是几乎不表达CD144和KDR;在未经诱导的情况下,培养的BMNCs也可能自发分化为脂肪细胞;培养BMNCs具有极强的脂肪细胞分化能力,成脂肪细胞诱导后在第3、5、7天,BMNCs成脂率分别为(22.4±3.8)％、(55.6±11.4)％以及(82.4±17.7)％,显著高于诱导培养第1天((1.3±1.1)％,P＜0.01). 结论：骨髓单个核细胞体外培养后可以诱导分化为脂肪细胞.

摘要： 目的：通过检测儿童急性白血病(AL)骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cell,BMMNC)中的自噬相关基因Atg3和Atg5的表达,探讨细胞自噬在儿童AL发病机制中的意义.rn 方法：收取郑州大学第一附属医院儿科血液病区确诊AL患儿骨髓标本74例,分组为初治组37例,缓解组28例,难治复发组9例;对照组选取非肿瘤性疾病儿童骨髓标本28例.淋巴细胞分离液分离出骨髓单个核细胞,采用单丹磺酰尸胺(MDC)染色后荧光显微镜、流式细胞术检测细胞自噬,RT-PCR检测自噬基因Atg3mRNA和Atg5mRNA的表达.rn 结果：荧光显微镜下观察到初治组、难治复发组细胞自噬现象较多见，经流式细胞术检测，初治组、难治复发组的自噬率分别为(17.07±2.31)%.(15.37±1.59)%,明显高于对照组的((2.7±f1.57)%，难治复发组明显高于缓解组，差异均有统计学意义(p<0.05)。rn 结论：初治组和难治复发组BMMNC的自噬活性增强，自噬相关基因Atg3mRNA、Atg5mRNA的表达均上调，揭示Atg3AtgS基因激活诱导的自噬活性增强可能与儿童白血病的发生、发展和耐药机制有关。

摘要： 慢性高原病(CMS)是以红细胞过度增生和低氧血症为特征,主要病因是机体缺氧.低氧诱导因子(HIF)是缺氧反应的中枢,HIF-1α和HIF-2α调节下游EPO基因表达,而EPO可以自分泌/旁分泌方式刺激红系造血.本项目拟以CMS患者为研究对象,检测骨髓单个核细胞(MNCs) HIF-1α、HIF-2α、EPO及EPOR、mRNA和蛋白质水平,了解上述指标的变化及相互关系.结果显示慢性缺氧可能导致CMS患者骨髓MNCs HIF-2a表达增高，进而异常调控下游EPO的高表达，EPO以自分泌或旁分泌方式促进红细胞生成，导致CMS的发生、发展。

摘要： 慢性高原病(CMS)是高原地区常见病,主要特征之一是红细胞过度积累,但其机制尚未完全阐明.细胞凋亡机制在生理造血调控中发挥着重要的作用,本研究旨在研究细胞凋亡调节蛋白Bcl-2、Bax及Bid在CMS骨髓单个核细胞(BMNCs)的变化及临床意义.造血细胞凋亡增加与红细胞过度积累可能在CMS的发病机制中同时存在，二者的相互制约与平衡失衡与疾病发生有关。

摘要： 目的：近年来的研究表明血管活性物质尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ，UII)、脑钠肽(brain natriuretic peptide，BNP)与冠心病心力衰竭的发病机制密切相关，本研究观察参芪扶心口服液对急性心肌梗死患者骨髓单个核细胞移植后UII和BNP的影响。rn 方法：80例发病12小时以上错过急诊PCI最佳时机的住院急性心肌梗死患者，随机分为治疗组(43例)与对照组(37例)。对照组予骨髓单个核细胞移植。治疗组在对照组骨髓单个核细胞移植方案基础上加用参芪扶心口服液，骨髓单个核细胞移植前开始服用参芪扶心口服液，每次10ml，每日3次。移植前及移植后1天、7天放射免疫法测定血浆UII和BNP水平。rn 结果：治疗组和对照组患者UII水平在细胞灌注1天后显著升高，和移植前相比均有增加，分别为129％(P0.05)，对照组细胞移植7天后又升高到移植前的87％。治疗组患者BNP水平在细胞移植后7天未再显著升高，与对照组相比有显著性差异(P<0.05)。rn 结论：参芪扶心口服液有可能通过影响BNP和UII水平相关的骨髓单个核细胞的变化而提高细胞移植的疗效。

摘要： 目的:探讨通冠胶囊对骨髓单个核细胞(bone marrowmononuclearcells BMMNCs)向损伤血管内膜迁移分化的影响。rn 方法:建立大鼠颈总动脉损伤模型，从供体大鼠骨髓中分离单个核细胞，经荧光染料PKH26标记后由大鼠尾静脉注射入颈总动脉损伤的大鼠体内，实验组给予通冠胶囊混悬液灌胃，对照组给予等量的生理盐水灌胃，4周后取颈总动脉，冰冻切片。观察两组颈动脉内膜面积和血管内膜中膜(intima area/media area，Ai/Am)比值的差异；炭光显微镜下观察两组骨髓单个核细胞向颈动脉内膜迁移的差异；ELISA法检测两组大鼠血清血管内皮生长因子(VEGF)和基质衍生因子1水平(SDF-1)的差异。rn 结果:通冠胶囊组颈动脉横切和纵切面血管内膜有红色荧光表达，而对照组血管切片仅有散在荧光光点；通冠胶囊组血管内膜面积和血管内膜中膜比值均较对照组有明显降低(P＜0.01)；2周、4周后通冠胶囊组VEGF和SDF-1水平均较对照组有明显增强(P＜0.01)。rn 结论:通冠胶囊能够动员骨髓单个核细胞向损伤血管内膜迁移，并参与损伤血管内膜的修复。

摘要： 目的：研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病(AL)患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义.方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测52例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿作为对照.结果：52例AL患儿HOXA9基因阳性表达率为63％,急性髓细胞白血病(AML)组其阳性表达率(86％)明显高于急性淋巴细胞白血病(ALL)组(35％)及对照组(13％)(P＜0.05);AML组HOXA9 mRNA表达水平明显高于ALL组及对照组(P＜0.05),而ALL组与对照组差异无统计学意义.HOXA9在各型儿童AML中表达不同,mRNA相对表达水平依次为:M5型＞M4型＞M1和(或)M2型,而在M3型中未检测到表达.HOXA9在AML患儿高危组中的阳性表达水平较高.AML患儿初治组HOXA9基因阳性表达率(95.00％)及半定量(0.490±0.140)明显高于缓解组和对照组(P＜0.05),而缓解组与对照组比较差异无统计学意义;未缓解组HOXA9基因表达显著高于缓解组和对照组(P＜0.05),与初治组无明显差异.结论：HOXA9基因高表达与AL的发生相关,在患儿AML中表达水平明显高于ALL;HOXA9基因高表达者与白血病危险程度有关,且提示预后不良;因此,HOXA9基因有望成为儿童AL诊断、治疗及判断预后的一个靶点.

摘要： 目的：检测原发性血小板增多症(ET)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)的细胞周期分布.方法：按照2008年WHO诊断标准,选取我院初诊的原发性血小板增多症(ET)患者20例,以10名骨髓捐献的健康志愿者作为正常对照组.应用流式细胞仪(FCM),通过碘化丙锭细胞核染色,Cell Qest软件测定细胞的荧光2(FL2)直方图,通过ModiFit2.0软件分析,对其BMMNC的细胞周期分布进行检测.

摘要： 目的:检测急性白血病患者骨髓单个核细胞中自噬相关基因Beclin1和Atg5的表达水平,探讨Beclin1和Atg5在白血病发病中的作用.方法：采用荧光定量RT-PCR方法检测46例AML(15例低危组、16例中危组和15例高危组)、31例急性淋巴细胞白血病(ALL)(16例标危组、15例高危组)和15名正常人骨髓单个核细胞中Beclin1和Atg5mRNA的表达水平.

摘要： 目的：研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓CD34+CD38-CD123+细胞STAT5磷酸化(P-STAT5)水平,初步探讨MDS患者骨髓原代细胞胞内与增殖有关的STAT5激活状态.方法：采用流式细胞术分别检测36例MDS患者及14名正常对照原代骨髓单个核细胞EPO刺激前、后CD34+CD38-CD123+和CD34+CD38-CD123-细胞P-STAT5平均荧光强度(MFI).

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明涉及一种外周血单个核细胞的体外提取装置及外周血单个核细胞的提外提取方法。该外周血单个核细胞的体外提取装置的第一轴移动组件和第二轴移动组件通过移动架滑动而带动移液机构在第一轴和第二轴上滑动，且移液机构在移动架上沿第三轴滑动而使移液机构能够伸入容器中，驱动组件给移液机构提供一吸取物质的力和一释放物质的力，以使移液机构能够吸取物质和释放物质，电路控制组件能够根据视觉传感器组件采集的图像计算出样品中的白膜层的位置，并控制第一轴移动组件、第二轴移动组件、驱动组件和移液机构工作以使移液机构吸取样品中的白膜层。上述外周血单个核细胞的体外提取装置的提取率较高且提取的外周血单个核细胞的纯度较高。

摘要： 本发明提供了一种提高骨髓单个核细胞迁移能力及心肌细胞保护能力的预处理方法，所述方法为：将新鲜分离的骨髓单个核细胞先以Valsartan溶液培养30分钟，再以Angiotensin II溶液培养2小时，得到处理后的骨髓单个核细胞用于移植治疗急性心肌梗死；本发明通过预处理间接激活骨髓单个核细胞血管紧张素2型受体，AT2R激活的骨髓单个核细胞分泌一氧化氮增加，迁移能力及心肌细胞保护能力增强，一定程度上可提高其移植治疗急性心肌梗死的疗效。

摘要： 本发明提供了一种提高骨髓单个核细胞迁移能力及心肌细胞保护能力的预处理方法，所述方法为：将新鲜分离的骨髓单个核细胞先以Valsartan溶液培养30分钟，再以Angiotensin II溶液培养2小时，得到处理后的骨髓单个核细胞用于移植治疗急性心肌梗死；本发明通过预处理间接激活骨髓单个核细胞血管紧张素2型受体， AT2R激活的骨髓单个核细胞分泌一氧化氮增加，迁移能力及心肌细胞保护能力增强，一定程度上可提高其移植治疗急性心肌梗死的疗效。

摘要： 本发明提供了一种提高骨髓单个核细胞迁移能力及心肌细胞保护能力的预处理方法，所述方法为：将新鲜分离的骨髓单个核细胞置于CGP42112A溶液中培养2小时，获得处理后的骨髓单个核细胞用于移植治疗急性心肌梗死；所述CGP42112A溶液中CGP42112A终浓度为5~20nmol/L，溶剂为低糖DMEM培养基。本发明通过预处理直接激活骨髓单个核细胞血管紧张素2型受体，AT2R激活的骨髓单个核细胞分泌一氧化氮增加，迁移能力及心肌细胞保护能力增强，一定程度上可提高其移植治疗急性心肌梗死的疗效。

摘要： 本发明公开了一种组织工程用骨髓单个核细胞、血小板水平离心富集装置，带有过滤部的内筒，在内筒和中心管差速同向转动作用下，血浆和细胞分离，同时细胞逐渐向锥形部移动，利用内筒上的不同过滤孔径的过滤部，使三种细胞先通过孔径小的(由于单个核细胞直径最大)，这样最后单个核细胞留到最后，富集进入到位于内筒外的筒壳内。如此能够非常快速的富集到单个核细胞。

摘要： 本发明公开了一种再生医学用全密闭式自体骨髓单个核细胞、血小板快速循环过滤富集器，包括过滤组件和循环组件，过滤组件用于获取所需的细胞，循环组件用于向过滤组件循环通入骨髓血，所述过滤组件包括三级过滤网，过滤孔径由大到小依次设置，最大一级过滤网的孔径用于过滤单个核细胞，中间一过滤网的级孔径过滤网用于过滤红细胞，最小一级过滤网的用于过滤血小板；循环组件将骨髓血循环且依次从最大一级过滤网通过中间一级过滤网最后通过最小一级过滤网。该富集器能够有效的提高富集效率。

摘要： 本实用新型公开了一种再生医学用全密闭式自体骨髓单个核细胞、血小板快速循环过滤富集器，包括过滤组件和循环组件，过滤组件用于获取所需的细胞，循环组件用于向过滤组件循环通入骨髓血，所述过滤组件包括三级过滤网，过滤孔径由大到小依次设置，最大一级过滤网的孔径用于过滤单个核细胞，中间一过滤网的级孔径过滤网用于过滤红细胞，最小一级过滤网的用于过滤血小板；循环组件将骨髓血循环且依次从最大一级过滤网通过中间一级过滤网最后通过最小一级过滤网。该富集器能够有效的提高富集效率。

摘要： 本实用新型公开了实用新型名称，一种全密闭式自体骨髓单个核细胞、血小板快速离心过滤富集器，包括离心管，其特征在于，所述离心管包括一级管、二级管、三级管；一级管底部带有一级过滤部用于过滤单个核细胞；二级管底部带有二级过滤部用于过滤红细胞；三级管底部为密封底，用于容纳血浆和过滤出来的血小板；一级管、二级管以及三极管相互固定，且骨髓血先后依次通过一级管、二极管，最后进入三极管；一级管底的一级过滤部，筛孔孔径小于单个核细胞最小直径，大于红细胞最大直径；二级管底的二级过滤部，筛孔孔径小于红细胞最小直径，大于血小板最大直径。由于采用了三级离心管，利用离心力和过滤网快速过滤分离三种细胞。

摘要： 本实用新型公开了一种组织工程用骨髓单个核细胞、血小板水平离心富集装置，带有过滤部的内筒，在内筒和中心管差速同向转动作用下，血浆和细胞分离，同时细胞逐渐向锥形部移动，利用内筒上的不同过滤孔径的过滤部，使三种细胞先通过孔径小的(由于单个核细胞直径最大)，这样最后单个核细胞留到最后，富集进入到位于内筒外的筒壳内。如此能够非常快速的富集到单个核细胞。